第二十九章双股RNA病毒

第二十九章双股RNA病毒第1页，共25页，2023年，2月20日，星期一双股RNA病毒呼肠孤病毒科双RNA病毒科微双RNA病毒科单分病毒科第2页，共25页，2023年，2月20日，星期一第一节呼肠孤病毒科（Reoviridae）

第3页，共25页，2023年，2月20日，星期一一、分类呼肠孤病毒科分为2个亚科:光滑呼肠孤病毒亚科(6个属)刺突呼肠孤病毒亚科(9个属)宿主包括哺乳动物、禽类、爬行类、两栖类、鱼类、无脊椎动物及植物。第4页，共25页，2023年，2月20日，星期一光滑呼肠孤病毒亚科与动物疾病有关的属环状病毒属轮状病毒属东南亚12节段病毒属蟹12节段病毒属第5页，共25页，2023年，2月20日，星期一刺突呼肠孤病毒亚科与动物疾病有关的属正呼肠孤病毒属水生呼肠孤病毒属科州蜱传热病毒属质型多角体病毒属昆虫双链九片段RNA病毒属昆虫非包裹呼肠孤病毒属第6页，共25页，2023年，2月20日，星期一呼肠孤病毒科主要动物病毒及所致疾病

属名病毒名称感染动物疾病光滑呼肠孤病毒亚科环状病毒属蓝舌病毒1～26型绵羊、山羊、鹿蓝舌病

非洲马瘟病毒1～9型马、驴、骡、斑马非洲马瘟

马脑炎病毒1～7型马流产、脑炎流行性出血症病毒1～10型鹿、牛流行性出血热

巴尼亚姆病毒1～3型妞流产、先天性异常

蜜露马病病毒马神经症状轮状病毒属轮状病毒A～E型几乎所有动物通常有宿主特异性肠炎东南亚12节段病毒属版纳病毒人神经症状蟹12节段病毒属中华绒螯蟹呼肠孤病毒甲壳类第7页，共25页，2023年，2月20日，星期一呼肠孤病毒科主要动物病毒及所致疾病

属名病毒名称感染动物疾病刺突呼肠孤病毒亚科正呼肠孤病毒属哺乳动物正呼肠孤病毒多种哺乳动物呼吸道病、腹泻1～4型禽正呼肠孤病毒鸡、鸭、鹅、火鸡慢性呼吸道病关节炎、肠炎科州蜱传热病毒属科州蜱传热病毒小型哺乳动物、人科州蜱传热

埃亚契病毒小型哺乳动物、人脑炎水生呼肠孤病毒属草鱼出血热病毒草鱼草鱼出血热第8页，共25页，2023年，2月20日，星期一二、主要特性1、病毒颗粒近似球形，直径80nm，无囊膜。2、有外、中、内三层衣壳，均为20面体对称。3、基因组为线状双股RNA，分节段。10个节段（正呼肠孤病毒、环状病毒）11个节段（轮状病毒、水生呼肠孤病毒）12个节段（科州蜱传热病毒、东南亚十二

节段病毒）4、某些成员有血凝特性。5、易发生基因重配而产生种及血清型的变异。第9页，共25页，2023年，2月20日，星期一三、环状病毒属（Orbivirus）本属为典型的虫媒病毒，成员有30多种。对动物致病的主要有：非洲马瘟病毒蓝舌病病毒流行性出血病毒马脑炎病毒第10页，共25页，2023年，2月20日，星期一（一）环状病毒的基本特性病毒粒子近似球形，直径约80nm，没有脂质囊膜。有一个模糊的外衣壳。基因组由10个双链RNA节段组成。通过多种嗜血节肢动物在脊椎动物宿主中传播。第11页，共25页，2023年，2月20日，星期一1、非洲马瘟病毒（Africanhorsesicknessvirus，AHSV）非洲马瘟病毒为非洲马瘟的病原体。该病是马属动物的一种急性或亚急性虫媒传染病，在非洲撒哈拉沙漠以南是地方性流行病。传播媒介是库蠓的某些种类，其中最重要的是拟蚊库蠓。第12页，共25页，2023年，2月20日，星期一非洲马瘟病毒形态超薄切片中的病毒粒子直径为75nm，内有一个致密的核心，直径约50nm。负染标本内，病毒粒子的总直径为60-80nm，衣壳的直径约55nm，由32个壳粒组成。第13页，共25页，2023年，2月20日，星期一分型非洲马瘟病毒有9个血清型：非洲马瘟病毒1型非洲马瘟病毒2型非洲马瘟病毒3型非洲马瘟病毒4型非洲马瘟病毒5型非洲马瘟病毒6型非洲马瘟病毒7型非洲马瘟病毒8型非洲马瘟病毒9型各型之间无交互免疫，不同型病毒的毒力强弱也不相同第14页，共25页，2023年，2月20日，星期一理化特性核酸为双股RNA。对乙醚、氯仿和去氧胆酸盐有一定抵抗力，抗胰蛋白酶。在pH6-10之间稳定，但在pH3时迅速灭活。血液或血清中的病毒可以长期存活，在4℃甚至室温条件下存活多年。60℃于30分钟使其灭活。保存病毒的适宜温度是4℃或～70℃，马瘟病毒在-20%～-50℃温度中较易灭活。第15页，共25页，2023年，2月20日，星期一培养鸡胚培养各型马瘟病毒均可经卵黄囊接种后于鸡胚内增殖。鼠脑适应株还常可在鸡胚绒毛尿囊膜上生长。细胞培养马瘟病毒可在马肾、绵羊羔肾、鸡胚肾等原代细胞，以及Vero、MS、BHK-21等传代细胞系内增殖，并出现大型的胞浆内包涵体。其中以仓鼠肾细胞系和猴肾细胞系最常应用。第16页，共25页，2023年，2月20日，星期一血凝性某些毒株感染鼠脑的抽提物能够凝集马的红细胞，红细胞凝集的最适条件是pH6.4、37℃孵育2小时。第17页，共25页，2023年，2月20日，星期一病原性自然感染发生于马、骡及猴，死亡率95％。马最敏感，骡次之。驴有一定抵抗力，仅出现温和的发热反应。斑马隐性带毒者，但不发病。人亦可感染，表现为脑炎视网膜炎。马瘟在临床上习惯地分为四个类型，即发热型、肺型、心型和混合型。肺型最为严重，体温升高达41℃，呼吸、脉搏加快，并出现急性肺水肿的症状。病畜可在数小时内死亡。主要病变是肺水肿和胸腔积水。第18页，共25页，2023年，2月20日，星期一微生物学诊断确诊必须依靠病毒分离鉴定以及特异性血清学检查。第19页，共25页，2023年，2月20日，星期一（1）病毒的分离和鉴定取发热期的病马血液或动物的脾脏，制成乳剂，脑内接种2～6日龄小鼠分离病毒。接种后5～10天发病死亡。病毒初步鉴定用补体结合试验。将死亡乳鼠脑组织制成10%乳剂，4℃过夜，离心取上清液作为抗原，与标准阳性血清进行补体结合试验鉴定。也可应用荧光抗体技术或琼脂扩散试验进行初步鉴定。病毒血清型的鉴定，须用中和试验以及血凝抑制试验。第20页，共25页，2023年，2月20日，星期一（2）血清学试验包括补体结合试验、琼脂扩散试验、中和试验和血凝抑制试验、ELISA试验等。第21页，共25页，2023年，2月20日，星期一补体结合试验抗原由感染（乳）鼠脑或细胞培养物制备。马骡感染后7～10天开始出现补体结合抗体，于感染后2～6周达最高滴度，此后逐渐下降，约于6个月左右消失。第22页，共25页，2023年，2月20日，星期一琼脂扩散试验抗原由感染（乳）鼠脑或猴肾细胞培养物经超声波裂解后制备。马匹在感染后2周左右，出现沉淀抗体，4～6个月后下降并消失。一般出现两条沉淀线。由于可能出现动物种间的非特异性沉淀线，因此必须设置正常抗原、阳性抗原、正常血清和阳性血清的多种对照。第23页，共25页，2023年，2月20日，星期一血凝抑制试验血凝抑制抗体的出现时间较早，约在热反应后4～5天即可测出，但消失也快，是诊断马瘟近期感染的一种常用方法。血凝抑制试验的关键，是要制备出高质量的血凝抗原。第24页，共