梅毒的实验室检查与技术规范课件

梅毒试验室检验与技术规范

朱穗兰3月2日梅毒的实验室检查与技术规范课件第1页主要内容梅毒概述梅毒血清学检测方法梅毒检测技术规范梅毒的实验室检查与技术规范课件第2页梅毒概述（一）性接触是主要传染路径未经治疗患者在感染后1年内最含有传染性伴随病期延长，传染性越来越小到感染后2年，经过性接触普通无传染性母婴传播在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可经过胎盘传染未经治疗者，虽已无性传输（病期>2年），但妊娠时仍可传染给胎儿,病期越长，传染性越小;梅毒的实验室检查与技术规范课件第3页梅毒概述（二）一期梅毒硬下疳和(或)腹股沟淋巴结肿大二期梅毒

可有一期梅毒史，病期在2年以内有多形性皮疹、扁平湿疣等三期（晚期）梅毒可有一期或二期梅毒史，病期在2年以上皮肤黏膜损害等，包含神经梅毒、心血管梅毒隐性（潜伏）梅毒早期：病期在2年以内；晚期：病期在2年以上。无任何梅毒性症状和体征胎传（先天）梅毒早期：在2岁前发生；晚期：在2岁以后发病。胎传隐性梅毒：无临床表现梅毒的实验室检查与技术规范课件第4页梅毒概述（三）疑似病例、确证病例诊疗依据：病史症状试验室检验梅毒试验室检验结果对诊疗有决定性意义梅毒的实验室检查与技术规范课件第5页梅毒试验室检测技术病原学检测血清学检测梅毒的实验室检查与技术规范课件第6页梅毒血清学检测方法梅毒的实验室检查与技术规范课件第7页梅毒血清学检测分类(1)非梅毒螺旋体抗原血清学试验（非特异性梅毒抗体）(2)梅毒螺旋体抗原血清学试验（特异性梅毒抗体）两类方法。为何梅毒试验室诊疗需要两类血清学检测方法？梅毒的实验室检查与技术规范课件第8页非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理人体感染了梅毒螺旋体后，组织受到破坏，释放出来一个类脂成份，与梅毒螺旋体结合形成完全抗原，刺激机体在3周-4周产生类脂质抗体（反应素）。主要是IgM和IgG混合抗体。抗体作用无保护作用，治疗监测。未经治疗病人，其血清内反应素可长久存在。经正规治疗后，反应素能够逐步降低至转为阴性。临床上非梅毒螺旋体抗原血清学试验为何有定性和定量两种检测法？梅毒的实验室检查与技术规范课件第9页非梅毒螺旋体抗原血清学试验全部非梅毒螺旋体抗原血清试验抗原基本成份都是一样方法包含：（1）快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)（2）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）（3）性病研究试验室试验(VDRL)等。基本成份是心磷脂卵磷脂和胆固醇抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见上述方法敏感性和特异性都基本相同梅毒的实验室检查与技术规范课件第10页

试验特点

原理和成份与试验相同

血清不需要灭活

不需要显微镜观察结果

可作定量试验

有现成试剂盒携带方便操作简单价格廉价梅毒的实验室检查与技术规范课件第11页操作关键点仪器：水平旋转仪。定性试验加样：吸收50ul血清(浆)放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原反应：将卡片置水平旋转仪旋转8分钟，马上在亮光下观察结果3.定量试验稀释夜准备：在圈内加入50uL生理盐水（依据需要确定稀释度），勿将盐水涂开。加样：吸收50uL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。下同定性试验。梅毒的实验室检查与技术规范课件第12页非梅毒螺旋体抗原血清学试验结果判断RPRTRUST梅毒的实验室检查与技术规范课件第13页非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。经治疗后血清滴度可下降并转阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染指征。为何要做定量检测？梅毒的实验室检查与技术规范课件第14页非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义一期梅毒1年后转为阴性二期梅毒2年后转为阴性。晚期梅毒治疗后血清滴度下降迟缓，2年后约50%病人血清反应仍为阳性。梅毒的实验室检查与技术规范课件第15页TRUST结果解释示意图

梅毒的实验室检查与技术规范课件第16页假阳性问题

假阳性：非梅毒患者血清反应呈阳性①技术性假阳性因为标本保留不妥（如细胞污染或溶血）、试剂质量差或过期、或试验室操作错误所造成。②生物学假阳性是因为患者有其它疾病或生理状态发生改变，使梅毒血清试验出现阳性一些疾病：结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等，疾病发展过程中释放心磷脂到血液中呈假阳性。老年人。生理机能发生改变：少数孕妇也可发生生物学假阳性。梅毒的实验室检查与技术规范课件第17页梅毒假阳性反应处理技术性假阳性反应普通是因为操作错误引发假阳性反应，经过重复试验即可除外。

对生物学假阳性反应，应做TPHA（TPPA）等试验进行排除。梅毒的实验室检查与技术规范课件第18页前带现象指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓度抗体时出现弱阳性、不经典或阴性反应结果，而临床上又象二期梅毒，此时将血清稀释后再进行试验，出现了阳性结果，该现象称为前带现象。处理：将血清稀释后再进行试验。梅毒的实验室检查与技术规范课件第19页耐血清性（血清固定）指经抗梅毒治疗后，非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时期内不阴转。早期耐血清性常与治疗量不足或不规则治疗、复发、再感染或有神经系统梅毒等原因相关。梅毒的实验室检查与技术规范课件第20页梅毒螺旋体抗原血清学试验

梅毒的实验室检查与技术规范课件第21页梅毒螺旋体抗原血清学试验方法

梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)

梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(RT)荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）化学发光免疫分析法（CLIA）梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）梅毒的实验室检查与技术规范课件第22页TPPATPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒，此致敏颗粒与人血清中抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可见凝集反应，含有较高敏感性和特异性。TPPA是当前WHO认可梅毒抗原血清学试验“金标准”，惯用于新方法、新试剂评价参考标准。梅毒的实验室检查与技术规范课件第23页TPPA(TPHA)试验原理示意图

梅毒的实验室检查与技术规范课件第24页梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义普通情况下，一旦梅毒患者梅毒螺旋体抗原血清试验呈阳性，即使经过正规有效治疗治，仍将终生阳性。所以TPPA等试验不能作为疗效观察指标。作为非梅毒螺旋体抗原血清试验初筛阳性标本确实证试验。TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊疗。

梅毒的实验室检查与技术规范课件第25页TPPA结果解释示意图

梅毒的实验室检查与技术规范课件第26页梅毒血清学试验结果解释梅毒血清学试验结果解释梅毒的实验室检查与技术规范课件第27页

梅毒检测技术规范介绍梅毒的实验室检查与技术规范课件第28页全国梅毒检测技术规范第一章

梅毒检测样品采集和处理第二章

梅毒血清学检测

第三章

梅毒病原体显微镜检测

第四章

梅毒病原体核酸检测

第五章

试验室生物安全

第六章

梅毒检测试验室质量管理梅毒的实验室检查与技术规范课件第29页第一章样品采集和处理血清、血浆、全血及脑脊液:

梅毒血清学检测或核酸检测皮损部位组织液、淋巴穿刺液:梅毒病原体检测或核酸检测。梅毒的实验室检查与技术规范课件第30页梅毒血清学试验适用范围

梅毒的实验室检查与技术规范课件第31页第二章梅毒血清学检测

检测目标:临床诊疗、血液筛查、流行病学监测以临床诊疗为目标检测是为了确定梅毒感染情况。以血液筛查为目标检测是为了预防梅毒经血传输。以流行病学监测为目标检测是为了调查梅毒血清学感染率和发病率。

梅毒的实验室检查与技术规范课件第32页梅毒试验室检测策略选择依据目标选择检测方法及检测策略。可采取任何一类梅毒血清学检测方法作为筛查试验。梅毒的实验室检查与技术规范课件第33页以临床诊疗为目标检测策略一

梅毒的实验室检查与技术规范课件第34页以临床诊疗为目标检测策略二

梅毒的实验室检查与技术规范课件第35页策略一和策略二比较

梅毒的实验室检查与技术规范课件第36页第三章梅毒体病原学检测检测方法暗视野显微镜检验镀银染色检验梅毒的实验室检查与技术规范课件第37页第四章梅毒核酸检测可对血浆、血清、皮损部位组织液、淋巴穿刺液及脑脊液等标本梅毒螺旋体核酸检测在早期梅毒、神经梅毒和先天梅毒等诊疗，以及螺旋表达症感染和既往感染判别诊疗中含有一定价值可应用于梅毒螺旋体耐药性监测、菌株流行病学分型。梅毒的实验室检查与技术规范课件第38页第五章试验室生物安全梅毒生物危害梅毒螺旋体属第三类病原微生物，普通情况下对人、动物或者环境不组成严重危害，传输风险有限，试验室感染后极少引发严重疾病，是有有效治疗和预防方法致病微生物

梅毒相关检测生物安全级别

为了确保安全，对临床和现场未知样本梅毒血清学检测应在符合Ⅱ级生物安全试验室（BSL-2）要求试验室中进行。如有艾滋病检测试验室，能够在艾滋病抗体检测试验室中进行。梅毒的实验室检查与技术规范课件第39页第六章试验室质量管理质量确保质量评定试剂评价梅毒的实验室检查与技术规范课件第40页质量确保检测方法和试剂选择

用于临床诊疗检测方法应使用经国家食品药品监督管理局注册同意试剂，应选择敏感性高、特异性好试剂。性病参比试验室和省级性病中心试验室应定时组织开展梅毒诊疗试剂临床质量评价和新方法与技术评定。梅毒的实验室检查与技术规范课件第41页质量评价全部梅毒检测试验室应参加外部质量评价省级中心试验室应参加国家级职能工作考评和PT其它试验室应参加省级职能工作考评和PT。梅毒的实验室检查与技术规范课件第42页质量评价考评组织单位依据PT考评结果、职能工作评价结果及对部分试验室现场评价情况，汇总各试验室最终考评结果，上报相关机构。考评单位应将考评得分及扣分原因反馈各参评试验室，以适当方式在适当范围内公开公布考评结果。为合格者颁发合格证书