高三生物一轮复习练习：微生物的培养技术及应用

微生物的培养技术及应用练习一、选择题1．灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是()A．动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行B．微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D．可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌2．(不定项)根据相关规定，每毫升合格的牛奶中细菌总数不超过50000/个。某兴趣小组利用恒温水浴锅对新鲜牛奶进行消毒后，进行细菌总数测定，主要步骤如图所示。相关叙述正确的是()A．步骤①中用巴氏消毒法对新鲜牛奶进行消毒，可以减少营养物质的损失B．步骤②对牛奶进行梯度稀释可以使聚集的微生物分散，便于在培养基表面形成单菌落C．步骤③中牛肉膏蛋白胨培养基要先高压蒸汽灭菌再调pH，以防止高温影响pH的稳定D．实验结束时培养基上的菌落可能不止一种，若平均菌落总数少于50个则表明消毒合格3.野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，如图为纯化某氨基酸营养缺陷型大肠杆菌突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述正确的是()A．图中①②④为基本培养基，③为完全培养基B．A操作可提高基因突变和染色体变异的突变率，增加突变株的数量C．B操作可用涂布器蘸取菌液均匀地涂布在②表面D．经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养4.解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是()A．甲菌属于解脂菌B．实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力5．(不定项)嗜冷细菌在－15～20℃下能够正常生长，其产生的大量胞外耐高温的脂肪酶和蛋白酶会分解脂肪和蛋白质，从而造成牛奶腐败变质。为测定某牛奶样品中嗜冷细菌的数目，某生物小组做了如图所示实验，下列有关说法错误的是()注：培养皿旁的数字代表菌落数目。A．牛奶样品中含有嗜冷细菌生长繁殖所需的所有营养成分B．估算1mL牛奶样品中嗜冷细菌的活菌数为3.9×105个C．刚挤出的鲜牛奶冷藏一段时间后进行高温杀菌处理，牛奶就不会腐败变质了D．可从嗜冷细菌中获得抗冻基因用于抗冻作物品种的培育6.人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是()A．对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌B．使用无菌棉拭子从皮肤表面取样C．用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布D．观察菌落的形态和颜色等进行初步判断7.含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动能力，用穿刺接种的方法，分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，如图所示。若两种菌繁殖速度相等，下列说法错误的是()A．乙菌的运动能力比甲菌强B．为不影响菌的运动需选用液体培养基C．该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量D．穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染8.为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素分解菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是()A．倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整B．图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落C．该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的D．菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色9.下列关于无菌操作的叙述，错误的是()A．倒平板和接种操作都需在酒精灯火焰旁进行，以防杂菌污染B．用划线法接种时，如果有五个划线区域，则接种环至少灼烧五次C．适当喷洒石炭酸或煤酚皂溶液，再用紫外线照射可加强消毒效果D．高压蒸汽灭菌时，需要用棉塞塞住盛有培养基的锥形瓶口并包上牛皮纸10.聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中获得生产PHA含量高的菌种流程如下：①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落，分别扩大培养→⑤检测菌体的数目和PHA的产量→⑥获得目标菌株。下列叙述正确的是()A．②可用稀释涂布平板法接种到含PHA较高的选择培养基上B．④挑取菌落时，应挑取多个菌落以便于筛选PHA产量高的嗜盐细菌C．扩大培养时，需要将接种后的培养基放入恒温箱倒置培养，以防杂菌污染D．⑤中用显微镜直接计数法检测菌体的数目所得数值低于实际值11．(不定项)E­Test法是一种用于确定抗菌药物最小抑菌浓度(MIC)的定量检测方法。其原理为将载有抗生素连续梯度浓度的塑料条(E­Test条)置于已接种待测菌液的琼脂平板上，从抑菌圈与E­Test条交界处可读出MIC值。如图是六种抗生素(①～⑥)对某细菌抑菌情况的测定结果，每个E­Test条上抗生素浓度范围均为0.016～256μg/mL。下列相关叙述正确的是()A．检测时，将待测菌液采用稀释涂布平板法接种在琼脂平板培养基上B．该菌株对不同抗生素的敏感性大小为②>③>⑥>⑤>④>①C．部分抑菌圈内出现零散细小的菌落，可能是菌株具有抗药性D．该菌株对抗生素④的MIC值应取1.0μg/mL和256μg/mL的中间数值二、非选择题12．广东特产陈皮具有理气健脾、燥湿化痰之功，其所含黄酮类物质起重要作用，而黑曲霉(一种无害霉菌)可以引起其含量的变化。为了研究黑曲霉对不同年份陈皮黄酮类成分的影响，某研究小组从江门市新会区收集一批陈皮样品进行实验。回答下列问题：(1)对于前期培养的黑曲霉，可利用__________________________________法得到单菌落，并通过显微镜检测鉴定，获得纯的目标菌种，收集它的孢子制备悬浮液。(2)分别称取8克陈化2年、6年、10年的陈皮样品粉末平铺于培养皿，用紫外线对样品进行正反面照射各30min。用紫外线照射样本的目的是__________________________________________。(3)将经紫外线照射过的每种年份的陈皮样品都分为两组，一组各加入1mL无菌水，分别标记为XH2­0、XH6­0、XH10­0，另一组各加入__________________________，不同年份的样品分别标记为XH2、XH6、XH10，陈皮为黑曲霉的生长提供____________________等营养成分。置于恒温恒湿条件下培养一段时间后，取不同接种天数的样品检测黄酮类成分的含量，实验结果如表所示。据表分析，实验结果表明：__________________________________________________________________________________(答出两点即可)。编号第5天第7天第9天第11天第13天XH28.328.779.7413.1114.33XH2­07.427.397.367.687.98XH68.729.739.9110.9310.82XH6­08.338.828.638.829.15XH109.2410.9512.4814.2612.61XH10­010.279.849.359.519.5413．化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。碳源细胞干重(g/L)S产量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖废液2.300.18回答下列问题。(1)通常在实验室培养微生物时，需要对所需的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有__________________________(答出两点即可)。(2)由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是________；用菌株C生产S的最适碳源是____________。菌株C的生长除需要碳源外，还需要______________________(答出两点即可)等营养物质。(3)由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是____________________________________________________________________。(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是____________________(答出一点即可)。14.反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮气(2NOeq\o\al(－,3)＋10e－＋12H＋→……→N2O→N2)，在处理工业污水、治理水体富营养化中具有重要作用。科研人员想从一污水处理厂的活性污泥中筛选分离出耐高温(42℃)的反硝化细菌(目的菌)，用于提升温度较高的工业污水的脱氮效率，具体流程如图所示(BTB培养基初始pH＝6.8，BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色)：(1)BTB培养基灭菌后待平板凝固，应倒置放在超净台上，目的是_________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)将污泥样品梯度稀释后，使用________(填工具)将样液均匀涂布在BTB培养基上，放在________环境中培养2～3天后，挑选显________色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。(3)将纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间，若在培养瓶顶部检测到N2O，即可鉴定为目的菌。不能依据培养液中硝酸盐的浓度变低来鉴定目的菌，原因是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)C/N(碳氮含量比)对反硝化效率有一定的影响。科研人员测得不同C/N条件下目的菌对硝酸盐的去除率，结果如图所示：科研人员提出，在利用目的菌株处理工业污水时，需要适当向污水中投放少量淀粉，据图分析这样做的主要目的是_________________________________________________________________________________________________________。(5)为计数微生物的数量，一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为155、160、176、149个，则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为________。答案1．D2．ABD3.D4.B5．AC6.C7.B8.B9.B10.B11．AC12．(1)平板划线(或稀释涂布平板)(2)消毒，杀灭陈皮样品中的细菌(微生物)(3)1mL黑曲霉孢子悬浮液碳源、氮源(无机盐)黑曲霉对不同年份陈皮的黄酮类成分含量均有促进作用；黑曲霉对陈化2年的陈皮黄酮类成分含量促进作用最大；随着接种天数延长，黑曲霉对黄酮类成分含量的促进作用先增强后放缓13．(1)高压蒸汽灭菌、干热灭菌(2)葡萄糖