白细胞分离技术汇总

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'.外周血白细胞的分离：(细胞分离液有市售，有各种型号：白细胞、1>取3ml正常人的外周血(枸橼酸钠抗凝)与等体积pbs混匀后小2>吸取中间云雾状白细胞，加3－4mlPBS后3000r/min离心103>弃上清，加1mlPBS洗涤沉淀后，将细胞悬液转移至1.5mLEpinminEDTA7克；用三蒸水配成1升坚守无菌操作原则2.分层后的确有3层，准确说来是4层，最下面是红细胞，上面的一层不应该是稍微混浊的白色，应该也不是很难的，比较基本人外周血,肝素抗凝(100U?ml),等量无血清培养液(或者PBS等缓冲液)稀释。按1∶2的体积比缓置mlg30min,收集培养液2分离液界面上的单个核细胞。于无血清培养液,400离心10min,洗涤2次。数一外周血白细胞的分离1>取3ml正常人的外周血(枸橼酸钠抗凝)与等体积pbs混匀后小心的加于6ml白细胞分离液((33.9%泛影葡胺和9%Ficoll液按1：2.4体积比混合))液面上，1500r/min离心20min。(或先将抗凝血离心，然后吸取中间白细胞层，再混以等体积pbs然后小心加于等体积细胞分离液液面上，离心同上)2>吸取中间云雾状白细胞，加3－4mlPBS后3000r/min离心10min。3>弃上清，加1mlPBS洗涤沉淀后，将细胞悬液转移至1.5mLEp管中。4>3000r/min离心20min，弃上清。二自然沉降法降率的分離法，採集血液後應及時抗凝，通常選用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血纖維蛋白原形成纖維蛋白而防止血液凝固。操作原則是將含抗凝血的試管直立靜置室溫30