响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺设计论文含开题报告书

-.z...本科学生毕业论文OptimizationofE*tractionProcessofFlavonoidsfromCamptothecaacuminataleavesUsingResponseSurfaceMethodology毕业论文任务书课题名称：响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺学生**：2013年01月13日2.1实验要求〔1〕探索喜树叶黄酮提取有哪些影响因素.那几个是主要影响因素.〔2〕本论文利用乙醇回流提取的方法，探究设计优化喜树叶黄酮提取工艺，要**验装置科学合理，可行性，有代表性。〔3〕采用的响应面分析是优越的分析法，要求严谨，综合分析。2.2论文要求〔1〕经过系列实验，获取真实数据，保证论文论据﹑数据的真实性。〔2〕在分析影响因素时要有实例支持，归纳论点时要有理有据。〔3〕行文构造合理，层次清楚，格式规*。2.3能力要求〔1〕通过完成毕业论文，掌握科研工作中查找文献数据并学会阅读文献。设计试验方案、分析解决实验中出现的问题以及实验资料和数据的分析处理能力。〔2〕通过实验，培养形成严谨科学的态度和一丝不苟的学习习惯。〔3〕通过本实验主要提升我们对于喜树黄酮提取的根底能力，也可为其他植物叶黄酮的提取做出借鉴。〔4〕通过实验分析，掌握响应面分析Design-E*pert软件的使用的根底技能。2.4主要研究方法：查阅文献法回流提取法单因素分析法响应面软件分析法验证法曾淑燕，李映珍．喜树生物学特性与栽培技术[J]．**林业科技，2007,23(1):118-120．杨学义，朱立，*超．喜树资源及其开发利用[J]．资源开发与市场，2007,23(7):618-619．王晓梅，曹稳根．黄酮类化合物药理作用的研究进展[J]．**学院学报，2007,22(1):105-107．王学利．喜树叶总黄酮优化提取方案的研究[J]．**林学院学报，2001,18(1):50-52．黄瓒，李振申，王宗成．楮树叶总黄酮提取工艺优化[J]．**科技学院学报，2012,33(8):31-34．贾元慎，划志坤，傅一穷．竹叶中黄酮类化合物的研究[J]．竹子研究汇刊，1995,4(2):38-45．毕丽君，李慧．水芹中总黄酮类化合物最正确提取工艺的研究[J]．食品科学，1999,1(12):35-37．杨国恩，丽婷，陈福．超声-微波协同辅助溶剂法提取喜树果中黄酮化合物的研究[J]．光谱实验室，2010,27(1):27-31．杨小红，陈文姜，曼花等．白术总黄酮鉴别及含量测定[J]．**师*大学学报(医学版)，2008,5(1):16-19．王永宏，*强，*兴．响应面法优化*enorhabdusnematophila发酵培养基的研究[J]．西北农林科技大学学报(自然科学版)，2009,37(7):140-146．逯家辉，王迪，郭伟良等.响应面法优化八角茴香中莽草酸的超声波提取工艺研究[J]．林产化学与工业，2008,28(1):87-92．安金双，王迪，马士淇等．响应面法优化灰树花中多糖超声波提取工艺的研究[J]．食品研究与开发，2008,29(6):11-15．ShuklaYN,ArchanaRani,TripathiAK,etal．AntifeedantactivityofursolicacidisolatedfromDuboisiaMyoporoides[J]．PhytotherapyResearch,1996,10(4):359-360．2012年9月下旬，初步构思，摘取实验材料喜树叶。2012年10月上旬，查阅资料，明确论文方向。2012年11月中旬，进一步查阅有关文献资料，完善实验方案。2012年12月至2013年4月，准备实验器材和原料按照实验方案进展实验，分析实验结果。2013年4月至5月，撰写论文，准备辩论。注：毕业论文开题报告课题名称：响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺学生**：王凯系别：生命科学与化学工程系专业：生物工程指导教师：王宗成2013年01月13日-.z...响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺作者姓名王凯生化系生物工程专业2009级王宗成助教预计字数10000开题日期选题的根据：1〕说明本选题的理论、实际意义 2〕综述国内外有关本选题的研究动态和自己的见解喜树(CamptothecaacuminataDee)属紫树科(Nyssaeeae)，别名旱莲木，是我国特有树种之一。主要分布于我国长江流域及以南地区，为我国阔叶树中的珍品之一，具有很高的欣赏价值，是绿化、美化环境的优良绿荫树和风景树，同样也是非常重要药用树种之一[1]。黄酮类化合物〔flavonoids〕是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮〔flavone〕构造的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小局部以游离态〔苷元〕的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方起着重要的作用。黄酮广泛存在于植物的各部位，主要集中在花、叶、果实中，有研究指出，喜树叶中黄酮类化合物含量丰富。大量研究显示，黄酮类化合物有强大的生理活性和药用价值，具有抗肿瘤、护肝、抗炎、抗菌、抗病毒、调节内分泌系统等诸多成效，同时还能抑制脂质过氧化作用、血小板凝集、毛细管渗透性以及脆性等REF_Ref355969112\r\h[3]。此外，黄酮在食品中的应用也很广，它在食品中主要用于天然甜味剂、天然抗氧化剂、天然色素、保健食品等方面。近些年来国内，从中草药中提取别离黄酮类化舍物的工作开得较为广泛。已从黄芩、水芹、银杏叶、竹叶和龙柏叶中提取别离了许多黄酮类化合物REF_Ref355969084\r\h[4]。但目前对喜树的开发利用仅限于提取抗癌药物喜树碱，其资源没有得到充分利用，特别对叶子的开发利用相对较少。国内有研究涉及喜树叶提取的索氏提取法，水提取法，微波提取法等，还有正交实验研究黄酮的提取，但对于响应面的应用在这个方面还没有涉及[5-9]。因此，本论文首创性地对喜树叶进展响应面设计优化黄酮提取工艺对开发喜树叶资源具有一定的研究价值和现实意义。响应面分析法(ResponseSurfaceMethodology,RSM),将数学与统计学相结合,采用多元二次回归方法作为函数估计的工具来拟合因素与响应值之间的函数关系,依此可对函数的响应面和等高线进展分析来寻求最正确工艺参数[10-11]。相对于正交设计，响应面设计试验次数少、周期短，求得的同归方程精度高、能研究几种因素间交互作用的回归分析方法[12-13]。本论文在喜树叶的黄酮提取过程中,以风干喜树叶为原料,将单因素和响应面分析法应用于乙醇回流提取喜树叶黄酮工艺,研究回流提取的条件及其对提取结果即黄酮的得率的影响，寻求各因素的综合优化条件，提高喜树叶黄酮利用率以及为工业化生产提供一定的理论参考。主要内容：试验1材料、试剂及仪器

1.1试验材料

原料：2012年9月下旬，喜树叶采自**科技学院校园，经清洗、烘干、粉碎，室温保存备用。1.2主要试剂：芦丁标准品、95%乙醇，石油醚等其他试剂均为分析纯。1.3主要仪器：T6可见分光光度计、TE124S电子天平、RE-52B旋转蒸发仪。2试验方法2.1标准溶液的配制称取约20mg芦丁标准品于称量瓶中置105℃烘箱下烘干至恒重,枯燥器中冷却，准确称取10mg芦丁标准品，用70%乙醇定容至100ml为标准液。2.2黄酮含量测定标准曲线的绘制分别取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL的0.1mg/mL芦丁标准溶液于6支比色管中，分别参加0.3mL5%亚硝酸钠，放置6min，加0.3mL10%硝酸铝后放置6min,，再加1.0mol/LNaOH4.0mL，加70%乙醇定容至10mL，摇匀，放置12min得测定液。以空白溶液作参比,在λ=510nm处测吸光度,计算标准液浓度(C)与吸光度(D)的回归方程D=bC+k。2.3样品处理方法将叶片剪成约1cm长度，用粉碎机粉碎，再在105℃烘至恒重。采用So*hlet提取法，以石油醚为脱脂剂,于43℃水浴中脱脂至充分除去样品中脂类和脂溶性色素。取出样品滤纸包，先置通风处晾干，再将滤纸包置烘箱中130℃烘干，放入枯燥器中冷却备用。2.4黄酮的提取脱脂后粉末按一定条件提取，将提取液抽滤，滤渣在一样条件下提取一定次数，合并滤液浓缩至约25mL，转移至50ml容量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，摇匀。取该溶液1.0mL，转移至25mL容量瓶中，再用70%乙醇定容至刻度，摇匀。再取该溶液1.0mL，置于10mL容量瓶中。2.5测定方法按照标准曲线绘制方法操作，测定吸光度，根据标准曲线计算出测定样品溶液总黄酮浓度C。然后计算样品中总黄酮的提取率。总黄酮提取率〔mg/g〕=式中，C为测定样品溶液总黄酮浓度〔mg/mL〕；N为稀释倍数；V为最初样品定容体积〔mL〕；m为样品质量〔g〕。2.6黄酮提取单因素试验2.6.1乙醇体积分数的影响取样品1g，分别参加40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇溶液，在70℃条件下萃取，回流提取120min，测定提取液黄酮含量，并计算得率。2.6.2提取温度的影响取样品1g，乙醇体积分数60%，分别于50℃、60℃、70℃、80℃萃取，回流提取120min，测定提取液黄酮含量，并计算得率。2.6.3提取时间的影响取样品1g，乙醇体积分数70%，在70℃分别萃取，回流提取30min、60min、90min、120min、150min、180min，测定提取液黄酮含量，并计算得率。2.6.4提取次数的影响取样品1g，乙醇体积分数70%，在70℃萃取,回流提取120min，分别萃取1、2、3、4次，测定提取液黄酮含量，并计算得率。2.6.5料液比的影响取样品1g，乙醇体积分数70%，70℃分别于1:10、1:20、1:30、1:40、1:50萃取，回流提取120min，测定提取液黄酮含量，并计算得率。2.6.6不同粒度的影响取样品1g，乙醇体积分数70%，70℃分别于20目、40目、60目、80目萃取,回流提取120min，测定提取液黄酮含量，并计算得率。2.7响应面设计试验2.7.1在单因素实验的根底上从乙醇体积分数、提取温度、提取时间、不同粒度、提取次数、料液比等因素中精心筛选出3个对黄酮乙醇提取影响比拟显著的因素，采用经典的三因素三水平Bo*-Behnken试验设计进展响应面试验确定喜树叶中黄酮提取的最正确工艺。2.7.2利用Design-E*pert软件对试验数据进展分析，得到实验结果。3验证与考察3.1验证试验根据筛选得到的最正确提取条件，平行提取3次，计算总黄酮的提取率。将试验所得数据列成表格，假设根据最正确的提取条件所得的总黄酮的提取率均大于响应面设计中总黄酮的提取率，则所得出的最正确工艺条件合理，同时也说明此工艺具有较好的稳定性。3.2撰写论文研究方法：1查阅文献法2回流提取法3单因素分析法4响应面软件分析法5验证法完成期限和采取的主要措施：1完成期限：2012年9月下旬，初步构思，摘取实验材料喜树叶。2012年10月上旬，查阅资料，明确论文方向。2012年11月中旬，进一步查阅有关文献资料，完善实验方案。2012年12月至2013年4月，准备实验器材和原料按照实验方案进展实验，分析实验结果。2013年4月至5月，撰写论文，准备辩论。2主要措施：中国学术期刊网，万方数据查找文献，回流提取，单因素分析，响应面设计分析。主要参考资料：曾淑燕，李映珍．喜树生物学特性与栽培技术[J]．**林业科技，2007,23(1):118-120．杨学义，朱立，*超．喜树资源及其开发利用[J]．资源开发与市场，2007,23(7):618-619．王晓梅，曹稳根．黄酮类化合物药理作用的研究进展[J]．**学院学报，2007,22(1):105-107．王学利．喜树叶总黄酮优化提取方案的研究[J]．**林学院学报，2001,18(1):50-52．黄瓒，李振申，王宗成．楮树叶总黄酮提取工艺优化[J]．**科技学院学报，2012,33(8):31-34．贾元慎，划志坤，傅一穷．竹叶中黄酮类化合物的研究[J]．竹子研究汇刊，1995,4(2):38-45．毕丽君，李慧．水芹中总黄酮类化合物最正确提取工艺的研究[J]．食品科学，1999,1(12):35-37．杨国恩，丽婷，陈福．超声-微波协同辅助溶剂法提取喜树果中黄酮化合物的研究[J]．光谱实验室，2010,27(1):27-31．杨小红，陈文姜，曼花等．白术总黄酮鉴别及含量测定[J]．**师*大学学报(医学版)，2008,5(1):16-19．王永宏，*强，*兴．响应面法优化*enorhabdusnematophila发酵培养基的研究[J]．西北农林科技大学学报(自然科学版)，2009,37(7):140-146．逯家辉，王迪，郭伟良等.响应面法优化八角茴香中莽草酸的超声波提取工艺研究[J]．林产化学与工业，2008,28(1):87-92．安金双，王迪，马士淇等．响应面法优化灰树花中多糖超声波提取工艺的研究[J]．食品研究与开发，2008,29(6):11-15．ShuklaYN,ArchanaRani,TripathiAK,etal．AntifeedantactivityofursolicacidisolatedfromDuboisiaMyoporoides[J]．PhytotherapyResearch,1996,10(4):359-360．指导教师意见：指导教师签名：系意见：签名：年月日开题报告会纪要时间2013年01月13日地点逸夫楼420与会人员**职务〔职称〕**职务〔职称〕**职务〔职称〕廖阳讲师余响华讲师*祖姣助教*小文讲师袁志辉讲师王宗成助教邵**讲师何福林教授会议记录摘要：一、各位教师：陈述要思路清晰，条理清楚，语言表达简洁明了，要有侧重重点，说话能力有待提高。报告时应把实验的目的，实验的主要方法和过程，实验的结果处理等概括性呈现，知道要做什么，怎么做，怎样做好。*小文教师提问：你的实验中黄酮提取的主要方法是什么.我的答复：我的黄铜提取主要采用的是乙醇回流提取，利用分光光度计测吸光度，使用标准曲线求黄酮提取率。我的实验是从单因素实验的根底上选定几个关键因素，采用响应面设计及Design-E*pert软件分析方法，这个是实验的重点，以此来寻求黄铜提取工的最正确综合工艺条件。三、*祖姣教师提问：黄酮的最正确可见光吸收波长是多少.影响黄酮提取的单因素有哪些.那个响应面的分析软件你会用吗.我的答复：510nm。影响黄酮提取的单因素主要有：乙醇体积分数，提取温度，提取时间，提取次数，料液比，不同粒度。Design-E*pert软件，王教师已发给我，我目前正在学习使用。会议主持人：记录人：2013年01月13日指导小组意见负责人签名：年月日系意见负责人签名：年月日注：此表由学生本人填写，一式三份，一份留系里存档，指导教师和本人各保存一份**科技学院毕业论文指导过程记录表毕业论文题目响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺学生**王凯**3专业班级生物工程0902指导教师王宗成职称助教系〔教研室〕生化系指导过程记录指导内容记录(一)1.怎样查找黄酮提取工艺相关文献资料，特别是喜树黄酮提取工艺的研究现状。2.查阅相关实验研究生分析方法。了解和熟悉响应面分析法的原理和实际应用。3.确定研究方向，确定选题，规*选题名称。学生签名：2012年9月18日指导教师签名：指导内容记录(二)1.如何选择摘取喜树叶。2.摘回喜树叶的放置处理。学生签名：2012年9月25日指导教师签名：指导内容记录〔三)1.喜树叶样品处理方法细节及考前须知。2.实验仪器，如真空枯燥箱，旋转蒸发仪的使用及考前须知。学生签名：2013年3月1日指导教师签名：指导内容记录(四)1.实验相关溶液的配制。2.标准溶液的配制及标准曲线的绘制。3.显色反响操作的考前须知及分光光度计考前须知。学生签名：2013年3月4日指导教师签名：指导内容记录(五)1.单因素试验的平行条件控制。2.黄酮提取液的稀释倍数计算确定。3.旋转蒸发仪回收乙醇的操作。学生签名：2013年3月5日指导教师签名：指导内容记录(六)1.单因素实验数据分析。2.利用Design-E*pert8.0进展经典的三因素三水Bo*-Behnken实验设计。学生签名：2013年3月7日指导教师签名：指导内容记录(七)1.响应面实验的分组开展。2.响应面实验考前须知。学生签名：2013年3月8日指导教师签名：指导内容记录(八)1.实验数据处理及Design-E*pert8.0处理细节。2.实验数据响应面模型的方差分析3文章摘要及论文相关格式。学生签名：2013年4月5日指导教师签名：辩论小组组长意见(对情况是否属实做出意见)组长(签名)：2013年4月18日.z...**科技学院毕业论文辩论申请暨资格审查表学生**王凯**3系别生化系专业生物工程班级生物工程0902指导教师王宗成毕业论文题目：响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺内容综述〔对毕业论文的研究步骤和方法、主要内容及创新之处进展综述，提出辩论申请〕：本论文首创性地对喜树叶进展响应面设计优化黄酮提取工艺，对开发喜树叶资源具有一定的研究价值和现实意义。本论文以风干喜树叶为原料，在喜树叶的黄酮提取研究中，将单因素和响应面分析法应用于乙醇回流提取喜树叶黄酮工艺，研究回流提取的条件及其对提取结果即黄酮的得率的影响，寻求各因素的综合优化条件，为提高喜树叶黄酮利用率以及为工业化生产提供一定的理论参考。本实验首先对可能影响喜树叶黄酮提取的五个因素：料液比，提取次数，乙醇体积分数，提取温度，每次提取时间进展单因素试验，结果可以看出各因素与提取率的大致关系，并找出了三个显著影响因素即料液比，乙醇体积分数，提取温度。然后以提取率为响应值，进展了经典的三因素三水平Bo*-Benhnken试验设计，并通过Design-E*pert软件对实验数据进展分析，得到相关响应面数据和分析结果。结果说明，乙醇回流提取喜树叶黄酮的最正确工艺条件为1:40料液比，60%乙醇，温度80℃，每次提取90min，提取三次。这些结论为提高喜树叶黄酮利用率及其工业化生产提供了一定的理论参考。资格审查工程是否01工作量是否到达所规定要求02文档资料是否齐全〔任务书、开题报告、辩论申请、定稿论文及其相关资料等〕03文档是否符合规*化要求04是否按时向指导教师提交全部正式材料05是否剽窃他人成果或者直接照抄他人设计〔论文〕06是否为已公开发表的个人论著备选是否多人设计一个系统或者合作一个课题〔多人设计一个系统或者合作一个课题〕内容是否雷同系毕业论文〔设计〕工作领导小组意见：符合辩论资格，同意辩论□不符合辩论资格，不同意辩论□〔公章〕年月日注：此表为学生毕业论文〔设计〕定稿后申请辩论，及系领导小组对申请辩论学生进展资格审查时用；资格审查工程由指导教师填写。**科技学院本科毕业论文评审表论文题目作者**指导教师中文摘要研究显示，喜树叶中黄酮类化合物含量相对丰富。为提高喜树叶中黄酮类化合物的提取效率，本论文在以风干喜树叶为原料,用乙醇作提取剂，在喜树叶的黄酮提取工艺中,将单因素试验和响应面实验设计分析法应用于回流提取喜树叶黄酮工艺,研究回流提取的条件及其对提取结果即黄酮的得率的影响，寻求各因素的综合优化条件。本实验首先对可能影响喜树叶黄酮提取的五个因素：料液比，提取次数，乙醇体积分数，提取温度，每次提取时间进展单因素试验，结果可以看出各因素与提取率的大致关系，并找出了三个显著影响因素即料液比，乙醇体积分数，提取温度。然后以提取率为响应值，进展了经典的三因素三水平Bo*-Benhnken试验设计，并通过Design-E*pert软件对实验数据进展分析，得到相关响应面数据和分析结果。结果说明，乙醇回流提取喜树叶黄酮的最正确工艺条件为1:40料液比，60%乙醇，温度80℃，每次提取90min，提取三次。这些结论为提高喜树叶黄酮利用率及其工业化生产提供了一定的理论参考。关键词〔3-5个〕响应面法；喜树叶；黄酮提取英文摘要StudieshaveshownthatthecontentofflavonoidsinCamptothecaacuminataleavesisrelativelyabundant.Inordertoimprovethee*tractionefficiencyofflavonoidsinCamptothecaacuminataleaves,studiesofthepaperusedair-dryCamptothecaacuminataleavesasrawmaterial,ethanolase*tractionagent.Inthise*tractionprocess,thesinglefactore*perimentandresponsesurfacee*perimentaldesignanalysismethodwereappliedtoreflu*e*traction,toresearchreflu*e*tractionconditionsandtheirimpactontheyieldofflavonoidse*tractionresults,andseektheoptimalconditions.Thesinglefactore*perimentsfirsthadfivefactorsthatmayaffecttheyieldofflavonoidse*traction:solid-liquidratio,e*tractiontimes,ethanolconcentration,e*tractiontemperatureande*tractiontimeandtheresultshadshownthattheappro*imaterelationshipofthevariousfactorsande*tractionrate,andthreesignificantfactors:solid-liquidratio,ethanolvolumefraction,e*tractiontemperature.ThentheclassicthreefactorsandthreelevelsBo*-Benhnkene*perimentaldesignwascarriedouttoestablishaquadraticregressionmodelforthee*tractionefficiencyoftotalflavonoids,andanalysisofthee*perimentaldatawasprocessedbytheDesign-E*pertsoftware.Theoptimalconditionsofethanole*tractforflavonoidsinCamptothecaacuminataleaveswereobtainedasfollows:solid-liquidratio1:40,ethanolvolumefraction60%,e*tractiontemperature80°C,e*tractiontime90mineachtimeande*tractiontimesthreetimes.TheseconclusionscanprovidesometheoreticalreferenceforimprovementoftheutilizationofCamptothecaflavonoidsandtheirindustrialproduction.关键词〔3-5个〕responsesurfacemethodology;camptothecaacuminataleaves;e*tractionofflavonoids指导教师评定成绩评审基元评审要素评审内涵总分值选题质量25%目的明确符合要求选题符合专业培养目标，表达学科、专业特点和教学方案的根本要求，到达毕业论文〔设计〕综合训练的目的。10理论意义或实际价值10选题恰当题目规模适当，难易度适中；有一定的科学性。5能力水平40%查阅文献资料能力能独立查阅相关文献资料，归纳总结本论文所涉及的有关研究状况及成果。10综合运用知识能力10研究方案的设计能力5研究方法和手段的运用能力10外文应用能力5论文质量35%文题相符5写作水平15写作规*10论文篇幅5实评总分成绩等级指导教师评审意见：指导教师签名：评阅教师评定成绩评审基元评审要素评审内涵总分值选题质量25%目的明确符合要求选题符合专业培养目标，表达学科、专业特点和教学方案的根本要求，到达毕业论文〔设计〕综合训练的目的。10理论意义或实际价值10选题恰当题目规模适当，难易度适中；有一定的科学性。5能力水平40%查阅文献资料能力能独立查阅相关文献资料，归纳总结本论文所涉及的有关研究状况及成果。10综合运用知识能力10研究方案的设计能力5研究方法和手段的运用能力10外文应用能力5论文质量35%文题相符5写作水平15写作规*10论文篇幅5实评总分成绩等级评阅教师评审意见：评阅教师签名：说明：评定成绩分为优秀、良好、中等、及格、不及格五个等级，实评总分90—100分记为优秀，80—89分记为良好，70—79分记为中等，60—69分记为及格，60分以下记为不及格。**科技学院本科毕业论文辩论记录表论文题目响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺作者**王凯所属系、专业、年级生化系生物工程专业2009年级指导教师**、职称王宗成助教辩论会纪要时间2013年4月18日地点逸夫楼424答辩小组成员**职务〔职称〕**职务〔职称〕**职务〔职称〕李常健教授沈玉平讲师廖阳讲师黄光文讲师王宗成助教李玲讲师辩论中提出的主要问题及答复的简要情况记录：1.黄光文教师提问：论文中第7页的三线表格式是否正确.答：这是一个经典的三因素三水平中心组合设计因素与水平表，我是参照相关文献的响应面设计做的。2．廖阳教师提问：①英文标题是什么意思，在我印象中是方法论，研究法的意思，你怎么解释.答：教师你是对的。我这里ResponseSurfaceMethodology就是指响应面分析法。②你能不能表述下什么是响应面法.答：响应面分析法,将数学与统计学相结合,采用多元二次回归方法作为函数估计的工具来拟合因素与响应值之间的函数关系,依此可对函数的响应面和等高线进展分析来寻求最正确工艺参数。相对于正交设计，响应面设计试验次数少、周期短，求得的同归方程精度高，是一种能研究几种因素间交互作用的回归分析方法。而我这里的因素就是影响喜树叶黄酮提取工艺的各工艺条件，响应值就是喜树叶黄酮提取率。3.沈玉平教师提问：你通过响应面设计得出的实验结论工艺条件是否需要进一步用实验验证.答：虽然我的实验结果比拟理想，但是从科学严谨的角度还是需要验证的，可能这就是我的缺乏之处。廖阳教师补充：作为现阶段的论文也可以不去验证，这个可以留给下一个研究者去进一步深化细致研究，以得到更优化更准确的实验结果。会议主持人：记录人：2013年4月18日答辩小组意见评语：王凯同学在毕业论文辩论过程中，态度认真，准备充分，思路清晰，较好地完成了毕业论文规定的根本任务，并能充分利用所学知识分析和解决所研究的问题，应用响应面法对喜树叶黄酮乙醇回流提取工艺做出了优化研究，论文写作认真，条理清晰，实验科学合理，结果分析准确，能够恰当地用相关图表说明研究问题，增加了此论文的可读性。

经过辩论小组讨论决定：同意通过辩论，评定等级为中等。评定等级：负责人〔签名〕：年月日系学位委员会意见评语：论文〔设计〕最终评定等级：负责人〔签名〕：系部〔公章〕年月日校学位委员会意见评语：评定等级：负责人〔签名〕：年月日学科：081801本科学生毕业论文题目〔中文〕：响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺(英文〕：OptimizationofE*tractionProcessofFlavonoidsfromCamptothecaacuminataleavesUsingResponseSurfaceMethodology姓名：王凯学号：3院〔系〕：生命科学与化学工程系专业、年级：生物工程专业2009级指导教师：王宗成2013年5月10日-.z目录摘要[17]。表2.1喜树叶黄酮提取工艺条件的Bo*-Behnken中心组合设计因素与水平水平Level因素FactorsA:乙醇浓度〔%〕B:料液比〔mL/g〕C:提取温度〔℃〕-1503070060408017050902.7.2实验分析利用Design-E*pert8.0软件对实验数据进展分析，得到实验结果。-.z第3章结果与分析3.1黄酮含量测定的标准曲线根据前文的测定方法，待测液得到的测定结果用E*cel软件做线性回归后得到标准曲线(图3.1)。回归方程为：A=12.088C-0.0185，R2=0.9974。式中，A为510nm处吸光度，C为芦丁溶液质量浓度，在0～0.05mg/mL质量浓度*围内有良好的线性关系。图3.1芦丁标准曲线3.2单因素试验结果与分析料液比的对提取率的影响取样品1g，乙醇体积分数70%，料液比分别为1:10、1:20、1:30、1:40、1:50萃取，恒温70℃，回流提取两次，每次120min的条件提取测定喜树叶总黄酮含量，考察料液比对喜树叶总黄酮提取率的影响。结果如图3.2所示，在一定*围内随着料液数值的增大黄酮的提取率呈增加趋势，随后根本稳定，到料液比为1:50时，提取率接近最大值。考虑到生产本钱，宜选取料液比1:40。图3.2料液比对提取率的影响3.2.2提取次数对提取率的影响取样品1g，乙醇体积分数70%，料液比1：40，恒温70℃，按每次120min回流提取，分别提取1、2、3、4次提取测定喜树叶总黄酮含量，考察提取次数对喜树叶总黄酮提取率的影响。结果如图3.3所示，在一定*围内。提取次数越多提取率越大，提取次数为4次时提取率接近最大值。实际上可以看出，提取3次时喜树叶总黄酮已根本溶出完全，为了节省时间和节约溶剂，从工业本钱和提取周期角度来看，宜选取提取3次。图3.3提取次数对提取率的影响3.2.3乙醇体积分数对提取率的影响取样品1g，分别以50%、60%、70%、80%、90%的乙醇溶液为提取溶剂，料液比1：40，恒温70℃，回流提取两次，每次120min的条件提取测定喜树叶总黄酮含量，考察乙醇体积分数对喜树叶总黄酮提取率的影响。结果如图3.4所示，提取率随乙醇体积分数递增呈先增后减再增的起伏趋势，在乙醇体积分数为60%左右时，提取喜树叶总黄酮的效果更佳。图3.4乙醇体积分数对提取率的影响3.2.4提取温度对提取率的影响取样品1g，乙醇体积分数70%，料液比1：40，回流提取两次，每次120min，分别于50℃、60℃、70℃、80℃的条件提取测定喜树叶总黄酮含量，考察提取温度对喜树叶总黄酮提取率的影响，结果如图3.5所示，提取率先随着提取温度的提高而提高，然后趋于平稳，在提取温度为80℃时，喜树叶总黄酮的提取率根本到达最高。图3.5提取温度对提取率的影响-.z3.2.5提取时间对提取率的影响取样品1g，乙醇体积分数70%，料液比1：40，恒温70℃，回流提取两次，分别每次回流提取60min、90min、120min、150min的条件提取测定喜树叶总黄酮含量，考察提取时间对喜树叶总黄酮提取率的影响。图3.6显示提取时间在60～150min之间温度对喜树叶总黄酮提取率的总体影响不是很大，提取时间达90min以后提取率增量就很少了，可以看出超过90min以后，提取时间对喜树叶黄酮提取的影响不大。图3.6提取时间对提取率的影响3.3响应面设计试验结果及分析3.3.1Bo*-Benhnken设计方案及试验结果通过对提取工艺条件的单因素试验考察，从上文的单因素试验中我们可以确定：料液比、乙醇体积分数、提取温度是影响喜树叶黄酮提取率的三个关键因素。现依据响应面二阶设计方法[16]，采用统计分析软件Design-e*pert建立3因素3水平的Bo*-Benhnken模型进展优化试验，试验设计及试验结果见表3.1表3.1喜树叶总黄酮提取工艺条件的响应面法试验设计及结果StandardorderRunorderFactor1A:乙醇浓度〔%〕Factor2B:料液比〔mL/g〕Factor3C:提取温度〔℃〕实测值提取率〔mg/g〕预测值提取率〔mg/g〕7150409034.706434.7411260309036.788737.034370508033.155333.438470409035.999035.292570308030.828631.3013660408040.342840.643750508035.611235.1410860507036.128335.8912960509036.516136.95141060408040.333940.6491160307034.706434.27151260408041.220640.64161360408040.652440.6451450407035.740536.4511650308035.999035.7561770407029.794529.763.3.2提取工艺条件的响应曲面分析喜树叶黄酮提取工艺条件的响应曲面分析用Designe*pert对所得数据进展回归分析，结果如图3.7～3.9，可以看出各试验因素的最正确参数及各试验因素之间的相互作用。由喜树叶黄酮提取率(Y)对乙醇浓度〔A〕、料液比〔B〕、提取温度〔C〕各试验因素所构成的响应曲面图可以直观地看出的交互作用对喜树叶黄酮提取率的影响比拟显著。图3.7料液比与乙醇浓度对黄酮提取率的交互作用-.z图3.8提取温度与乙醇浓度对黄酮提取率的交互作用图3.9料液比与提取温度对黄酮提取率的交互作用-.z3.3.3响应面回归模型的方差分析从表可以看出，模型的F=41.16、P=0.0001＜0.05，说明本实验所采用的二次模型是很显著的。PA、PC、PAC、PA2、PB2、PC2均小于

0.05，说明乙醇浓度、提取温度、乙醇浓度和提取温度的交互项以及

3个因素的二次项都具有显著影响；而其他交互项、料液比及缺失项显著性较差，也说明料液比与另外两个因素的交互作用不大。决定因素

R22-2.38B2-2.22C2。表3.2喜树叶黄酮提取工艺条件响应曲面回归方程的方差分析方差来源Variancesource平方和Sumofsquares自由度ν均方MeansquareF值F-valueP值P-value显著性Significance模型model161.34917.9341.160.0001significantA18.85118.8543.270.0006B1.1911.192.740.1491C7.3017.3016.750.0064AB1.8411.844.320.0855AC13.10113.1030.070.0015BC0.7210.721.650.2466A275.93175.93174.32<0.0001B222.70122.7052.110.0004C219.72119.7245.280.0005残差2.6160.44失拟项2.0930.704.030.1410Notsignificant纯误差0.5230.17总和163.9615-.z3.3.4最正确工艺条件用Design-e*pert软件选择逐步回归方法对二次多项式回归方程做进一步优化，最正确的提取条件为乙醇体积分数58.81%、料液比1:39.49、提取温度82.82℃，预测提取率为40.64mg/g。但考虑到实际操作的局限性，将乙醇回流提取喜树叶黄酮的提取工艺修正为:乙醇体积分数60%、料液比1:40、提取温度80℃。-.z第4章结论与讨论本文通过响应面法设计优化乙醇回流提取喜树叶黄酮的工艺条件实验，采用Bo*-Behnken设计方案建立的二次多项数学模型能较准确地预测乙醇回流提取喜树叶黄酮的提取率。然后通过响应曲面综合分析各工艺条件因素对喜树叶总黄酮