药物分析课件维生素类药物的分析详解

药物分析课件维生素类药物的分析详解演示文稿现在是1页\一共有123页\编辑于星期日（优选）药物分析课件维生素类药物的分析现在是2页\一共有123页\编辑于星期日概述维生素：是维持人体正常代谢机能所必需的微量营养物资。人体不能合成维生素。现在是3页\一共有123页\编辑于星期日

VitA、D2、D3、E、K1

等脂溶性水溶性

VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。分类按溶解度分返回现在是4页\一共有123页\编辑于星期日-H维生素A醇-COCH3维生素A醋酸酯-COC15H31维生素A棕榈酸酯R:第一节维生素A现在是5页\一共有123页\编辑于星期日为一个具有共轭多烯侧链的环己烯（一）结构与性质一、具有UV吸收存在多种立体异构化合物现在是6页\一共有123页\编辑于星期日VitA2VitA3易发生脱氢、脱水、聚合反应现在是7页\一共有123页\编辑于星期日鲸醇现在是8页\一共有123页\编辑于星期日△或有金属离子存在时氧化↑共轭多烯侧链易被氧化（二）现在是9页\一共有123页\编辑于星期日环氧化物VitA醛VitA酸现在是10页\一共有123页\编辑于星期日三氯化锑反应（一）条件无水无醇CHCl3鉴别试验二、现在是11页\一共有123页\编辑于星期日蓝色紫红现在是12页\一共有123页\编辑于星期日（BP（2000））λmax为326nm一个吸收峰UV法（二）λmax为350～390nm三个吸收峰现在是13页\一共有123页\编辑于星期日去水VitA（VitA3）↓VitA现在是14页\一共有123页\编辑于星期日现在是15页\一共有123页\编辑于星期日USP显色剂磷钼酸规定斑点颜色和Rf值BP

杂质对照品法显色剂三氯化锑TLC法（三）现在是16页\一共有123页\编辑于星期日立体异构体氧化降解产物合成中间体UV法（一）含量测定三、维生素A2维生素A3环氧化物维生素A醛维生素A酸现在是17页\一共有123页\编辑于星期日三点校正法（法定方法）1.原理：（1）杂质的吸收在310~340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；（2）物质对光的吸收具有加和性。现在是18页\一共有123页\编辑于星期日2.波长的选择：（1）1

VitA的max（328nm）（2）23

分别在1的两侧各选一点现在是19页\一共有123页\编辑于星期日测定对象VitA醋酸酯第一法等波长差法=12nm现在是20页\一共有123页\编辑于星期日第二法等吸收比法测定对象VitA醇1=325nm,2=310nm,3=334nm现在是21页\一共有123页\编辑于星期日测定法（1）基本步骤:第一步A的选择选择依据：所选A值中杂质的干扰已基本消除现在是22页\一共有123页\编辑于星期日注意：

C为混合样品的浓度第二步求现在是23页\一共有123页\编辑于星期日第三步求效价换算因数由纯品计算而得：现在是24页\一共有123页\编辑于星期日现在是25页\一共有123页\编辑于星期日现在是26页\一共有123页\编辑于星期日第四步：求标示量％现在是27页\一共有123页\编辑于星期日方法：（2）

第一法维生素A醋酸酯现在是28页\一共有123页\编辑于星期日判断是否在326～329nm之间在326～329nm之间改用第二法是否求算并与规定值比较现在是29页\一共有123页\编辑于星期日

规定值差值现在是30页\一共有123页\编辑于星期日

判断差值是否超过规定值的有一个以上超过无超过

计算A328（校正）

用A328计算现在是31页\一共有123页\编辑于星期日现在是32页\一共有123页\编辑于星期日03%－15%－3%第二法第二法现在是33页\一共有123页\编辑于星期日讨论VA醋酸酯的吸收度校正公式是用直线方程式法（即代数法）推导而来；VA醇的吸收度校正公式是用相似三角形法（几何法或称6/7定位法）推导而来。在应用三点校正法时，除其中一点在最大吸收波长处测定外，其余两点均在最大吸收峰的两侧进行测定。在测定前务必要校正波长。测定的样品应不得少于两份。现在是34页\一共有123页\编辑于星期日

VitAD胶丸中VitA的含量测定

精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差异项下（平均装量0.07985g/丸）的内容物0.1287g至10ml烧杯中，加环己烷溶解并定量转移至50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得吸收度为现在是35页\一共有123页\编辑于星期日A300：0.374A316

：0.592A328：0.663A340：0.553A360：0.228A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.834A360/A328：0.344求本品中维生素A占标示量的百分含量？现在是36页\一共有123页\编辑于星期日A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.834A360/A328：0.3440.5550.9071.0000.8110.299

+0.01－0.010+0.02+0.04－－－－－=====A328(校正)=3.52(2A328-A316-A340)=3.52(2×0.663–0.592–0.553)=0.637现在是37页\一共有123页\编辑于星期日A328(校正)–A328(实测)A328(实测)×100=0.637–0.6630.663×100=-3.92E1%1cm(328nm)=A328(校正)100ms/D=0.637100×0.1287/1250=61.87现在是38页\一共有123页\编辑于星期日供试品中维生素A效价=E1%1cm(328nm)×1900=61.87×1900=117553（IU/g）标示量%=VA效价(IU/g)×每丸内容物平均装量(g/丸)标示量(IU/丸)×100%=117553×0.0798510000×100%=93.9%现在是39页\一共有123页\编辑于星期日适用于维生素A醇（等吸收比法）第一法无法消除杂质干扰时用此法[皂化法、6/7A法]（3）第二法现在是40页\一共有123页\编辑于星期日水溶性脂溶性现在是41页\一共有123页\编辑于星期日判断max是否在323～327nm之间取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定计算是否现在是42页\一共有123页\编辑于星期日判断A300/A325是否大于0.73是否取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定计算A325(校正)现在是43页\一共有123页\编辑于星期日现在是44页\一共有123页\编辑于星期日03%－3%现在是45页\一共有123页\编辑于星期日三氯化锑比色法（二）优点简便快速λmax618nm～620nm标准曲线法缺点呈色不稳定（5~10s内）水分干扰与标准曲线温差≤1℃专属性差三氯化锑有腐蚀性（二）蓝色+3SbClVitA返回现在是46页\一共有123页\编辑于星期日第二节维生素D维生素D2一、结构与性质现在是47页\一共有123页\编辑于星期日维生素D3现在是48页\一共有123页\编辑于星期日开环的甾体：具有甾类化合物的显色反应，可用于鉴别。手性碳原子：具有旋光性，可用于鉴别。

多烯：可进行紫外检测。

现在是49页\一共有123页\编辑于星期日二、鉴别试验1.显色反应醋酐--硫酸反应D2

黄红紫绿

D3

黄红紫、蓝绿绿三氯化锑反应橙红色渐变粉红三氯化铁反应橙黄色二氯丙醇和乙酰氯反应绿色现在是50页\一共有123页\编辑于星期日2.比旋度鉴别维生素D2维生素D3溶剂

浓度比旋度值无水乙醇无水乙醇40mg/ml5mg/ml+102.5°～+107.5°+105°～+112°注意事项：应于容器开启30分钟内取样，在溶液配制后30分钟内测定。现在是51页\一共有123页\编辑于星期日

3.区别反应：以96%乙醇为溶剂，加乙醇和85%硫酸，D2显红色，在570nm处有最大吸收，D3显黄色，在495nm处有最大吸收。

4.其他方法：

TLC、HPLC、制备衍生物测熔点

现在是52页\一共有123页\编辑于星期日三、杂质检查维生素D2中麦角甾醇的检查：加洋地黄皂苷溶液，混合，放置18h不得发生浑浊或沉淀。前维生素D的光照产物现在是53页\一共有123页\编辑于星期日四、含量测定方法中国药典（2000年版）采用正相高效液相色谱法测定维生素D的含量，定量方法为内标法，内标物为邻苯二甲酸二甲酯，该法分为三个方法。

固定相：硅胶

流动相：正己烷-正戊醇（997：3）现在是54页\一共有123页\编辑于星期日第一法：用于无维生素A醇及其它杂质的干扰的情况，步骤如下：

1．系统适用性试验：测定重复性和分离度。

现在是55页\一共有123页\编辑于星期日

2．测定校正因子：

AS/mS

f1=--------

Ar/mr

f2=（ASmr-f1mSAr1）/（Ar1mS）

3．含量测定：

mi=（f1Ai1+f2Ai2）mS/AS现在是56页\一共有123页\编辑于星期日第二法：用于有杂质的干扰的情况，步骤如下：

1．皂化处理：皂化、乙醚提取、洗涤提取液、蒸除乙醚、制备供试液A。

2．净化：供试液A经液相色谱分离，准确收集含有维生素D及前维生素D混合物的全部流出液，制备成供试液B。

固定相：ODS

流动相：甲醇-乙腈-水（50：50：2）

3．含量测定：取供试液B按第一法测定。

现在是57页\一共有123页\编辑于星期日第三法：用于经第二法处理后仍有杂质的干扰的情况。步骤如下：1．制备供试液：取供试液A，净化，水浴加热，得供试液C。

制备对照液：对照品储备液：稀释、加热。

2．含量测定：在第一法的色谱条件下，交替精密进样对照液和供试液，按外标法定量。返回现在是58页\一共有123页\编辑于星期日苯并－二氢吡喃醇第三节维生素E

现在是59页\一共有123页\编辑于星期日名称R1R2相对活性α-生育酚β-生育酚γ-生育酚δ-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1***现在是60页\一共有123页\编辑于星期日dl－α－生育酚醋酸酯现在是61页\一共有123页\编辑于星期日结构与性质一、苯环+二氢吡喃环+饱和烃链1、UV2、乙酰化的酚羟基易水解]O[醌型化合物△生育酚-+orOHHVitE杂质，需检查现在是62页\一共有123页\编辑于星期日]O[生育红（一）硝酸反应橙红色鉴别二、75℃15′HNO3VitE生育酚现在是63页\一共有123页\编辑于星期日（橙红色）生育红生育酚HNO3强氧化剂现在是64页\一共有123页\编辑于星期日三氯化铁－联吡啶反应（二）现在是65页\一共有123页\编辑于星期日生育酚对-生育醌[O]弱氧化剂现在是66页\一共有123页\编辑于星期日血红色现在是67页\一共有123页\编辑于星期日

=41.0～45.5λmax=284nmλmin=254nm0.01%无水乙醇中UV法（三）现在是68页\一共有123页\编辑于星期日薄层板硅胶G展开剂环己烷-乙醚（4：1）显色剂硫酸（105℃5′）VitERf

=0.7-生育酚Rf

=0.5-生育醌Rf

=0.9TLC法（四）现在是69页\一共有123页\编辑于星期日2.游离生育酚

杂质检查

三、原理酸度

以NaOH滴定液（0.1mol/L）体积控制。现在是70页\一共有123页\编辑于星期日（M生育酚=430.8）例

取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过1.0ml。现在是71页\一共有123页\编辑于星期日≤2.15％限量现在是72页\一共有123页\编辑于星期日四、含量测定GC法（法定方法）（一）GC特点1、选择性好灵敏度高速度快分离效能好挥发性低、不稳定、极性强→衍生化易受样品蒸气压限制现在是73页\一共有123页\编辑于星期日载气→N2固定液→硅酮（OV-17）担体→硅藻土或高分子多孔小球柱温→265℃检测器→氢火焰离子化检测器(FID)内标→正三十二烷

n≥500R≥2VitE测定的色谱条件2、内标法加校正因子现在是74页\一共有123页\编辑于星期日内标法供试液（样品+内标）内标物对照液（对照+内标）是样品中不存在的物质与被测组分峰靠近能与各组分完全分离与被测组分的量接近现在是75页\一共有123页\编辑于星期日校正因子：现在是76页\一共有123页\编辑于星期日WWKK%VitE%10012=稀释倍数稀释倍数样对实际工作中的计算方法××××现在是77页\一共有123页\编辑于星期日（二）HPLC法外标法此外，还有铈量法、比色法和荧光法返回现在是78页\一共有123页\编辑于星期日氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)第四节维生素B1HClCl-现在是79页\一共有123页\编辑于星期日（一）溶解性1、易溶于水2、水溶液呈酸性（二）UV共轭双键λmax=246nm结构与性质一、现在是80页\一共有123页\编辑于星期日与生物碱↓→↓（三）硫色素反应（四）嘧啶环——噻唑环——（五）盐酸根呈氯化物的反应，用于鉴别。现在是81页\一共有123页\编辑于星期日ChP鉴别试验二、（一）硫色素反应现在是82页\一共有123页\编辑于星期日现在是83页\一共有123页\编辑于星期日硫色素＋2H现在是84页\一共有123页\编辑于星期日VitB1H+H+H+H+（二）沉淀反应现在是85页\一共有123页\编辑于星期日S元素反应Cl-反应（三）其他反应()21PbSNaSVitBNO3PbNaOH现在是86页\一共有123页\编辑于星期日三、含量测定喹那啶红－亚甲蓝（紫红→天蓝）（一）非水溶液滴定法现在是87页\一共有123页\编辑于星期日反应摩尔比为1：2现在是88页\一共有123页\编辑于星期日UV法（二）现在是89页\一共有123页\编辑于星期日片剂、注射剂=421（每片）相当于标示量的%=A=ECL规格g/片g/100mlgChPWEA%cmD10011××%100标示量平均片重××现在是90页\一共有123页\编辑于星期日（每ml）相当于标示量的%=规格g/mlml%VEA%cm100110011×标示量稀释倍数××现在是91页\一共有123页\编辑于星期日（三）硫色素荧光法原理1、荧光硫色素异丁醇铁氰化钾1VitBNaOH现在是92页\一共有123页\编辑于星期日特点2、（1）灵敏度高，线性范围宽（2）代谢产物不干扰，适用于体液分析现在是93页\一共有123页\编辑于星期日第五节维生素CL－抗坏血酸现在是94页\一共有123页\编辑于星期日1、易溶于水2、水溶液呈酸性结构与性质一、（一）溶解性现在是95页\一共有123页\编辑于星期日二烯醇结构二酮基结构二烯醇结构（二）还原性现在是96页\一共有123页\编辑于星期日有活性有活性无活性现在是97页\一共有123页\编辑于星期日△糖类的显色反应50℃结构与糖类相似（三）具糖的性质现在是98页\一共有123页\编辑于星期日C3－OH的pKa=4.17C2－OH的pKa=11.57酸性（四）一元酸现在是99页\一共有123页\编辑于星期日L(+)－抗坏血酸活性最强手性C（C4、C5）（五）光学活性**现在是100页\一共有123页\编辑于星期日与碱反应（六）水解性现在是101页\一共有123页\编辑于星期日现在是102页\一共有123页\编辑于星期日与氧化剂的反应（一）鉴别试验二、去氢抗坏血酸]O[VitC现在是103页\一共有123页\编辑于星期日1、与AgNO3反应2、与2，6-二氯靛酚反应(ChP2000)氧化型玫瑰红色还原型蓝色(ChP2000)现在是104页\一共有123页\编辑于星期日（玫瑰色）（无色）现在是105页\一共有123页\编辑于星期日3.其他氧化剂的反应：亚甲蓝或高锰酸钾试剂褪色

碱性酒石酸铜砖红色沉淀

磷钼酸钼蓝

现在是106页\一共有123页\编辑于星期日糖类的反应（二）或盐酸50℃吡咯USP现在是107页\一共有123页\编辑于星期日现在是108页\一共有123页\编辑于星期日（蓝色）(糠醛)（戊糖）50℃(吡咯)现在是109页\一共有123页\编辑于星期日UV（三）BP0.01mol/LHCl现在是110页\一共有123页\编辑于星期日三、杂质检查

1.溶液的澄清度与颜色：有色杂质分光光度法

2.铁、铜离子：原子吸收分光光度法现在是111页\一共有123页\编辑于星期日指示剂淀粉指示液原理1、碘量法（一）含量测定四、现在是112页\一共有123页\编辑于星期日H+现在是113页\一共有123页\编辑于星期日取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6。方法2、现在是114页\一共有123页\编辑于星期日（1）酸性环境d.HCl（2）新沸冷H2O减慢VitC被O2氧化速度讨论3、（3）立即滴定赶走水中O2减少O2的干扰现在是115页\一共有123页\编辑于星期日（4）附加剂干扰的排除片剂——滑石粉——过滤注射剂——抗氧剂——丙酮甲醛Na2SO3NaHSO3

Na2S2O3Na2S2O5现在是116页\一共有123页\编辑于星期日CHH