叶绿素提取和分离

试剂原理绿叶中的色素溶于有机溶剂无水乙醇，而不溶于水。各种色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸条上扩散得快，反之则慢。无水乙醇层析液色素提取色素分离（层析液：20份石油醚,2份丙酮和1份苯混合而成，93号汽油也可做层析液用）一、实验原理：第一页，共14页。二、实验步骤：第二页，共14页。三、实验结果：第三页，共14页。色素种类吸收光吸收光谱叶绿素（含量约占3/4）叶绿素a（蓝绿色）叶绿素b（黄绿色）

类胡萝卜素（含量约占1/4）胡萝卜素（橙黄色）叶黄素（黄色）四、色素种类及吸收光谱：吸收蓝紫光和红（橙）光吸收蓝紫光第四页，共14页。五、叶绿体色素的分布和功能1、分布：叶绿体的

上。2、功能：

光能（四种色素）、

光能（只有少量特殊状态的叶绿素a）类囊体薄膜吸收、传递转化第五页，共14页。考点1绿叶中色素的提取和分离题组一：考察实验选材、试剂的作用和实验操作：(2013·江苏单科，5)关于叶绿体中色素的提取和分离实验的操作，正确的是 (

)。 A．使用定性滤纸过滤研磨液 B．将干燥处理过的定性滤纸条用于层析 C．在划出一条滤液细线后紧接着重复划线2～3次 D．研磨叶片时，用体积分数为70%的乙醇溶解色素

解析本题可排除错误选项。色素易被滤纸吸附，故用纱布过滤，A错误；每次重复画色素滤液细线时，需等干燥后再进行，C错误；由于叶绿体中的色素不溶于水，因此研磨叶片时需用无水乙醇或丙酮，D错误。

答案

B第六页，共14页。易错警示！

1、实验中的注意事项及操作目的过程注意事项操作目的提取色素(1)选新鲜绿色的叶片使滤液中色素含量高(2)研磨时加无水乙醇溶解色素(3)加少量SiO2研磨充分(4)加少量CaCO3保护色素，防止叶绿素被破坏(5)迅速、充分研磨防止乙醇挥发，充分溶解色素(6)盛放滤液的试管管口加棉塞防止乙醇挥发和色素氧化分离色素(1)滤纸预先干燥处理使层析液在滤纸上快速扩散(2)滤液细线要直、细、匀使分离出的色素带平整不重叠(3)滤液细线干燥后再画－两次使分离出的色素带清晰分明(4)滤液细线不触及层析液防止色素直接溶解到层析液中第七页，共14页。题组二：考察实验结果分析及实验误差种类颜色含量叶绿素b胡萝卜素叶黄素叶绿素a叶绿素

(占总量3/4)类胡萝卜素(占总量1/4)(蓝绿色)(黄绿色)(橙黄色)(黄色)注意：1.色素带的位置代表什么？宽度呢？2.若分离得到的色素带不明显，可能的原因？溶解度含量第八页，共14页。2、绿叶中色素提取分离异常现象分析:（1）收集到的滤液绿色过浅的原因分析:①未加石英砂)(二氧化硅),研磨不充分.②使用放置数天的菠菜叶,滤液色素(叶绿素太少).③一次加入大量的无水乙醇,提取浓度太低(正确做法:分次加入少量无水乙醇)。④未加碳酸钙或者加入过少，叶绿素被破坏。（2）滤纸条色素带重叠①滤液细线不直②滤液细线过粗（3）滤纸条无色素带：①忘记画滤液细线②滤液细线接触到层析液，且时间较长，色素全部溶解到层析液中。第九页，共14页。红橙绿黄蓝青紫可见光:390-760nm不可见光:紫外线(5-370nm)和红外线(750-1000000nm)光合作用利用可见光叶绿素a、b吸收蓝紫光和红（橙）光第十页，共14页。类胡萝卜素吸收蓝紫光第十一页，共14页。题组二：考察实验结果分析及实验误差(经典高考题)某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突变体。将其叶片进行了红光照射光吸收测定和色素层析条带分析(从上至下)，与正常叶片相比，实验结果是 (

)。 A．光吸收差异显著，色素带缺第2条 B．光吸收差异不显著，色素带缺第2条 C．光吸收差异显著，色素带缺第3条 D．光吸收差异不显著，色素带缺第3条

解析叶绿体中的叶绿素a和叶绿素b主要吸收蓝紫光和红光，胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光，所以当水稻叶黄素缺失突变体进行红光照射时，光吸收差异不显著；对正常叶片叶绿体中的色素提取后，层析的结果自上而下依次是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b，故B正确。答案

BB第十二页，共14页。(经典高考题)图中①代表新鲜菠菜叶的光合色素纸层析结果，则图②所示结果最有可能来自(

)。 A．水培的洋葱叶 B．生长的柳树幼叶 C．培养的衣藻 D．秋冬的银杏落叶解析新鲜菠菜叶中的光合色素种类齐全、含量丰富、完整，据图①可知，滤纸上的四条色素带完整，从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b。图②滤纸上的色素带不完整，只有胡萝卜素、叶黄素。秋冬的银杏落叶呈黄色(或橙黄色)，这是由于低温破坏了叶绿素所致，因此叶片中几乎不含叶绿素。其他选项中的材料中都含有四种色素。答案

DD第十三页，共14页。(2017全国Ⅲ)植物光合作用的作用光谱是通过测量光合作用对不同波长光的反应（如O2的释放）来绘制的。下列叙述错误的是()A．类胡萝卜素在红光区吸收的光能可用于光反应中ATP