【高中生物】动物细胞培养课件 2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第2节动物细胞工程第2章细胞工程第1课时

动物细胞培养技术本课聚焦:1.动物细胞培养的4大条件？2.动物细胞培养的基本操作过程？3.几个名词：细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养从社会中来

皮肤的自体移植灰绿色患者自身的不够用，如何解决？

动物细胞培养技术人造皮肤分析1：动物组织的选择：

幼龄动物or老龄动物1.原理①概

念

从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。细胞增殖（有丝分裂）动物细胞工程的基础2.地位分化程度低、分裂能力强，易培养。一1.营养分析2：培养基的类型：

固体培养基or液体培养基

合成培养基or天然培养基基本营养：水、无机盐、有机碳源、有机氮源特殊物质：维生素、（相应动物）血清？含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基。营养基构成：合成培养基+血清等一些天然成分②条

件一2.无菌、无毒的环境措施1:

灭菌处理——对象？措施2:操作在无菌环境下进行。措施3:

定期更换培养液——目的？培养液和所有培养用具清除代谢物，防止代谢物积累对细胞自身造成危害。4.气体环境3.温度、pH和渗透压与相应动物内环境的理化性质保持一致。置于含

加

的混合气体的培养箱中进行培养。O2：

；CO2

：

。细胞代谢必需95%空气5%CO2维持培养液中的pH值②条

件制成细胞悬液分散成单个细胞

取动物组织培养前为什么分散成单个细胞？（机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理）①分散不会限制彼此的生长与增殖；②分散有利于与培养液充分接触，保证O2与营养供应和代谢物及时排出。分瓶制成细胞悬液原代培养

培养CO2培养箱

培养传代培养原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。传代培养：分瓶后的细胞培养。③过程

原代培养悬浮生长贴壁生长(大多数）细胞贴壁：④接触抑制细胞分裂受阻解决传代培养分瓶培养取动物组织②制成细胞悬液，分瓶培养。①收集细胞悬浮培养的细胞:直接用离心法收集贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集①营养物质缺乏、②代谢废物积累、③细胞密度过大等分散成单个细胞

某些细胞需要贴附于某些基质表面（如培养瓶瓶壁）才能增殖。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。接触抑制：③过程

细胞贴壁过程圆球形细胞刚开始铺展贴壁生长（100×）培养的动物细胞贴壁生长并进行有丝分裂（100×）细胞单层贴壁生长铺满瓶壁后出现接触抑制（100×）贴壁生长与接触抑制细胞悬液细胞贴壁、接触抑制单层细胞多层细胞比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养过程培养结果培养目的相同点获得细胞或细胞产物常用固体培养基新植株葡萄糖、动物血清常用液体培养基细胞增殖细胞的全能性许多细胞快速繁殖等蔗糖、植物激素1.培养过程中细胞都进行有丝分裂，不涉及减数分裂；2.均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件思考.比较

原代培养、传代培养脱分化、再分化二

来源或存在功能、特点局限性胚胎干细胞(ES细胞)成体干细胞诱导多能干细胞(iPS细胞)（阅读P46—47，完成表格）早期胚胎能够分化成为动物体内的任何细胞，并进一步形成组织、器官甚至生物个体成体组织或器官，如造血干细胞、神经干细胞和精原干细胞等体外诱导体细胞产生能分化成为具有特定功能的细胞来治疗疾病。无须破坏胚胎，且避免免疫排斥反应。具有组织特异性，能分化成特定的细胞或组织不具有发育成完整个体的能力需从胚胎中获取，涉及伦理问题，限制了它在医学上的应用技术不成熟。面临的问题:存在着导致肿瘤发生的风险。移植取成纤维细胞等iPS细胞转入相关因子细胞发生转化分化胰岛细胞神经元血细胞肠上皮细胞心肌细胞肝细胞病人iPS细胞用于治疗人类疾病示意图二诱导多能干细胞（iPS细胞）多种体细胞定向诱导分化体外诱导成纤维细胞临床治疗疾病如：白血病、帕金森病、阿而茨海默病等iPS细胞判断下列有关动物细胞培养的表述是否正确。（1）培养环境中需要O2，不需要CO2。（

）（2）细胞要经过脱分化形成愈伤组织。（

）（3）培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清（

）（4）培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理,分瓶后才能继续增殖（

）（5）多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜pH为6.8～7.0。（

） （6）动物细胞培养要定期更换培养液，其目的是便于清除代谢物，防止代谢物积累对细胞自身造成伤害。（

）（7）动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。 （

）（8）制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理。（

） （9）培养动物细胞的第一代(即第一次细胞增殖)被称为原代培养。（

）（10）培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。（

）（11）干细胞是从胚胎中分离提取的细胞（

）×√×××√×××××1.动物和人体内具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞。对右图的相关叙述中，错误的是()A.a过程可表示干细胞的自我更新B.b、c过程表示干细胞具有分化能力C.a、b、c过程中细胞的遗传信息表达情况不同D.a、b、c过程中遗传物质发生了定向改变

D28．(10分)人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC)，其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：(1)细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，可采用________________的方法。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是_________________________________________________，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是_________。(2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是__________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得________________________________________________________。定期更换培养液加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞聚乙二醇(PEG)乙和丙能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞28．(10分)人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC)，其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：(3