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文档简介
实验九过氧化物酶活性的测定第1页/共7页实验七过氧化物酶活性的测定原
理：
过氧化物酶广泛分布于植物的各个组织器官中。在有过氧化氢存在下，过氧化物酶能使愈创木酚氧化，生成茶褐色物质，可用分光度计测量生成物的含量。第2页/共7页材料与设备
实验材料:海桐、黄杨叶试
剂：
3％过氧化氢；，0.1mo1/L磷酸缓冲液pH6.0，pH7.0；
0.3%愈创木酚反应液：100mmo1／L磷酸缓冲液（pH6．0）100ml于烧杯中，加入愈创木酚0.3ml，于磁力搅拌器上加热搅拌，直至愈创木酚溶解。第3页/共7页操作步骤：
1．称取植物材料约0.2g，加入，0.1mo1/L磷酸缓冲液
(pH7.0)7ml(分次加入,最后用于洗研钵)，在研钵中研磨成匀浆，过滤或以
7000r／min离心15分钟，倾出上清液。第4页/共7页操作步骤：2.3.0ml0.3%愈创木酚反应液，加200ul3％过氧化氢，最后加酶液20ul（视酶活性大小而定，如酶浓度高可稀释后再测定），摇匀，立即在分光光度计470nm下测吸光度，从加入过氧化氢时立即开启秒表记录时间，1min读数一次（也可2min，视材料而定）。第5页/共7页操作步骤：3．以每分钟吸光度变化值表示酶活性大小。过氧化物酶活性(U)=△A470×稀释倍数/g.Fw.min
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