实验二 发酵罐认知及使用培训

实验二发酵罐认知及使用培训第1页，共16页，2023年，2月20日，星期六主要内容1.各部件名称及功能2.电极及电极标定3.发酵罐的灭菌4.发酵5.注意事项第2页，共16页，2023年，2月20日，星期六1.各部件名称及功能第3页，共16页，2023年，2月20日，星期六发酵罐由罐体、管路、主机及附属设备四部分组成第4页，共16页，2023年，2月20日，星期六1）罐体电机、泡沫电极、空气过滤器、空气前压力表、流量计、尾气管、尾气冷凝管、视窗、照明灯、夹套、温度电极、取样阀、罐底阀第5页，共16页，2023年，2月20日，星期六2）管路蒸汽一路蒸汽进发酵罐夹套二路蒸汽进发酵罐三路蒸汽进取样管路空气：进罐水一路进发酵罐夹套；电加热器、循环水泵、电磁阀二路进排气管夹套排气管排水管第6页，共16页，2023年，2月20日，星期六3）主机电源开关、显示屏、加热指示灯、注水开关、搅拌开关、补料泵、电极线第7页，共16页，2023年，2月20日，星期六4）附属设备蒸汽发生器空气压缩机第8页，共16页，2023年，2月20日，星期六2.电极及电极标定pH电极、溶氧电极、泡沫电极、温度电极pH电极、溶氧电极使用时需标定1.pH电极和溶氧电极在标定之前要在缓冲液中浸泡并联机通电30min以上。2.pH电极先标定零点（6.86），再标定斜率（4.00）。3.在灭菌达到100℃时标定溶氧0%，（也可在饱和的亚硫酸钠溶液中标定0%）发酵参数设置完毕但还未接种时标定100%。第9页，共16页，2023年，2月20日，星期六3.发酵罐的灭菌1）准备开蒸汽发生器、开空气压缩机、开水源开关、标定电极、装罐。2）预热（0-90℃）开搅拌器，转速为200-300rpm；温度设为手动微开排气阀、开排夹套水阀，三通阀提到上挡位，其它阀均关，缓慢开一路蒸汽阀，蒸汽进夹套预热第10页，共16页，2023年，2月20日，星期六3）加热（蒸汽进罐）90-121℃停搅拌，开空气过滤器排冷凝水阀，开二路蒸汽阀，至基本无冷凝水排出，关小排冷凝水阀，三通阀放到下挡位，蒸汽进罐（调整过滤器前压力表示数在0.12-0.16MPa之间）到100℃约2min后关闭排气阀此时可标定溶氧为0%第11页，共16页，2023年，2月20日，星期六4）保温阶段（121℃，20min）开排气阀，旋松接种口，开三路蒸汽阀—开取样阀—开罐底阀，6-7min后关闭，关闭顺序相反调节进气量和排气量，使温度维持在121℃第12页，共16页，2023年，2月20日，星期六5）降温（121℃-发酵温度）关接种口，三通阀提至上挡位，关二路蒸汽阀，关一路蒸汽阀，尾气关小开空气过滤器排冷凝水阀，开空气阀，至无冷凝水排出时关闭排冷凝水阀，三通阀放至下档位。空气进罐点注水开关，关闭排夹套水阀，开启进水阀和循环管线切断阀，调温度为自动。温度低于100℃时开搅拌冷却过程中，罐压严禁掉零。第13页，共16页，2023年，2月20日，星期六4.发酵1）温度降至发酵温度后，设置各发酵参数，溶氧电极校100%2）火焰圈接种（罐压调小后再接种）3）发酵初始化4）发酵结束，数据存盘5）放料，清洗，关仪器。第14页，共16页，2023年，2月20日，星期六5.注意事项1.最高工作压力不大于0.2Mpa，进罐空气压力应不大于0.2Mpa，最高消毒温度为126℃。2.培养基装量：5L罐最高不超过4L，10L罐最高不超过8L，最少装量以所有的电极都没于液面以下为准。3.在过滤器消毒时，流经空气过滤器的蒸汽压力应在0.12～0.14MPa之间，最高不得超过0.17MPa。压力过低将造成灭菌不彻底，压力过高则空气过滤器滤芯有可能被损坏而失去过滤能力。4.在实消结束后冷却时，发酵罐内严禁产生负压，以免损坏设备或造成污染。开始控温前把注水开关打开，确保夹套中有水5.接种时要保证无菌环境，需要在进料口放置火圈。第15页，共16页，2023年，2月20日，星期六6.发酵过程中，罐压应维持在0.03～0.05MPa之间，以免引起污染。7.发酵结束后数据存盘，关闭总电源前，请将控制器退回主菜单，然后按Ctrl+F6关闭控制程序，然后关闭电源。8.运行结束后，关闭自来水阀，空气源，蒸汽发生器。9.每次移动发酵罐的时候都要先把溶氧电极和pH电极取下来，防止在挪动的过程中碰撞损坏电极。10.手动清洗罐体前要先取下溶氧和pH电极，再打开发