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文档简介
流感病毒临床标本的
采集方法、运输、保存处理
概述流感病毒分离成功与否很大程度上取决于临床标本的质量,及其保存运输等环节多数标本取自患者上呼吸道鼻咽腔,其次为气管和支气管分泌物及尸检组织一、采样对象和时间采样对象:流感样病例(没有服用过抗病毒药物)、人禽流感待查病例
流感样病例:发热(体温≥38℃),伴咳嗽或咽痛之一者,而缺乏其它的实验室确定诊断依据采集时间:病人发病后的头三天Eagel`s基础培养基抗生素名称终浓度庆大霉素0.1mg/ml抗真菌素2Ug/ml采样液抗生素含量三、临床标本的采集常用的标本种类:咽拭子鼻拭子漱口液鼻咽吸取物鼻洗液采咽拭子的器材和容器2、鼻拭子
将灭过菌干净的棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出,以同一拭子擦拭两侧鼻孔。将棉签头部浸入3-4ml采集液中,尾部弃去采鼻拭子的器材和容器内有HEPA膜进风道鼻咽吸取装置出风道吸取过程正确错误错误不要触摸病人的脸!4、漱口液用10ml生理盐水漱喉。漱时让患者头部微后仰,发“噢”声,让生理盐水在咽部转动。然后,用平皿或烧杯收集洗液四、标本收集注意事项操作要细心,严防标本间交叉污染,要做好自我保护采集标本要有一定力度标本采集后应迅速至于冰上或者4℃以下保存,因为流感病毒对热很敏感标本管上写明:医院名称,标本号,患者姓名,性别,采样日期标本采集后尽量在24小时内送到实验室进行病毒分离。24小时内未能进行病毒分离的标本应放-70℃或以下新鲜的临床采集标本应在4℃条件下,24小时内运送至全国流感监测网络实验室;未能24小时内送至实验室的,应置-70℃或以下保存冻存的临床采集标本应在冻存的条件下,低温送至实验室五、临床标本的运送要求六、临床标本的处理原则新鲜的标本送至实验室后,病毒分离标本应尽快进行接种分离,24小时内能进行接种的可置于4℃保存,如未能接种应置-70℃或以下保存冻存的标本送到实验室后,24小时内能进行病毒分离的,可以放置4℃保存。如未能分离的标本应置-70℃或以下保存七、临床标本的处理方法含聚丙烯纤维的拭子的采集标本:先将含聚丙烯纤维的拭子在管壁反复挤压后取出鼻洗液标本:充分振荡标本管,将粘液打碎。置4℃待其自然沉淀5~10分钟,取上清5ml。上清液可直接接种或低温保存
鼻咽吸取液:用干净灭菌过的毛细吸管,在无菌条件下反复吹打收集的溶液,以便打碎粘液,同样置4℃待其自然沉淀5~10分钟,取上清5ml。上清液可直接接种或低温保存肺组织材料:肺组织材料在无菌条件下,用高压灭菌的乳钵研磨后,用生理盐水配成20%悬液,2000rpm离心10min,取上清加入抗生素。接种细胞或鸡胚流感病毒株的运输寄送流感毒株标本的包装要求病毒标本必须放在大小适合的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料管里,拧紧。盖上盖子后不应有泄漏,推荐使用螺口细胞保存管保存和运输流感病毒标本直接在塑料管上用油性记号笔写明病毒的名称,同时也将病毒标本有关信息填在“流感/人禽流感毒株送检单”内,送检单应单独放在防水的袋子里将装标本的密封袋放入专用运输箱内(或疫苗冷藏包),放入冰排,然后以柔软物质填充,内衬具吸水和缓冲能力的材料标本运输:异地运输可以采用邮寄或快递的方法九、禽流感标本采集的生物安全防护1.采集人禽流感临床样本时,采集人员需要做好个人防护,戴防护口罩、帽子、护目镜、手套、防护衣、鞋套。2.人禽流感标本的运送、接收和保藏应当符合我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》(国务院424号令)的有关要求。3.人禽流感临床标本的处理、分装在生物安全二级的实验室里进行,采用生物安全三级防护。4.人禽流感病毒分离、培养、纯化,微量中和试验等实验必须在生物安全三级(BSL-3级)实验室里操作。5.临床标本病毒核酸提取在生物安全二级(BSL-
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