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文档简介
1/31/31/31/31010ul(含基因组DNA约2ng)5ul10ul0.5ul前言本试剂盒采用多色荧光标记、多重PCR复合扩增方法对人基因组DNA中STR位点的多态性进行检测,通过分析扩增结果来确定血样、精斑、牙齿、骨骼、毛发、唾液等生物检材的基因型。AGCU10+1STR荧光检测试剂盒可以进行11个DNA位点(10个STR位点和1个性别位点)的同步扩增并利用四色荧光技术进行检测。本试剂盒包含的DNA位点有Amelogenin、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、D8S1179、D21S11、D18S51、vWA、D5S818、FGA。试剂盒规格本试剂盒可供200次样品实验。试剂盒组成扩增前试剂盒ReactionMix1000ulx2支含PCR缓冲液、MgCl2和dNTPsPrimers10+11000ulx1支含11个位点的11对引物热启动=-勿¥酶100ulX1支5U/ulControlDNA9947A200ulX1支含0.1ng/ul9947A基因组DNAs叫O1500ulx1支超纯水扩增后试剂盒10+1AllelicLadder50ulx1支含11个位点的等位基因(见附表)AGCUMarkerROX-450250ulx1支荧光分子量内标实验所需主要仪器设备PCR扩增仪、ABI遗传分析仪(310、3100、3130等)、高速离心机、洁净工作台、微量移液器、冰箱、紫外分光光度计、电炉或恒温水浴锅。试剂盒使用方法(试剂使用前请轻微振荡,并短暂离心)1.DNA提取及定量待检样品先用磁珠法或Chelex-100法提取基因组DNA,提取的样品基因组DNA定量在约0.1ng/ul~0.5ng/ul。PCR反应按如下过程实验:PCR反应体系基因组DNA模板Primers10+1ReactionMix热启动23二-.,酶总体积 25ul每次实验都要求同时做阴性对照和阳性对照PCR循环参数初始变性 热循环 终延伸保温10个循环:94℃1分钟,995℃11分钟62℃1分钟,72℃1分钟 60℃45分钟4℃维持,20个循环:94℃1分钟,60℃1分钟,72℃1分钟电泳检测取2ulPCR产物或10+1AllelicLadder分别与0.5ulAGCUMarkerROX-450和15ul去离子甲酰胺混合,95℃变性5分钟后立即冷却用于电泳检测。(Matrix标准品由FAM、HEX、TAMRA、ROX组成,位点基因分型数据软件由我公司免费提供)2/32/3附表.11个DNA位点信息位点荧光标记10+1AllelicLadder中的等位基因9947A基因型AmelogeninFAMX,YX,XD3S1358FAM12,13,14,15,16,17,18,1914,15D13S317FAM8,9,10,11,12,13,14,1511,11D7S820FAM6,7,8,9,10,11,12,13,14,1510,11D16S539FAM5,6,8,9,10,11,12,13,14,1511,12D8S1179HEX8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,1913,13D21S11HEX24,24.2,25,26,27,28,28.2,29,29.2,30,30.2,31,31.2,32,32.2,33,33.2.34.34.2.35.35.2.36.3730,30D18S51HEX10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,2615,19vWATAMRA11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,2117,18D5S818TAMRA7,8,9,10,11,12,13,14,1511,11FGATAMRA18,19,20,21,22,23,24,25,26,26.2,27,28,29,3023,24注意:•本试剂盒有效期为一年,生产日期及批号见产品包装。•收到试剂盒后请保存于-20。。,试剂盒请不要反复冻融。•建议用量少的用户小管分装后冻存。试剂盒的详细使用说明请查阅AGCU10+1STR荧声检测试剂盒用户手册.
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