微生物控制同济班卢笑从

？省科技厅实施“将实验动物管理依法纳入科技计划和成果管理”《湖北省实验动物管理条例》第一页，共174页。明确规定实验动物管理实行许可证制度，从事实验动物工作的单位和个人必须按照国家规定领取实验动物许可证，依法规范地生产和使用合格实验动物。《湖北省实验动物管理条例》第二页，共174页。省科技厅决定从2008年开始，在科技计划和成果管理活动中进一步加强对实验动物工作的监督和执法力度。

湖北省科技厅将实验动物管理依法纳入科技计划和成果管理并启动实施的通知第三页，共174页。一、对涉及实验动物的科技项目立项、项目验收、成果鉴定、科技奖励申报等科技活动依法进行审查。对于应用不合格的实验动物或者在不合格的实验环境设施内取得的动物实验结果，一律视为无效，其科技项目不予项目验收和成果鉴定，不予评奖。第四页，共174页。二、凡涉及实验动物的科技项目立项、项目验收、成果鉴定、科技奖励申报等，应按照下列要求提供材料。

1.科技项目验收、成果鉴定、科技奖励申请材料；2.动物实验实施情况3.实验动物来源单位开具的《实验动物质量合格证》；4.动物实验设施单位开具的《实验动物设施使用证明》；5.相关实验人员的《实验动物从业人员培训合格证书》；6.根据专家审核意见，提供有关动物实验的原始记录。第五页，共174页。三、科技项目验收、成果鉴定、科技奖励申报。

项目申报单位条件财务处有关处室获得立项验收成果鉴定报送与实验动物有关的材料实验动物的合法性合规性审查并提出审查意见公示第六页，共174页。我们拿什么样的动物做实验，才能立项、才能鉴定成果、才能获奖？合格的实验动物标准化的实验动物第七页，共174页。第八页，共174页。

为什么要进行实验动物的微生物学控制？第九页，共174页。人与动物人与动物试验第十页，共174页。1、威胁人的健康和生命（人兽共患病）（1）病毒：流行性出血热、淋巴细胞脉络丛脑炎、B病毒、狂犬病、禽流感。（2）细菌：沙门氏菌、结核分枝杆菌、布氏杆菌、志贺氏杆菌。（3）寄生虫：卡氏肺孢子虫、丝虫病、弓形虫、跳蚤。

第十一页，共174页。2、烈性传染病对生产、实验造成严重危害：（1）种子群死亡——不能生产；（2）正在进行的实验死亡——实验被迫中断。例如：鼠痘、禽流感、兔流行性出血症、犬瘟热犬细小病毒性肠炎。第十二页，共174页。3、影响动物生产和生物学特性的改变，获得免疫或隐性感染的动物，会给人假像。造成错误的结果——不真实可靠，没有重复性。小鼠肝炎病毒，仙台病毒、大鼠涎泪腺炎、条件致病菌、囊尾蚴、肠道寄生虫等等。第十三页，共174页。

4、污染

某些病毒造成细胞培养物、肿瘤移植物或者以动物组织作为生产基质的生物制品的污染，不仅干扰试验，还将病毒扩散，以至于危害人类。第十四页，共174页。一、高质量的实验动物，结果可靠。二、高质量的实验动物，对实验人员的安全有保障。第十五页，共174页。为什么要进行实验动物的微生物学控制？威胁人的健康和生命对动物生产有影响使实验被迫中断实验的准确性、重复性有质疑

第十六页，共174页。为了提高实验的质量对于实验动物1、必须进行标准化2、必须对实验动物微生物和寄生虫控制3、必须将实验动物的微生物学等级划分第十七页，共174页。

提醒：

对于有关实验动物的病毒、细菌、寄生虫感染的特殊性。实验动物原则上是不能用疫苗接种和使用药物等手段来预防和控制传染病病原。第十八页，共174页。可能干扰实验结果，使实验无效或得出错误结论。

采用疫苗、药物个体治疗，成本高兔出血热症病毒对我们危害太大了，因此我们可以接种这种疫苗第十九页，共174页。但是大型实验动物可选择使用对实验干扰不大的疫苗或药物一定要给这些孙大圣们接种疫苗第二十页，共174页。第二十一页，共174页。第一节实验动物分级第二节普通动物

第三节清洁级动物与无特定病原体动物第四节无菌动物

第五节悉生动物

第六节实验动物的微生物和寄生虫监测

目录第二十二页，共174页。第一节实验动物分级依据标准等级第二十三页，共174页。我们国家医院进行的分级依据人员管理硬件评估团医院挂牌等级判断标准第二十四页，共174页。依据标准等级第二十五页，共174页。一、分级的依据（一）实验动物病毒感染的分类根据实验动物病毒对其自然宿主、人和其他动物的致病性，干扰程度或对污染肿瘤移植物和生物制剂的严重程度，可将其所致疾病分为以下几种类型。第二十六页，共174页。1、对自然宿主、人和其他动物均有较强的致病性，属于人兽共患病。如：流行性出血热、狂犬病。2、对自然宿主致病性强，常引起爆发流行甚至毁灭整个动物群。如兔出血症、禽流感。3、对自然宿主致病性弱，但可以传染给人，引起人的致死性感染。如猴疱疹病毒（B病毒）。第二十七页，共174页。4、对自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影响动物的健康，并对研究工作产生严重的干扰，如小鼠肝炎病毒、仙台病毒。5、对自然宿主、人、其他动物均无明显致病性，但是污染生物制品、肿瘤移植物和细胞培养物等。如鸡白血病病毒、猴病毒40.第二十八页，共174页。6、对自然宿主无致病性，但是可以引起其他动物致死性感染。松鼠猴疱疹病毒感染绒猴可致死性淋巴瘤。第二十九页，共174页。（二）造成微生物感染的基本因素感染源易感动物内源性、外源性传媒内在因素、外在因素第三十页，共174页。实验动物微生物分级的依据1动物本身的净化程度2、动物生活环境的净化程度第三十一页，共174页。二、国内与国际实验动物微生物分级标准1、国际：实验动物分为三个等级2、国内：实验动物分为四个等级第三十二页，共174页。第三十三页，共174页。第三十四页，共174页。在我国将实验动物微生物分为四级：普通级动物（CV）清洁级动物（CL）无特定病原体动物（SPF）无菌及悉生动物（GF、GA）第三十五页，共174页。第二节普通动物（CV）一、基本概念

二、普通动物的管理与用途

三、实验动物常见人兽共患病*(篇幅较大）四、动物间烈性传染病

第三十六页，共174页。一、基本概念不携带人兽共患病和动物烈性传染病的病原。饲养在开放系统中，动物体内外所携带的微生物和寄生虫很难控制。普通环境第三十七页，共174页。第三十八页，共174页。第三十九页，共174页。

低：微生物分级中级别最低低：生活的环境要求低低：微生物控制标准低低：质量较低低：在实验研究中敏感性低普通动物特点（5个低）第四十页，共174页。饲养在开放系统：物品、空气不要求灭菌。只是对温度湿度、光照、氨浓度有要求第四十一页，共174页。科技厅组织专家验收普通级动物实验室第四十二页，共174页。大鼠、小鼠没有普通级！第四十三页，共174页。目前还承认的普通级动物第四十四页，共174页。二、普通动物的管理与用途（一）管理阳光、通风、干燥清洁清洁饮用水、干净饲料防虫、鼠害、大动物接种必要的疫苗第四十五页，共174页。（二）用途1、教学示教之用；2、某些科学研究为探索方法而从事的预试验之用；3、没有培养出高级别的动物，不得以用之；第四十六页，共174页。三、实验动物常见人兽共患病第四十七页，共174页。由狂犬病病毒（RV)感染犬引起的，以极度兴奋、狂躁不安、流涎、攻击人兽为特征的一种高度接触性，人兽共患病。1、狂犬病

第四十八页，共174页。流行病学资料：（一）流行区域与发病率全球均有发生，以亚洲和非洲为主。我国是高发地区之一。人的发病率：2004年———2651例2005年———2571例2006年———3000例（大于）

资料来源：俞永新.中国预防控制狂犬病降低发病率的思考.中国计划免疫2007.13（4）第四十九页，共174页。（二）易感动物所有的温血动物都对RV易感。最易感的实验动物：暂时没有。次易感的实验动物：仓鼠、豚鼠、兔、啮齿类中度易感的实验动物：牛、羊、马、狗、灵长类第五十页，共174页。主要通过动物咬伤或带病毒的唾液溅入眼结膜后致病。人感染狂犬病病毒，且患狂犬病后的死亡率为100%

人被动物咬伤后，伤口应立即彻底清洗，不包扎，并立即（24小时内）到防疫部门进行预防注射。

主要存在于中枢神经组织、唾液腺和唾液内动物试验工作者应该重点记住

做犬类实验前，应给所有犬注射狂犬疫苗；在购入犬做实验时，注意从标准化犬场购入健康实验犬做实验；

第五十一页，共174页。是由汉坦病毒引起的主要发生在大鼠的烈性传染病，也是很危险的人兽共患病。

有近30种血清型/基因型，在我国流行的主要是野鼠型和家鼠型。2、流行性出血热(EHFV)

第五十二页，共174页。

是一种自然疫源性疾病。主要在野鼠中流行，隐性感染为主。大、小鼠、豚鼠、家兔均可感染。黑线姬鼠、长爪沙鼠对本病特别敏感。

第五十三页，共174页。间接接触生物性媒介传播多数成年啮齿类动物感染后无症状。病毒污染血、尿————破损皮肤革螨等昆虫叮咬————完整皮肤第五十四页，共174页。

实验动物型主要的感染方式是：污染尘埃飞扬形成气溶胶吸入感染。

人感染后，潜伏期14天，主要表现发热、皮肤有出血点、肾功能衰竭和循环衰竭等症状，严重时可导致死亡。死亡率较高。第五十五页，共174页。实验人员感染的示意途径

防止感染流行性出血热的主要措施是灭野鼠、防止野鼠进入实验室。第五十六页，共174页。

我们国家也发生多起报道，也造成实验研究人员死亡。

在日本、韩国、比利时、英国均发现实验大鼠引起研究人员感染。第五十七页，共174页。

是由LCMV引起的人和多种动物的病毒性疾病，主要侵害中枢神经系统，尤其是脉络丛和脑膜，是一种重要的人兽共患病。3、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎（lymphocyticchoriomeningitisLCM）第五十八页，共174页。

1933年Armstrong和Lille首次分离到LCMV,1935年Ricers和Scott从脑炎病人的脑脊髓液中分类到此病毒。同年Traub发现小鼠也可以感染LCMV,首次认识到鼠是感染本病的主要传播者。第五十九页，共174页。

野鼠是LCM病毒的天然宿主。所有的啮齿类动物以及犬、猴、马、兔、人均易感。动物多呈隐性感染，少数发病，出现急性症状，死亡率甚低。

第六十页，共174页。持续感染的小家鼠和急性感染的金黄地鼠可长期携带病毒，在带毒小鼠的所以器官中，终生含有高滴度的病毒。可经唾液、鼻分泌物、和尿液向外排毒。第六十一页，共174页。经皮(破损皮肤、完整皮肤）结膜吸入经口患LCM动物的肿瘤可带病毒并可传染给研究人员流感样症状

脑膜炎

V第六十二页，共174页。

不显著感染；无脑膜炎症状的流感样疾病；无菌性脑膜炎；

脑膜脑脊髓炎；

人感染后大多呈预后良好，仅有极少数病例死亡。人感染LCMV有四种类型：戴口罩、手套第六十三页，共174页。4、猴疱疹病毒（Simianherpesvirus）又称B病毒病（Bvirusdisease），是由与人的单纯性疱疹病毒相近的B病毒引起的猴良性疱疹性口炎，可自愈。但人感染B病毒后则产生致死性脑炎或脑脊髓炎。第六十四页，共174页。直接接触污染物和空气传播我口腔有些疱疹，但是无明显全身不适的感觉老弟，哥哥我也一样第六十五页，共174页。

与猴接触的有关人员应注意防止被猴咬伤。当人被猴咬伤后应立即用肥皂水清洗伤口，用碘酊消毒。第六十六页，共174页。沙门氏菌在自然界分布广泛，是较常见的人畜共患传染病，主要引起消化系统的疾病。主要是由鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌引起能感染多种实验动物，尤以小鼠和豚鼠易感性最高。5、沙门氏菌（salmonella）第六十七页，共174页。消化系统吃饭喝水喝奶胎盘屏障保持清洁卫生第六十八页，共174页。急性发病以急性败血症死亡而不表现临床症状亚急性感染随粪便排出病菌，感染同类和人，使其在运输、寒冷和实验处置时发病。引起腹泻、结膜炎隐性感染动物的临床表现第六十九页，共174页。对干燥、腐败、日光等因素具有一定抵抗力本菌对化学消毒剂的抵抗力不强外界条件下可以生存数周或数月一般常用消毒剂消毒方法可达到消毒目的第七十页，共174页。在灵长类动物中带菌率较高，引起细菌性痢疾

急性、慢性和带菌三种表现形式急性表现为高热、呕吐、排脓血便，剧烈腹痛，出现脱水和循环衰竭，如治疗不及时极易造成动物死亡。6、志贺氏菌（Shigella）第七十一页，共174页。7、结核分枝杆菌(Mycobacterium)人和多种动物易感实验动物中猕猴最为敏感在购入猴做实验时，注意在隔离、检疫后再进行实验。第七十二页，共174页。

为人兽共患体内寄生虫,由袭地弓形虫引起。终末宿主是猫，中间宿主为猫、大、小鼠、豚鼠、家兔、犬、猴、人等动物。8、弓形虫（Toxoplasmagondii）病第七十三页，共174页。

误食含弓浆虫成熟卵囊的食物，或含弓浆虫包囊的肉类和乳类,就可以得病。是的，而且弓形体病多发于幼犬第七十四页，共174页。

犬被检测出体外寄生虫的单位有1北京万思犬业繁育中心2北京科宇动物养殖中心3北京金云实验狗场4北京协尔鑫生物资源研究所。豚鼠被检测出体外寄生虫的单位有：1北京科宇动物养殖中心2海淀区兴隆实验动物养殖场3海淀兴旺动物养殖场

兔被检测出体外寄生虫的单位有：1北京科宇动物养殖中心第七十五页，共174页。第七十六页，共174页。1、鼠痘（mousepox）

又称脱脚病(ectromelia)，是由鼠痘病毒感染引起的小鼠急性烈性传染病。

慢性发病的小鼠表现为：脚、尾和鼻部出现皮疹和溃疡，严重者可见脚、尾坏死脱落。三、动物间烈性传染病第七十七页，共174页。隐性感染的实验小鼠无临床症状，但在许多因素作用时，如运输、X射线照射、人工感染结核菌、组织移植等，都可激活鼠痘病毒而使鼠痘流行。实验处理第七十八页，共174页。中科院武汉病毒研究所的安学芳等报道2003年从患病的实验小鼠体内分离鉴定到一株鼠痘病毒，证明该野毒株对小鼠具有高致病性，人工感染致死率可高达100％

我们这个品系的小鼠对鼠痘病毒抵抗力较强，做实验的时候，要注意哟！第七十九页，共174页。2、兔出血症（rabbitepidermichemorrhagicfever）是家兔的一种急性烈性传染病。具有传播快、病程短，发病率和死亡率高的特点。分为急性和慢性，但多呈急性发病。

主要感染青壮年兔，且病情严重，多呈急性经过。第八十页，共174页。

在兔场，防止该病的方法是接种疫苗。接种疫苗后，3-4天后即可产生较强的免疫力，免疫效果可持续6个月以上第八十一页，共174页。

普通级动物：不携带人兽共患病和动物烈性传染病的病原。

我们国家大小鼠没有普通级。

用途：教学示教之用；某些科学研究为探索方法而从事的预试验之用；没有培养出高级别的动物，不得以用之；第八十二页，共174页。

狂犬病鼠流行性出血热病毒LCM病毒猴疱疹病毒沙门氏菌志贺菌结核分枝杆菌弓形虫体外寄生虫病毒细菌寄生虫人兽共患病病原第八十三页，共174页。志贺菌B病毒结核分枝杆菌兔流行性出血症狂犬病接种疫苗第八十四页，共174页。为了保持普通级动物的健康必须

1、到具有动物生产许可证的单位去购买动物2、在具有动物使用许可证的环境下实验3、犬、猴、兔可以接种一些指定的疫苗。

第八十五页，共174页。第三节清洁级动物与无特定病原体动物—、基本概念二、潜在感染的病毒三、条件致病菌四、对实验干扰大的寄生虫五、应用与饲养管理第八十六页，共174页。第八十七页，共174页。第八十八页，共174页。—、两个级别动物的基本概念（一）、两个级别动物概念（二）、两个级别动物相同点（三）、两个级别动物不同点第八十九页，共174页。（一）、概念1、清洁级动物(Cleananimals,CL)

不带有人兽共患病、动物烈性传染病和对科学研究干扰大的病原。没有携带普通级动物所排除的病原，和科学研究干扰大的病原第九十页，共174页。（1）是根据我国国情而设立的等级动物。（2）除普通动物应该排除的病原外还不携带对科学研究干扰大的病原（3）来源于SPF动物或剖腹产动物。（4）饲养在屏障系统中。（5）目前我们国家使用广泛的实验动物。第九十一页，共174页。特点：3个不应有1、血清病毒抗体检查时可检出一定滴度的抗体，不应有明显的疾病症状。2、不应有异常的死亡。3、尸体解剖时，主要脏器、组织无论是眼观还是病理切片均不应有无病变。第九十二页，共174页。2、无特定病原体动物（Specificpathogenfreeanimals,SPF)是指动物体内无特定的微生物和寄生虫存在，但带有非特定的微生物和寄生虫的动物。目前国际上公认SPF动物适用于所有科研实验，是国际标准级别的实验动物。

除清洁级动物应排除的病原体外，不携带主要潜在感染或条件致病和对研究实验干扰大的寄生虫及病原体第九十三页，共174页。（1）国际通用（2）除清洁级动物应排除的病原体外，不携带主要潜在感染或条件致病和对研究实验干扰大的寄生虫及病原体（3）SPF动物来源于无菌动物（4）饲养在屏障系统中（5）目前我们国家使用广泛的实验动物第九十四页，共174页。清洁级动物（1）是根据我国国情而设立的等级动物。（2）除普通级动物应该排除的病原外，还不携带对科学研究干扰大的病原。（3）来源于SPF动物或剖腹产动物。（4）饲养在屏障系统中。（5）目前我们国家使用广泛的实验动物。SPF级动物（1）国际通用（2）除清洁级动物应排除的病原体外，不携带主要潜在感染或条件致病和对研究实验干扰大的寄生虫及病原体（3）SPF动物来源于无菌动物（4）饲养在屏障系统中（5）目前我们国家使用广泛的实验动物第九十五页，共174页。屏障系统第九十六页，共174页。（二）清洁级动物和SPF动物的共同特点：在屏障系统里生活内环境中没有致病微生物生产、实验的效果比普通动物好一旦遭到污染后，病原体的传播强烈第九十七页，共174页。（三）不同点第九十八页，共174页。二、潜在感染的病毒（动物无症状）1．鼠肝炎病毒2．仙台病毒3．呼肠病毒III型4．啮齿类动物细小病毒6．乳酸脱氢酶病毒不讲是因为时间关系。请大家要看！第九十九页，共174页。

美国国立癌研究所1972年报道，该所保存的细胞系中有白血病病毒、乳酸脱氢酶病毒、小鼠微小病毒、多瘤病毒、LCM病毒、呼肠孤-3病毒污染。总的污染率占所保存总数的69%。第一百页，共174页。1．鼠肝炎病毒（mousehepatitisvirusMHV）

△正常情况下为非致病性，呈隐性感染。△病鼠和无症状带毒鼠是本病的传染源△消化道、呼吸道、垂直传播

△只感染小鼠，人不感染第一百零一页，共174页。△可引起小鼠致死性肝炎、脑炎和肠炎△改变肝酶的活性△改变小鼠机体的各种免疫应答参数△感染的裸小鼠常呈暴发性发病，严重影响肿瘤免疫学的研究。影响实验结果第一百零二页，共174页。条件致病、潜在感染感染大小鼠引起呼吸道疾病空气传播不易控制

2．仙台病毒(SendaiVirus)第一百零三页，共174页。仙台病毒

对免疫系统的干扰：可严重影响动物体液和细胞介导的免疫应答对致瘤作用研究的干扰：误诊和不能复制白血病对小鼠生殖系统的影响：影响胎儿的发育，乳鼠死亡率增高；中科院遗传与发育生物学研究所清洁级KM小鼠和Wistar大鼠仙台病毒阳性率分别5/20和4/5，处理意见是更换种群。（实验动物信息8（89）2008，5第一百零四页，共174页。三、条件致病菌1.支气管败血性波氏杆菌（B.brochiseptica）2.巴氏杆菌(Pasteurella)3.绿脓杆菌(P.aeruginosa)4.鼠棒状杆菌(C.kutscheri)5.泰泽氏菌(Tyzzer’sorganism)6.支原体（Mycoplasma）7.链球菌(Streptococcus)

不讲，不等于不考。一定要把名字记住第一百零五页，共174页。1.支气管败血性波氏杆菌（B.brochiseptica）○家兔和豚鼠尤为敏感，侵害部位是呼吸器官（鼻腔炎、支气管肺炎）。○本菌对环境抵抗力较强，可在异种动物间互相传染，传播性强。

○隐性感染，在不良情况下可使动物发病。第一百零六页，共174页。2.巴氏杆菌(Pasteurella)

△多杀巴斯德菌(P．multocida)对兔和小鼠有较强的致病作用，主要侵袭部位呼吸系统。

△嗜肺巴斯德菌(P．pneumotropica)在动物的呼吸道、生殖道带菌率较高，但致病性不强。（清洁级大鼠）第一百零七页，共174页。

诊断和鉴别家兔感染的支气管败血性波氏杆菌和多杀巴斯德菌：

能运动

革兰氏阴性不能运动，两极染色第一百零八页，共174页。3、绿脓杆菌(P.aeruginosa)本菌在自然界广泛存在，并可正常寄居在动物皮肤、口腔、鼻腔及胃肠道。

易感动物：小鼠、大鼠、豚、兔感染方式：隐形感染。第一百零九页，共174页。

实验刺激：如放射性照射、实验烧伤、外科处理、使用免疫抑制剂或抗生素时，可诱发动物致命的绿脓杆菌菌血症，引起内脏器官广泛的灶性坏死。北京天坛生物制品股份有限公司的NIH小鼠绿脓杆菌阳性率10/10，处理意见是降级或净化使用。（实验动物信息8（89）2008，4第一百一十页，共174页。四、对实验干扰大的寄生虫1、艾美尔球虫动物的肠道或肝脏内。第一百一十一页，共174页。2、短膜壳绦虫（Hvmenolepisnana）

常寄生于大、小鼠、仓鼠和猴的小肠内。

感染人，且致病性较强。

短膜壳绦虫不需要中间宿主。

中科院遗传与发育生物学研究所清洁级KM小鼠和Wistar大鼠蠕虫阳性率分别3/20和1/5，处理意见是更换种群。（实验动物信息8（89）2008，5第一百一十二页，共174页。三、应用与饲养管理1．应用（1）清洁级动物：是根据我国国情而设立的等级动物。适用于所有科研实验。（2）SPF动物：是国际标准级别的实验动物，适用于所有科研实验。第一百一十三页，共174页。2．饲养管理

SPF动物和清洁级动物，饲养在屏障系统中，饮水、饲料、垫料、空气都要除菌后才可以使用。第一百一十四页，共174页。工作人员要严格按照规范操作定期对动物和环境检测第一百一十五页，共174页。（一）清洁级动物与SPF动物的概念（二）清洁级动物与SPF动物的特点（三）清洁级动物与SPF动物的异同点

第一百一十六页，共174页。

第一百一十七页，共174页。

第一百一十八页，共174页。住脑原虫球虫短膜壳绦虫

对实验干扰大的寄生虫

第一百一十九页，共174页。

SPF动物和清洁级动物饲养特点饲养在屏障系统中，饮水、饲料、垫料、空气都要除菌后才可以使用；工作人员要严格按照规范操作；定期对动物和环境检测；

第一百二十页，共174页。一、概念用现有的检验技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。

第四节无菌动物（germfreeanimals，GF）

无菌动物的“菌”？？第一百二十一页，共174页。

而所谓“无”却不是绝对的，不过是根据现有的科学知识和检查方法在一定时期内不能检出已知的微生物和寄生虫而已。第一百二十二页，共174页。

从微生物学的观点看，通常实验动物的体内和体外带有寄生虫，体内还常带有细菌和病毒，而且还都难于排除某些潜在的传染病。此外，普通实验动物的血清中含有抗体。实验结果往往不确切。使用无菌动物作实验就可以克服普通实验所存在缺点，使实验结果正确可靠。第一百二十三页，共174页。

用大量抗生素也可以使普通动物暂时无菌，但是这种动物不是无菌动物。第一百二十四页，共174页。

因为这种无菌状态往往是一过性的，某些残存的细菌在适当的条件下又会在体内增殖；即使能把体内细菌全部杀死，它们给动物造成的影响却是无法消除的，例如：特异性抗体的存在、某些组织或器官的病理变化等。无菌动物必须是生来就无菌的动物。第一百二十五页，共174页。

无菌动物在自然界并不存在，必须人为的建成。无菌动物的理论基础和实践依据在于胎盘屏障和屏障观念。第一百二十六页，共174页。

1895年有了这个设想开始，到1969年，已经育成了小鼠、家兔、豚鼠、鸡、猫、羊、狗、猫、猴、猪等无菌动物。第一百二十七页，共174页。二、特征外观和普通动物相同，但是其机能、形态结构与普通动物有很大不同。无菌动物除查不到微生物以外，还有许多特征区别于其它动物。

第一百二十八页，共174页。

血液循环系统：心脏相对缩小，白细胞数少且值恒定。免疫系统：不发达。胸腺、淋巴结、脾脏小。产生丙种球蛋白的能力很弱，血中无抗体，对微生物感染异常敏感。第一百二十九页，共174页。

消化系统：肠道肌层薄。盲肠肥大。肝脏重量相对下降。营养：无菌动物体内不能合成维生素B和K。

代谢：代谢周期长，无菌动物血液中含氮量少，肠管对水的吸收率低。

第一百三十页，共174页。抗辐射能力：强。寿命：长。

生殖：无菌条件对动物生殖影响不大

，但是兔与豚鼠因为肠道大，影响产仔。第一百三十一页，共174页。三、无菌动物的培育

来源于剖腹产或无菌卵的孵化.第一百三十二页，共174页。培育原理：主要是利用胎盘的屏障作用，一般不会将母体的细菌、病毒等致病微生物传给胎儿，故采用剖腹取胎法获得幼子，使其生来无菌。饲养在无菌隔离器中。多采用人工喂乳或奶妈代养。第一百三十三页，共174页。四、无菌动物的饲养管理饲养于隔离系统无菌饲养技术定期检测补充维生素第一百三十四页，共174页。老年学微生物学肿瘤学免疫学药理学生化学生理学营养生理学遗传学病理学器官移植实验外科学

无菌动物第一百三十五页，共174页。少之又少！第一百三十六页，共174页。无菌动物在因为有以下特征，所以对微生物感染敏感：免疫器官相对小血液中无抗体白细胞数目相对少，且恒定产生丙种球蛋白的能力很弱第一百三十七页，共174页。无菌动物在消化与代谢方面中有以下特征：

肠道肌层薄，盲肠肥大体内不能合成维生素B和K代谢周期长第一百三十八页，共174页。

对无菌动物的培育的正确描述是：

无菌动物在自然界并不存在，必须用人为的方法培育而成。生活在隔离系统中；所用一切经过消毒灭菌处理；要定期对环境和动物进行检测。

第一百三十九页，共174页。

第五节悉生动物

—、概念悉生动物（Gnotobioticanimals,GN）也称已知菌动物或已知菌丛动物（Animalwithknownbacterialuflora）。

我是无菌动物，你们给我放什么菌进去，我就是什么菌动物。第一百四十页，共174页。SPF动物和悉生动物的区别？

一个是明确知道不携带的特定病原的动物；一个是明确知道所固定携带的（非病原）微生物。第一百四十一页，共174页。人工感染用的肠道细菌各国使用的不尽一致，它也受营养条件的制约。如日本：大肠埃希氏杆菌、表皮葡萄球菌、粪链球菌、脆弱似杆菌、乳杆菌.5种。第一百四十二页，共174页。二、特性和应用悉生动物来自无菌动物，它弥补了无菌动物的某些缺点。悉生动物体内带有某种细菌后，其抵抗力明显增强，且较无菌动物生命力旺盛，并可代替无菌动物使用。第一百四十三页，共174页。老年学微生物学肿瘤学免疫学药理学生化学生理学营养生理学遗传学病理学器官移植实验外科学

悉生动物第一百四十四页，共174页。（1）微生物的研究无菌动物可用于建立具有人正常菌丛或致病菌丛的动物模型，变成悉生动物，用来研究某些疾病的病原、微生物之间的拮抗、病毒、真菌。第一百四十五页，共174页。说明大肠杆菌对痢疾杆菌有拮抗作用。

第一百四十六页，共174页。（2）、衰老机理研究无菌动物的寿命比同种普通动物的寿命长，对2—3年龄无菌大鼠的研究证明，其心、肾、肺、脑等部位没有检出与年龄相关的病变，而作为对照组的普通大鼠则有这种变化。

提示微生物的存在与机体衰老有关。而过去都认为与内因和饮食有关。无菌动物可能在衰老机理的研究中发挥重要作用。第一百四十七页，共174页。（3）、免疫学研究无菌动物血液中无特异性抗体，很适合做各种免疫现象的研究。研究免疫系统功能和机体受感染后感受性改变的关系。

第一百四十八页，共174页。

丙种球蛋白和特异性抗体的研究：球蛋白来自与消化道菌的刺激。给无菌动物喂无抗原的饲料时，动物（小鼠、猪）血清完全没有丙种球蛋白和特异性抗体存在。第一百四十九页，共174页。如果将单一的菌植入到无菌动物体内就可以制备抗该菌的较纯的、效价高的、且不被其他微生物污染的抗体。第一百五十页，共174页。

无菌动物缺乏抗原刺激，免疫系统处于“休眠”状态，对于外来的抗原刺激，有迅速、单一和持久作出反应的特性第一百五十一页，共174页。

应用无菌动物和悉生动物，可研究正常菌群在维持机体适当特异性免疫性和非特异性免疫反应所具有的刺激作用，以探讨自然抵抗力的机制以及有关抗原作用后免疫力产生和发展的过程。无菌动物和悉生动物的诞生大大加速了免疫学的进程。第一百五十二页，共174页。（4）、临床上的研究

人们很早就认为，龋齿的形成与乳酸杆菌有关。但是没有实验证实。

无菌动物的出现才使人类研究龋齿变成了可能。无菌动物不发生龋齿。结果是：没有细菌的参与龋齿不可能形成，细菌是此病的元凶。但是，引起龋齿的细菌——链球菌。第一百五十三页，共174页。（5）、在肿瘤研究中的应用