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X精品※试卷※X精品※试卷※※推荐※下载※※推荐※下载※专题14现代生物科技专题核心主干速通关、记准核心知识筑牢满分根基核心主干速通关、记准核心知识筑牢满分根基、基因工程和蛋白质工程1掌.握基因工程的3种工具:限制性核酸内切酶识别特定核苷酸序列并在特定位点切割 分子切开磷酸二酯键产生黏性末端或平末端。连接酶连接两个 片段形成磷酸二酯键。载体有质粒、入噬菌体的衍生物、动植物病毒等。2.掌握基因工程的操作流程:(1获)取目的基因的3种途径:①从基因文库中获取。②利用 技术扩增。③通过化学方法人工合成。(2基)因表达载体的构建:①目的基因。②启动子 聚合酶识别和结合部位驱动基因转录。③终止子 聚合酶脱离部位终止转录。④标记基因:鉴别受体细胞中是否导入含有目的基因的基因表达载体。(3将)目的基因导入受体细胞:导入方法根据生物的种类不同而不同:①植物农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。②动物显微注射技术导入受精卵)③微生物感受态细胞法 处理)(4目)的基因的检测与鉴定:①检测目的基因是否导入受体细胞 分子杂交技术。②检测目的基因是否转录出 分子杂交技术。③检测目的基因是否翻译成蛋白质:抗原-抗体杂交技术。④个体生物学水平鉴定:根据表达性状判断。技术原理 双链复制。条件引物、模板、 聚合酶、四种脱氧核苷酸。过程变性f复性f延伸。结果目的基因呈指数形式扩增约为 为扩增循环次数)与体内 复制不同不需要解旋酶需耐高温的 聚合酶。4.蛋白质工程:原理中心法则的逆推。(2实)质:改造基因。(3产)物:产生自然界中没有的新蛋白质。二、细胞工程1.植物组织培养:(1条)件:离体,一定营养物质,激素(生长素、细胞分裂素)等。(2培)养基状态:固体培养基。(3植)物组织培养的目的不同,培养阶段也就不一样:①若生产人工种子则培养到胚状体阶段。②若提取细胞产物则培养到愈伤组织阶段。③若培育新个体则应培养到试管苗阶段。2植.物体细胞杂交:植物体细胞杂交技术将不同的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞并把杂种细胞培育成新的植物体的过程。不管是染色体数、基因组数,还是染色体组都采用直接相加的方法计算。酶解法用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁。(3诱)导原生质体融合:物理法(离心、振动、电激)、化学法(聚乙二醇)。(4原)生质体融合成功的标志——再生出新的细胞壁。(5杂)种植物细胞培育成功的原理:植物细胞的全能性。.动物细胞培养的特殊营养条件:液体培养基加入动物血清、血浆等。(2通)入氧气以满足代谢的需要。通入二氧化碳以维持培养液的H.动物体细胞核移植技术:(1流)程图:

供体体细胞一细胞培养采集培养至.去核卵母细胞供体体细胞一细胞培养采集培养至.去核卵母细胞MU中期夫供体细胞(核)注入、电刺激融合■重组

一晶的/藤育袍胎卵母细胞 胚胎移植性别:与提供细胞的个体相同1克隆 代孕性状:与提供细胞核的个体基本相同〕动物" 母体原理动物细胞核的全能性。(3卵)母细胞去核的方法:显微操作法。(4供)体细胞:传代10代以内的细胞。因为10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。(5细)胞核移植技术中也可将供体细胞直接注入去核卵母细胞中。5.动物细胞融合:原理细胞膜的流动性、细胞增殖。诱导方法物理法、化学法和生物法灭活的病毒)6单.克隆抗体:(1三)种细胞特点不同:①免疫后的淋巴细胞能分泌抗体不能增殖。②骨髓瘤细胞能大量增殖不能分泌抗体。③杂交瘤细胞既能分泌抗体又能大量增殖。(2两)次筛选的目的不同:第一次筛选:通过选择培养基筛选出杂交瘤细胞。第二次筛选:通过克隆化培养、抗体检测,筛选出能产生特异性抗体的细胞群。三、胚胎工程1.操作对象:早期胚胎或配子(生殖细胞、受精卵和早期胚胎细胞)。2实.质:在体外条件下,对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。3理.论基础:哺乳动物受精机制和早期胚胎发育的规律。技术体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术。5.胚胎移植过程中的四个解读:(1排)卵是指卵子从卵泡中排出。受精过程大反应顶体反应、透明带反应、卵细胞膜反应。(3区)别两个标志:受精标志:卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体。

受精完成标志:雌雄原核融合成合子。防止多精入卵受精的两大屏障透明带反应和卵细胞膜反应。2“盐”:无机盐和有机盐6.培养液的成分6.培养液的成分V2“酸”:氨基酸和核甘酸2“素”:维生素和激素2“液体”:水和血清.胚胎移植的生理学基础(1胚)胎移入的基础:哺乳动物发情排卵后,同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。胚胎收集的基础哺乳动物的早期胚胎形成后在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系而是处于游离状态。移入胚胎存活的基础受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。(4保)留遗传特性的基础:供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系,但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。四、生态工程1.生态工程的原理:(1物)质循环再生原理。物种多样性原理。协调与平衡原理。(4整)体性原理。(5系)统学和工程学原理。2生.态工程基本原理的判断方法:强调物质循环、废物利用、减轻环境污染一物质循环再生原理。体现物种多营养关系复杂一物种多样性原理。强调生物与环境的协调与平衡涉及环境承载力一协调与平衡原理。涉及自然、经济和社会指整个系统如林业生态工程建设一整体性原理。(5涉)及结构、功能,分布式、集中式、环式一系统的结构决定功能原理(系统学和工程学原理)。(6涉)及系统组分的比例关系、总体功能大于各部分之和,指系统内部,如互利共生一系统整体性原理(系统学和工程学原理)。易错易混须规避 ■知星融黝酬।下列有关基因工程和细胞工程的叙述正确的是②③④⑥⑧

①重组 技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体。②没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞。③蛋白质工程是在分子水平上对基因进行操作。可形成杂交分子。④用人胰高血糖素基因制成探针检测胰岛细胞中可形成杂交分子。⑤转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测。⑥外植体应进行消毒处理以防止杂菌污染。⑦脱分化和再分化过程需要考虑不同激素的浓度比例同时还需要避光处理。⑧制备单克隆抗体时需要诱导免疫的淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。⑨选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞。下列有关胚胎工程和生态工程的叙述正确的是③④⑤⑧。①为获取更多的卵母)细胞要对供体母羊注射促性腺激素使其同期发情。②早期胚胎的培养液中含有维生素、激素等多种能源物质。③采用胚胎分割技术产生同卵多胎数量是有限的。④早期胚胎培养和动物细胞培养的培养液通常都需要加入血清。⑤胚胎干细胞可以从早期胚胎和原始性腺中分离获得。⑥体外受精后的一定时间内收集供体原肠胚用于胚胎分割。⑦单一人工林比天然混合林稳定性低易爆发病虫害一一协调与平衡原理。⑧林业生态工程建设既考虑种树又考虑生活问题一一整体性原理。高考真题再演练检测实战能力定位主攻方向高考真题再演练检测实战能力定位主攻方向•全国卷I)回答下列问题博耶 和科恩) 将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外,还证明了 答_出两点即可)。体外重组的质粒可通过 参与的 方法导入大肠杆菌细胞而体外重组的噬菌体 通常需与组装成完整噬菌体后才能通过侵染的方法将重组的噬菌体 导入宿主细胞在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是 。 (3真)核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用 的_大_肠__杆_菌_作__为_受_体细胞,在蛋白质纯化的过程中应添加 的_抑_制_剂_。 【解析】(1体)外重组的质粒进入受体细胞才能使子代细胞具有目的基因,故体外重组的质粒,必须可以进入受体细X精品※试卷※胞。目的基因是具有遗传效应的 片段必须可在原核细胞中表达才能使受体细胞获得新性状。2外源基因导入微生物受体细胞的方法是先用a处理大肠杆菌使其成为感受态细胞然后让重组表达载体分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合在一定温度下促进感受态细胞吸收 分子完成转化过程。噬菌体属于专门侵染细菌的病毒,而心肌细胞和叶肉细胞均属于真核细胞,故可作为重组噬菌体宿主细胞的是细菌。(3由)于大肠杆菌细胞内含有可以分解目的基因表达的蛋白质的酶,故实验中需要选用蛋白酶缺陷型的大肠杆菌,蛋白质纯化时需要抑制蛋白酶的活性。答案:(1体)外重组的质粒可以进入受体细胞;真核生物基因可在原核细胞中表达(2)转化外壳蛋白(或噬菌体蛋白)细菌(3蛋)白酶缺陷型蛋白酶2 20比全国卷0)2018年《细胞》期刊报道中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列问题:(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程,核移植是指 。_通_过_核_移_植_方_法_获_得的克隆猴,与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目 填_“_减_半_”“(加倍”或“不变”)。(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度 填__“_(大于”或“小于” )体细胞核移植,其原因是 。 (3在)哺乳动物核移植的过程中,若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通常,所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目 填_“_相_同_”或(“不相同”),性染色体组合 填_“_相_同_”或(“不相同”)。【解析】(1)核移植是指将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个胚胎最后发育为动物个体;通过核移植方法获得的克隆猴的细胞核来自供体,因此克隆猴体细胞的染色体数目和核供体一致。(2)胚胎细胞核移植的难度小于体细胞核移植,原因是动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易。哺乳动物雌性个体和雄性个体的体细胞染色体中的常染色体相同性染色体前者是后者是因此分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通常所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目相同,性染色体组合不相同。答案:(将1)动物的一个细胞核,移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中不变(2)小于胚胎细胞分化程度低,恢复全能性相对容易(3相)同不相同201全国卷I)某一质粒载体如图所示外源插入m或中会导致相应的基因失活r表示氨苄青霉素抗性基因 表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHI酶切后与用BamHI酶切获得的目的基因混合加入连接酶进行连接反应用得到的混合物直接转化大肠杆菌结果大肠杆菌有的未被转化有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。※推荐※下载※X精品※试卷※X精品※试卷※※推荐※下载※※推荐※下载※回答下列问题(1质)粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有 答_出_两_点_即_可_)_。_而(作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。(2如)果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是 并__且 ;___和 的__细_胞__也_是__不_能区分的,其原因是 。_在_上_述_筛_选_的_基_础_上_,_若_要_筛_选_含_有_插_入_了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有 的_固_体_培_养_基_。__基因工程中某些噬菌体经改造后可以作为载体其 复制所需的原料来自 。【解题指导】解答本题的关键有两点:(1理)解基因工程中载体的特点。(2熟)悉导入重组质粒的微生物的筛选方法。【解析】本题考查基因工程的相关知识。(1质)粒被选用为基因工程的载体是因为:具有一个或多个限制酶切点;具有自我复制能力;带有标记基因;对宿主细胞无害。(2未)转化的和仅含环状目的基因的细胞都不能在含有氨苄青霉素的培养基上生长,故这两种不可区分。含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞在含有氨苄青霉素的培养

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