组织学常规制片技术中石蜡切片的常见问题与补救方法介绍

———组织学常规制片技术中石蜡切片的常见问题与补救方法介绍

石蜡切片(paraffinsection)是组织学常规制片技术中应用最为广泛的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，所以广泛地适用于许多学科领域的研究中。

活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易区分；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤制成片子，才能在镜下清晰辨认其形态结构。

石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与贴片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等繁多步骤；其中切片是决定片子质量好坏的最重要的环节之一。因而影响石蜡切片的因素比较多，本期文章我们归纳了常见切片问题有哪些，以及该如何进行补救。

蜡带侧弯1、刀口锋利不一，局部产生差异导致。

优化措施：可移动刀片，改用新刀口。

2、发现切片刀未覆盖到整个蜡块。

优化措施：调整刀口位置至刀片能切到整个蜡块。

3、如果蜡块左右硬度不一致。

优化措施：尽量使用锋利的新刀口，减轻干扰。

4、如果组织未居蜡块正。

优化措施：用刀片切去部分石蜡，使组织居中或重新包埋。

无法连片，切不出蜡带1、如果空气干燥。

优化措施：通过加湿器；哈气解决。

2、切片机回缩功能未开启？

优化措施：开启回缩功能。

3、材料边缘留蜡太少？

优化措施：重新包埋，注意组织尽量在正。

4、刀的角度不合适？

优化措施：调整余隙角/倾角。

切片卷起呈圆筒状1、蜡块冷冻过度？

优化措施：适度升温，用毛笔将蜡片摊开压住，切2至3片即成带。

2、石蜡过硬？

优化措施：加软蜡。

3、刀口太钝？

优化措施：换新刀口。

4、刀的倾角太大？

优化措施：减小倾角。

切片粘刀或皱褶1、蜡块温度偏高？

优化措施：适度降温。

2、石蜡过软？

优化措施：加强冷冻。

3、刀口上留有一层石蜡？

优化措施：清扫刀片，刀片刮蜡，二甲/苯擦拭刀口。

4、刀口钝？

优化措施：换新刀口。

5、含脂肪多？

优化措施：前期脱脂处理，包埋挤压脂肪。

切片纵裂1、刀有缺口？

优化措施：移动刀口。

2、石蜡中含有杂质？

优化措施：清除杂质，更换高质量石蜡。

3、刀口留有碎屑或细丝？

优化措施：清洁刀口。

4、组织太硬？

优化措施：蜡块入水浸泡软化。

5、组织内有止血钉？

优化措施：抠出止血钉。

切片有颤纹/梯田1、锁杆或零件松动？

优化措施：拧紧锁杆或零件。

2、刀口倾角偏大？

优化措施：适度减小倾角。

3、标本伸出太长？

优化措施：适度回缩，前移刀架。

4、蜡块没夹紧？

优化措施：清洁蜡块，夹头。

5、组织偏硬？

优化措施：表面脱钙，缓慢切片。

6、切片机内部磨损？

优化措施：维护更换新机。

切片厚薄不均1、切片机磨损？

优化措施：维护或更换切片机。

2、用力不当？

优化措施：调整用力。

3、锁杆或零件松动？

优化措施：拧紧锁杆或零件。

4、蜡块过硬？

优化措施：将石蜡块浸泡在水中。

5、温度变化？

优化措施：重新冷冻蜡块。

组织发生裂隙破碎或崩脱1、脱水处理不当？

优化措施：重新脱水。

2、有透明剂残留？

优化措施：增加浸蜡时间，重新包埋。

3、由于脱水机和透明剂的影响，使组织变硬发脆？

优化措施：调整