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文档简介
实验一、蟾蜍屈肌反射、骚扒反射的观察及反射弧分析药理与毒理学实验室李卓明一、实验目的学习脊蟾蜍标本的制备方法观察脊蟾蜍的屈肌反射及骚扒反射利用脊蟾蜍分析反射弧的组成部分,探讨反射弧的完整性与反射活动的关系二、实验原理反射(Reflex)反射是指在中枢神经系统参与下,机体对内外环境变化所作出的规律性应答。反射弧是反射活动的结构基础。反射弧的组成三、实验材料与器械蟾蜍任式液(Ringer’ssolution):
所含成分接近两栖动物内环境,用于保持两栖类离体组织器官的生理活性。蛙类手术器械(毁髓针、金冠剪、手术剪、手术镊、玻璃针、固定针、棉线)、铁支架、铁夹、刺激电极、滤纸、纱布、棉球、培养皿等。1%硫酸溶液、普鲁卡因、可卡因、酒精。四、实验步骤(一)制备脊蟾蜍1、用毁髓针捣毁蟾蜍脑部,保留脊髓,制成脊蟾蜍标本。2、将蟾蜍俯卧位固定于蛙板上,剪开右侧股部皮肤,用玻璃针分离大腿肌肉,暴露坐骨神经,并在神经下穿线备用。3、用铁夹夹住蟾蜍下颌,将其悬挂在铁支架上。股二头肌半膜肌坐骨神经(二)观察屈肌反射、测定反射时间1、观察屈肌反射:用培养皿盛0.5%硫酸溶液,将蟾蜍右后肢的最长脚趾浸于硫酸溶液中,观察屈肌反射(在脊动物的皮肤接受伤害性刺激时,受刺激一侧的肢体出现屈曲的反应,关节的屈肌收缩而伸肌弛缓,称为屈肌反射)有无发生,然后用清水洗去皮肤上的硫酸溶液。2、从将蟾蜍脚趾浸入硫酸溶液起开始计时,出现屈肌反应时停止计时,此为屈肌反射时间。重复测定屈肌反射3次,取均值作为右后肢的反射时。3、同上法测定左后肢的反射时。(三)观察剥离皮肤对屈肌反射的影响1、用手术剪对右后肢最长脚趾的基部皮肤做一环切,剥离长脚趾的皮肤。以硫酸刺激去皮的脚趾,观察屈肌反射有无。2、改换右后肢有皮肤的脚趾,观察屈肌反射有无。(四)观察骚扒反射、测定反射时间将浸有0.5%硫酸溶液滤纸片贴在蟾蜍的下腹部,蟾蜍会抬起下肢将滤纸片扒开,此为骚扒反射。记录反射时间。(五)观察麻醉坐骨神经对屈肌反射、骚扒反射的影响
1、用细棉条包住分离出的坐骨神经,在细棉条上滴几滴2%普鲁卡因溶液后,以硫酸溶液刺激右后肢有皮肤的脚趾,每隔2min刺激一次,观察屈肌反射。记录从给药至屈肌反射消失的时间。
2、屈肌反射消失后,将浸有0.5%硫酸溶液滤纸片贴在蟾蜍的下腹部,观察骚扒反射。每隔2min重复一次,记录从普鲁卡因给药至骚扒反射消失的时间。
3、换左侧后肢最长脚趾,以硫酸溶液刺激,记录屈肌反射时有无变化。(六)观察毁坏脊髓对屈肌反射、骚扒反射的影响1、用毁髓针捣毁蟾蜍脊髓。2、观察左侧后肢的屈肌反射、骚扒反射有无变化。五、注意事项毁脑时不可伤及脊髓每次硫酸刺激后应立即用清水洗净,以免损伤皮肤每次试验时,要使皮肤接触硫酸的面积不变,以保持相同的刺激强度。剥脱脚趾皮肤要完全六、思考题P47实验二、蟾蜍心室肌的期前收缩与代偿间歇一、实验目的学习蟾蜍在体心脏舒缩活动的记录方法和技术。通过观察在心脏活动的不同时期给予刺激,以观察心肌兴奋性阶段性变化的特征。通过实验掌握心肌期前收缩与代偿间歇的机制有效不应期动作电位0期去极化——复极至-60mV
机械收缩期——舒张初期二、实验原理期前收缩
在舒张早期以后给予一次较强的阈上刺激,可以在正常节律性收缩到达以前产生一次提前收缩。代偿间歇
由于期前收缩也有不应期,下一次正常节律性收缩如果正好落在期前收缩的有效不应期,就不能引起心肌兴奋,舒张期延长。二、实验原理心肌收缩曲线时间/(1/5s)a、b、c、d刺激标记E:期前收缩P:代偿间歇蟾蜍蛙类手术器械、任氏液BL-420生物机能系统蛙心夹、张力传感器、双针形刺激电极三、实验材料与器械四、实验步骤(一)蟾蜍心脏暴露1、用毁髓针捣毁蟾蜍脑部、脊髓,制成双毁髓蟾蜍标本。2、开胸。3、剪开心包膜,暴露心脏。4、观察心脏结构及收缩顺序。四、实验步骤(二)连接仪器、记录信号1、打开BL-420生物机能系统,连接输入信号——通道——张力。2、用系线的蛙心夹夹住少许心尖肌肉,将蛙心夹系线固定在张力传感器的应变梁孔。启动系统,调节系线张力,使心脏的收缩活动在显示屏上出现。记录正常心博曲线,计算心率。3、将刺激电极安放在心室外壁。调整刺激参数为3V,在心脏收缩
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