医学微生物学支原体立克次体

第19章支原体Mycoplasma微生物学教研室医学微生物学支原体立克次体1/75概念：支原体是一类缺乏细胞壁原核细胞型微生物，也是在无生命培养基上生长繁殖最小微生物。其特点为细胞膜含固醇，能经过细菌滤器；高度多形性、形成份枝长丝；含DNA和RNA，二分裂繁殖等。医学微生物学支原体立克次体2/75柔膜体纲支原体目支原体科无胆甾原体科螺原体科支原体属脲原体属医学微生物学支原体立克次体3/75主要病原性支原体肺炎支原体M.pneumoniae人型支原体M.Nominis生殖器支原体M.genitalium穿透支原体

M.penetraus溶脲脲原体U.urealyticum医学微生物学支原体立克次体4/75第一节概述医学微生物学支原体立克次体5/75一、生物学性状1.形态结构最小原核细胞生物；球形、球杆形、长丝状及分枝状等多种形态；G-，着色困难，常用Giemsa染色法染成淡紫色。医学微生物学支原体立克次体6/75医学微生物学支原体立克次体7/75细胞膜由蛋白质和脂质（固醇）组成三层结构医学微生物学支原体立克次体8/75医学微生物学支原体立克次体9/75

特殊顶端结构：粘附宿主上皮细胞表面，与支原体致病相关。医学微生物学支原体立克次体10/752.培养特征:荷包蛋样菌落培养基中含人或动物血清(10~20%)及酵母浸液。多数支原体能在鸡胚绒毛尿囊膜或细胞培养中生长。医学微生物学支原体立克次体11/75固体培养基：

2～7天长出直径约10～600μm经典“荷包蛋样”菌落：低倍镜下见菌落呈圆形，心致密隆起，深入琼脂，外周由颗粒包绕。液体培养基：

清亮需用放大镜/低倍显微镜观察医学微生物学支原体立克次体12/75医学微生物学支原体立克次体13/75支原体是污染细胞培养主要原因之一医学微生物学支原体立克次体14/75判别点支原体细菌L型细胞壁缺失原因在遗传上与细菌无关与原菌相关，能够回复细胞膜含高浓度固醇细胞膜不含固醇培养特征需要胆固醇大多需要高渗培养菌落大小生长慢，菌落小菌落稍大(0.6~1.0)液体培养液体培养混浊度极低一定混浊度，可附壁支原体与细菌L型异同点

不一样点缺乏细胞壁，形态多样，能经过滤菌器。固体培养—菌落呈荷包蛋样或颗粒状。临床表现相同—间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等

相同点医学微生物学支原体立克次体15/75

支原体葡萄糖精氨酸尿素吸附细胞致病性

肺炎支原体+——红细胞肺炎、支气管炎人型支原体—+——泌尿生殖道感染生殖器支原体+———泌尿生殖道感染穿透支原体++—红细胞条件感染

CD4+T细胞多见于艾滋病巨噬细胞溶脲脲原体——+—泌尿生殖道感染

流产及不孕不育

3、生化反应医学微生物学支原体立克次体16/75溶脲脲原体分解尿素产氨，是酚红变红，液体清亮，为阳性（右）医学微生物学支原体立克次体17/75

（四）抗原结构来自细胞膜，胞膜外层蛋白质是主要抗原，惯用生长抑制试验(GIT)与代谢抑制试验

(MIT)判定。

GIT是将吸有型特异性抗血清滤纸片置于接种有支原体固体培养基上，经孵育出现同型血清抑制该型支原体生长现象。

MIT是将支原体接种在含有抗血清培养基中，若抗体与支原体型一致，则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸。此两种方法可将支原体分成若干血清型。医学微生物学支原体立克次体18/75（五）抵抗力

♣对脂溶剂化学消毒剂敏感，对结晶紫、醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力；

♣对影响细胞壁合成抗生素如青霉素类天然耐受，但对干扰蛋白质合成抗生素如强力霉素等敏感。医学微生物学支原体立克次体19/75二、致病性与免疫性顶端结构与宿主细胞上受体结合而粘附于细胞上荚膜或微荚膜抗吞噬作用产生毒性代谢产物超抗原，刺激炎症细胞分泌大量细胞因子粘附、侵入CD4T淋巴细胞（穿透支原体）医学微生物学支原体立克次体20/75免疫性

♣体液免疫：抗膜蛋白抗体包含

IgM、IgG和SIgA

♣细胞免疫：主要是特异性CD4＋Th1

细胞分泌细胞因子

医学微生物学支原体立克次体21/75第二节主要致病性支原体医学微生物学支原体立克次体22/75一肺炎支原体是下呼吸道主要致病性支原体，所引发人类支原体肺炎占细菌性肺炎50%左右，其病理改变以间质性肺炎为主，又称之原发性非经典性肺炎。症状轻，与胸片严重程度不符医学微生物学支原体立克次体23/75（一）致病性

1.主要经飞沫传输，但大多数发生于夏末秋初，5～15岁青少年发病率最高。

2.含特殊顶端结构：P1表面蛋白（170

kDa）和P30（32

kDa）为主要粘附蛋白，使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。

3.肺炎支原体含有超抗原作用，能刺激炎症细胞在感染部位释放大量淋巴因子（如TNF-α、IL-1、IL-6）引发组织损伤。致病性与免疫性医学微生物学支原体立克次体24/75所致疾病------支原体肺炎传输路径

经飞沫传输发病年纪

儿童及青少年多见潜伏期2－3W临床表现发烧（约39℃）、头痛、连续性顽固咳嗽、胸痛等。普通经3－10d主要症状消失，但咳嗽能够连续1个月之久。医学微生物学支原体立克次体25/75医学微生物学支原体立克次体26/75医学微生物学支原体立克次体27/75免疫性

血清特异性IgM、IgG及SIgA和致敏淋巴细胞；呼吸道局部黏膜产生SIgA对预防再感染有较强保护作用；出现IgE介导I型超敏反应，促使哮喘病急性发作

医学微生物学支原体立克次体28/75（一）分离培养

痰或咽拭子接种在SP-4培养基，挑选可疑菌落，经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步判定，深入判定需用特异性抗血清做GIT与MIT试验。三、微生物学检验法医学微生物学支原体立克次体29/75三、微生物学检验法（二）血清学检验

冷凝集试验：

即用病人血清与人O型血红细胞或本身红细胞混合，4℃过夜时可发生凝集，而在37℃时这种凝集又分散解离开，但仅50％左右患者才出现阳性。此反应为非特异性。快速诊疗

ELISA：检测P1和P30蛋白mAbs

PCR：从痰标本中检测16SrRNA或

P1蛋白基因医学微生物学支原体立克次体30/75ELISA：此法敏感，特异性高，快速、经济，并可检测IgM和IgG抗体，为当前诊疗可靠方法。检测分子量190kDaP1蛋白，3h可完成试验，特异性高，敏感性为104CFU／μl标本。医学微生物学支原体立克次体31/75防治标准

大环内酯类药品喹诺酮类药品四、防治标准医学微生物学支原体立克次体32/75二解脲脲原体溶脲脲原体U.urealyticum人型支原体M.Nominis生殖器支原体M.genitalium性传输疾病（STD）病原体医学微生物学支原体立克次体33/75解脲脲原体

通常借居在人泌尿生殖道粘膜，引发非淋菌性尿道炎，也能引发盆腔等部位感染。还可经过胎盘感染胎儿，出现早产和死胎。也能引发妇女不孕不育症。常与衣原体、淋球菌合并感染医学微生物学支原体立克次体34/751.借居泌尿生殖道，2.传输路径为性接触和母婴传输。3.致病机制-粘附于宿主细胞表面，引发细胞膜损伤；-产生毒性代谢产物如NH3，对宿主细胞有急性毒性作用；-磷脂酶损伤宿主细胞膜。解脲脲原体

医学微生物学支原体立克次体35/752.引发非淋菌性尿道炎(NGU)，上行感染，可引发前列腺炎或附睾炎；阴道炎和宫颈炎，并可造成流产。因为与人精子膜有共同抗原，对精子可造成免疫损伤而致不育。常与衣原体、淋球菌合并感染医学微生物学支原体立克次体36/75引发男性不孕原因：①Uu吸附于精子表面，使其运动受阻，并蔽盖了精子识别卵细胞部位②Uu产生神经氨酸样物质，干扰精子与卵细胞结合。③Uu与精子膜有共同抗原，从而产生抗精子抗体医学微生物学支原体立克次体37/75病原体检测

接种液体培养基，分解尿素产碱，酚红指示剂由橘黄色变为红色；培养24～48h，用低倍镜观察菌落，深入判定需用特异抗血清做GIT与MIT。三、微生物学检验法医学微生物学支原体立克次体38/75核酸检测

PCR检测：

检测尿素酶基因、多带抗原（MB-Ag）基因和16S

rRNA基因。此法快速、特异，适宜于大批量标本检测。三、微生物学检验法医学微生物学支原体立克次体39/75生殖支原体与泌尿生殖道感染相关人型支原体能引发渗出性咽炎及尿道炎，也与卵巢脓肿、产褥热等相关。医学微生物学支原体立克次体40/75思索题1、名词解释：支原体(mycoplasma)2、简述致病性支原体种类及其致病性。3、支原体与细菌L型比较医学微生物学支原体立克次体41/75第20章立克次体（Rickettsia）概念：立克次体是一类以节肢动物为传输媒介，严格活细胞内寄生原核细胞型微生物，能够引发斑疹伤寒、Q热、恙虫病、斑点热等传染病。医学微生物学支原体立克次体42/751906年首次被发觉，第一个被发觉立克次体病是斑疹伤寒。为了纪念因研究斑疹伤寒被感染而牺牲年仅39岁医师，将这类微生物统称为立克次体。医学微生物学支原体立克次体43/75立克次体共同特点：专性活细胞内寄生，以二分裂方式繁殖有DNA和RNA两类核酸球杆状或多形态，革兰染色阴性寄生在吸血性节肢动物体内，以节肢动物为传输媒介或储存宿主引发自然疫源性疾病对各种抗生素敏感医学微生物学支原体立克次体44/75第一节概述医学微生物学支原体立克次体45/75一、生物学性状大小:(0.3μm-0.6μm)×(0.8μm-2.0μm)形态:

类似球杆菌,多形性

(球形、哑铃形、长杆状或丝状等)染色:Giemsa染色法:紫色或蓝色

马氏染色法(Macchiavellostain):红色排列:

散在于细胞浆中、核旁成堆

(斑点热立克次体在胞浆或核内)培养:

专性细胞内(活细胞内)寄生培养方法:

鸡胚卵黄囊内接种，组织细胞培养动物接种医学微生物学支原体立克次体46/75医学微生物学支原体立克次体47/75抗原结构：群特异性抗原,种特异性外膜抗原外斐反应(Weil-Felixreaction):斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌一些X菌株（OX19、OX2、OXk

）有共同耐热多糖类抗原。利用这些变形杆菌菌株代替立克次体抗原，进行定量非特异凝集反应（交叉凝集反应），以检测人或动物血清中对应抗体。帮助诊疗斑疹伤寒,恙虫病,滴度超出1:160有意义.医学微生物学支原体立克次体48/75立克次体变形杆菌抗体抗体交叉反应

外裴氏反应示意图医学微生物学支原体立克次体49/75抵抗力:

热、消毒剂:较弱(56℃,数分钟,0.5%石碳酸、

0.5%来苏,75%酒精中数分钟)

抗生素:敏感:氯霉素和四环素不敏感:磺胺类，磺胺药刺激生长低温、干燥:较强(-20℃或冷冻干燥六个月以上)医学微生物学支原体立克次体50/75二、致病性与免疫性传输媒介：吸血节肢动物，如虱、蚤、蜱、螨等。致病物质：脂多糖（发烧、微循环障碍、DIC、休克磷脂酶A（溶解宿主细胞膜或吞噬体膜）微荚膜（粘附、抗吞噬）医学微生物学支原体立克次体51/75致病过程

体虱鼠蚤人体局部淋巴结及小血管内皮细胞恙螨第一次入血

全身小血管内皮细胞高热、皮疹神经系统症状临床症状第二次入血心血管系统症状生长繁殖大量繁殖医学微生物学支原体立克次体52/75致病机制：立克次体虱、蚤、蜱、螨等叮咬或其粪便污染伤口局部淋巴组织或小血管内皮细胞中增殖立克次体血症（第一次）经血流全身小血管内皮细胞大量增殖立克次体血症（第二次）、毒血症和各种临床症状。医学微生物学支原体立克次体53/75螨虫蜱医学微生物学支原体立克次体54/75吃饱跳蚤人体虱医学微生物学支原体立克次体55/75致病性与免疫性所致疾病

人畜共患性疾病流行性斑疹伤寒地方性斑疹伤寒恙虫病

Q热医学微生物学支原体立克次体56/75免疫性：以细胞免疫为主，体液免疫为辅。多数可取得持久免疫。医学微生物学支原体立克次体57/75三、微生物学诊疗与防治病原体分离培养与判定血清学试验（外斐反应、ELISA）控制和毁灭媒介昆虫；抗生素治疗（氯霉素、四环素，但禁用磺胺类药品）；全细胞灭活疫苗立克次体易引发试验室感染，注意无菌操作！！医学微生物学支原体立克次体58/75第二节主要致病性立克次体医学微生物学支原体立克次体59/75一、普氏立克次体

(R.prowazekii)流行性斑疹伤寒（epidemictyphus）虱型斑疹伤寒（louse-bornetyphus）医学微生物学支原体立克次体60/75流行步骤

传染源：

病人

储存宿主：

病人

传输媒介：

人虱

传输方式：

人人虱人医学微生物学支原体立克次体61/75医学微生物学支原体立克次体62/75所致疾病——流行性斑疹伤寒临床表现:

潜伏期（10～14d）高热、头痛、肌肉痛等（4～7d）皮疹神经、心血管和其它器官病变医学微生物学支原体立克次体63/75免疫力

病后免疫持久

与地方性斑疹伤寒有交叉免疫医学微生物学支原体立克次体64/75二、斑疹伤寒立克次体

(R.

typhi)莫氏立克次体（R.mooseri）地方性斑疹伤寒（endemictyphus）鼠型斑疹伤寒（murinetyphus）

医学微生物学支原体立克次体65/75流行步骤

传染源：鼠储存宿主：啮齿类动物(主要为老鼠)传输媒介：鼠蚤或鼠虱传输方式：鼠鼠蚤人