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文档简介
实验放线菌的形态观察
一、目的
辩认放线菌的营养菌丝、气生菌丝、孢子丝、孢子的形态;学习掌握水封片法、玻璃纸法、影印法制作放线菌涂片。
二、原理
放线菌的菌丝分化为两部分,即长入培养基内的营养菌丝(又称基内菌丝)和生长于培养基表面的气生菌丝(又称繁殖菌丝)。有些放线菌的气生菌丝分化成各种孢子丝,其形状和分支都不同,孢子形状也不相同。这些特征是识别放线菌和分类的重要依据。放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似,后期形成孢子菌落呈粉状、干燥,有各种颜色呈同心圆放射状。三、材料、试剂与器具1、材料细黄链霉菌(Streptomycsmicroflavus)又称5406放线菌斜面菌种,棘孢小单孢菌(Micromonosporaechinospora)斜面菌种,高氏1号平板。0.1%美蓝染色液,石炭酸复红染色液,无菌水2、器具显微镜,载玻片,镊子,接种环,玻璃刮,玻璃纸等。四、操作步骤1、水封片观察(1)取一套高氏1号平板,将菌种划线方法接种,把灭菌过的盖玻片斜插在培养基中,一半露出,在28℃下培养5~7d备用。(2)取一滴美蓝染色液置于载玻片中央,将上述长有菌丝的盖玻片取出,把一面的培养基擦净。然后把长菌丝一面朝下,盖住染色液,制成水封片,用高倍镜观察其气生丝、孢子丝和孢子。影印法观察:用涂却法或划线法培养出单个菌落,然后用小刀小心地刮一个菌落,翻过压印在载玻片中央,小心地移开菌落,载玻片中央就留下菌落印痕。在火焰下固定,滴一滴石碳酸复红染色1min,水洗后晾干,在高倍镜,或油镜下观察。五、注意事项1、放线菌生长较慢,培养时间较长,所以在接种和培养时要注意无菌操作,严防杂菌无染。六、实验报告1、绘图,比较这两种放线菌的形态特征的异同。2、比较这
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