分子生物学细胞周期研究生

分子生物学细胞周期研究生分子生物学细胞周期研究生第1页Section1Introduction分子生物学细胞周期研究生第2页细胞周期（cellcycle）就是指细胞生长与分裂周期，即细胞在一次分裂结束开始生长，到下一次分裂完成所经历过程。分子生物学细胞周期研究生第3页1.PhasesofCellCycle细胞周期普通包含以下四个阶段：G1期：从有丝分裂完成到DNA复制之前一段时期；S期：为DNA复制时期；G2期：从DNA复制完成到有丝分裂开始一段时期；M期：从细胞分裂开始到结束时期。分子生物学细胞周期研究生第4页PhasesofCellCycleG0分子生物学细胞周期研究生第5页分子生物学细胞周期研究生第6页2.CharacteristicsofCellCyclePhasesG1期：细胞周期大个别时相处于G1期，动物细胞普通为6~12小时。该期主要生化活动是合成RNA和蛋白质。S期：此期普通连续6~8小时，其长短主要由基因组复杂度决定。该期主要生化活动是复制DNA。分子生物学细胞周期研究生第7页G2期：是最短时相。该期主要生化活动是合成一些与有丝分裂相关蛋白质。M期：该期很短，普通连续0.5~2小时。该期生化合成停顿，细胞形态发生改变，一个母细胞分裂成2个子代细胞。分子生物学细胞周期研究生第8页3.CheckingPointsofCellCycle真核细胞分裂增殖必须经过两个关键调控点：即DNA合成开始时G1→S期转换和有丝分裂开始时G2→M期转换。细胞必须在顺利经过这两个调控关键点之后，才可能完成细胞分裂增殖，即细胞周期。除此之外，细胞由G0→G1期转换，也包括另外一个调控点。分子生物学细胞周期研究生第9页细胞周期中各关键点转换，是经过各种调控因子相互作用，组成级联网络调控系统来实现。这一调控系统关键就是周期素依赖蛋白激酶（cyclin-dependentproteinkinase，CDK）家族。正是该家族组员次序激活和对关键底物磷酸化促进细胞周期有序进程，开启并完成G1→S期和G2→M期转换。分子生物学细胞周期研究生第10页Section2RegulationofCellCycle分子生物学细胞周期研究生第11页1.GrowthFactorsandtheirReceptors生长因子，如EGF、PDGF、TGF、FGF、NGF、IL-2等，与对应靶细胞膜受体结合后，即可经过细胞信号转导，调整相关结构基因表示，开启细胞增殖过程。分子生物学细胞周期研究生第12页2.StructureandFunctionofCyclin周期素都是CDK调整亚基，分别在细胞周期不一样时期积累，激活CDK，使其含有催化关键底物磷酸化修饰并调整其活性。在高等真核细胞中，周期素最少分为A、B、C、D、E、F、G等几大类。分子生物学细胞周期研究生第13页周期素家族组员分子生物学细胞周期研究生第14页五大类周期素中都含有由100～150个氨基酸残基组成保守区，称为周期素盒（cyclinbox），是与CDK相互作用活性区域。另外，还可含有降解盒（destructionbox）或PEST序列（脯-谷-丝-苏），可经过定时降解或快速转换来调整周期素水平。分子生物学细胞周期研究生第15页按周期素表示及作用细胞周期阶段不一样，可将其分为G1期（D、E）和M期（A、B）两大类。分子生物学细胞周期研究生第16页TheExpressionalLevelsofCyclinsduringCellCycle分子生物学细胞周期研究生第17页TheRelationshipofCyclinExpressionalLevelswithDNAReplication分子生物学细胞周期研究生第18页是指在G1期或G1→S期转换点发挥作用，并能开启细胞周期，促进DNA合成周期素。G1期周期素主要包含周期素C、D、E等，这些周期素通常在细胞周期G1期时活性升高，而在S期以后则逐步降至较低水平。2.1CyclinsduringG1Phase

分子生物学细胞周期研究生第19页周期素C：周期素CC-端存在一个PEST序列，其细胞内水平在G1期中点达高峰。分子生物学细胞周期研究生第20页周期素D：周期素D最少有D1、D2、D3三种亚型。周期素DC-端存在一个PEST序列；N-端含有一个与DNA肿瘤病毒转化蛋白共同次序Leu-X-Cys-X-Glu，是周期素D与p110Rb等蛋白结合所必需。分子生物学细胞周期研究生第21页不一样亚型周期素D在细胞内表示模式不一样，但主要是在G1期处于较高表示水平。分子生物学细胞周期研究生第22页周期素E：有E1和E2两种亚型，其细胞内水平在G1/S调控点达峰值。分子生物学细胞周期研究生第23页是指在G2→M期转换处发挥作用，诱导细胞分裂周期素，包含周期素A和B两类。这类蛋白在其N-端含有一个降解盒（destructionbox），在M期经过泛素（ubiquitin）路径降解。2.2CyclinsduringMPhase分子生物学细胞周期研究生第24页周期素A：包含三种亚型：A1、A2和A3。在细胞周期DNA合成之前出现，并不停增加，与开启DNA复制相关，主要在S期发挥作用。CyclinA3分子生物学细胞周期研究生第25页周期素B：周期素B在人类有两种亚型，B1和B2。周期素B水平改变主要由其降解速率来调控。周期素B在S晚期出现，在细胞进入M期之前，其水平呈线性增高，当到达一定阈值时，促使CDK激活；当细胞进入M期后，周期素B降解速率增加，水平骤然下降，CDK失活。分子生物学细胞周期研究生第26页3.StructureandFunctionofCDK大家对CDK认识，最初是经过研究培养细胞和酵母细胞而得到。当前已经确定CDK有：裂殖酵母中CdC2；酿酒酵母中CdC28、PHO85、KIN28以及人类细胞中CDK1～10。3.1TypesandCharactersofCDK分子生物学细胞周期研究生第27页CDKFamilyinHuman分子生物学细胞周期研究生第28页CDK分子量普通为35～40kD，不一样CDK氨基酸组成有40%以上同源性。经典CDK催化亚基活性中心约由300个氨基酸残基组成，当处于单体或非磷酸化状态时，CDK没有催化活性。分子生物学细胞周期研究生第29页MolecularStructureofCDK2分子生物学细胞周期研究生第30页CDK催化活性受到激活原因与抑制原因两方面调整。在激活原因中，当前认为CDK与周期素结合以及保守苏氨酸残基磷酸化是较为主要两种调整原因；而在抑制原因中，CDKN-端氨基酸残基抑制性磷酸化以及抑制蛋白结合是主要调整原因。3.2RegulationofCDKActivity分子生物学细胞周期研究生第31页

周期素激活作用：周期素中“周期素盒”结构域直接和CDK结合，并与CDK激活相关，周期素是CDK正性调整剂。周期素这两种功效是亲密相关，而这种结合与激活作用主要经过周期素在细胞周期中浓度波动来调控。3.2.1ActivationofCDK分子生物学细胞周期研究生第32页CyclinA-CDK2ComplexwithATPBound分子生物学细胞周期研究生第33页磷酸化修饰激活作用：CDK激活还必须依赖于其保守苏氨酸残基磷酸化，如在人CDK1（p34cdc2）Thr161和CDK2Thr160磷酸化，就与这两个酶激活相关。分子生物学细胞周期研究生第34页催化CDK1和CDK2磷酸化酶是CAK，该酶是一个寡聚体，其催化亚基为CDK7，调整亚基为周期素H，另需一组装蛋白因子MAT1以稳定结构。MAT1——CDK-activatingkinaseassemblyfactor1

分子生物学细胞周期研究生第35页ComplexofCDK7–CyclinH-MAT1CyclinHCDK7MAT1分子生物学细胞周期研究生第36页

磷酸化修饰抑制作用：在人CDK1和CDK2中，Thr14和Tyr15残基磷酸化可抑制CDK催化活性。其原因在于上述残基侧链位于该酶活性中心ATP结合部位顶端，因而对激酶磷酸化作用产生了妨碍。3.2.2InhibitionofCDK分子生物学细胞周期研究生第37页催化Thr14和Tyr15磷酸化是两种不一样蛋白激酶，使Thr14磷酸化为蛋白激酶Myt1

，使Tyr15磷酸化是蛋白激酶Wee1/Mik1。催化Thr14和Tyr15脱磷酸化是蛋白磷酸酶CDC25。所以，蛋白激酶Wee1和Myt1及蛋白磷酸酶CDC25相对活性，决定CDK1和CDK2活性高低。分子生物学细胞周期研究生第38页RegulationofCDKActivityCAK分子生物学细胞周期研究生第39页抑制蛋白作用：多年来，已分离并判定了若干能够与周期素-CDK复合物特异性结合并抑制其活性蛋白因子，这些蛋白因子被称为周期素依赖性蛋白激酶抑制蛋白（CKI）。大个别CKI都是抑癌基因编码产物。分子生物学细胞周期研究生第40页在哺乳动物细胞中，当前已经确定CKI主要有：P21WAF1/CIP1、P27KIP1、P16INK4和P15INK4B，可分别抑制各型CDK活性。分子生物学细胞周期研究生第41页P21WAF1/CIP1：是由抑癌基因WAF1/CIP1编码合成蛋白质，几乎能与全部周期素-CDK复合物结合，抑制其蛋白激酶活性，使细胞停留在G1期。分子生物学细胞周期研究生第42页P27KIP1：是由抑癌基因KIP1编码合成蛋白质，也能与几乎全部周期素-CDK复合物结合，抑制其蛋白激酶活性，使细胞停留于G1期。分子生物学细胞周期研究生第43页p27-cyclin-cdkcomplex分子生物学细胞周期研究生第44页P16INK4A和P15INK4B：是分别由抑癌基因INK4A/MTS1和INK4B/MTS2编码合成蛋白质，能专一性与CDK4和CDK6结合，并阻止其与周期素结合反应，从而抑制其蛋白激酶活性，使细胞停留于G1期。分子生物学细胞周期研究生第45页P53：由抑癌基因p53编码合成蛋白质，是WAF1/CIP1基因转录激活因子。所以，P53表示可促进P21WAF1/CIP1转录表示，从而抑制CDK蛋白激酶活性。分子生物学细胞周期研究生第46页FunctionofP53分子生物学细胞周期研究生第47页PRb：是由Rb抑癌基因编码合成蛋白质，有低磷酸化型和高磷酸型两种型式。低磷酸化型PRb可与转录因子E2F形成复合体，抑制其转录激活作用，阻止细胞分裂；而高磷酸化型PRb则不能与E2F形成复合体。催化PRb由低磷酸化型转变为高磷酸化型蛋白激酶就是各型CDK。分子生物学细胞周期研究生第48页分子生物学细胞周期研究生第49页Rbfunctionislinkedtoothertumorsuppressors分子生物学细胞周期研究生第50页细胞周期调控机制分子生物学细胞周期研究生第51页Smad3/4——Mothersagainstdecapentaplegichomolog3/4ATM——Serine-proteinkinaseATMATR——Serine-proteinkinaseATRSKP2——S-phasekinase-associatedprotein2SCF——Skip1-cullin/cdc53-F-boxproteinGSK3——Glycogensynthasekinase3HDAC——HistonedeacetylaseDP-1——TranscriptionfactorDp-1分子生物学细胞周期研究生第52页Chapter8CellApoptosis分子生物学细胞周期研究生第53页Section1Introduction分子生物学细胞周期研究生第54页细胞死亡也是一个主要生命过程。当前，经“细胞死亡命名委员会(NCCD)”确认细胞死亡类型最少有10余种。其中，由NCCD明确判定细胞死亡类型包含：细胞坏死(cellnecrosis)、细胞凋亡(cellapoptosis)和细胞自噬(cellautophage)。分子生物学细胞周期研究生第55页1.ConceptofCellApoptosis细胞凋亡（cellapoptosis）是指细胞自杀机制被活化而引发一个以细胞固缩为主要形态学改变程序性细胞死亡。细胞凋亡发生受凋亡相关基因调控。凋亡细胞形态学改变主要发生在细胞核。凋亡时，因为细胞膜保持完整，无内容物溢出，故普通不会引发炎症反应。分子生物学细胞周期研究生第56页分子生物学细胞周期研究生第57页2.MorphologicandBiochemicalCharactersofCellApoptosis凋亡细胞出现特征性形态学改变：染色质密集，呈边缘化；核固缩；DNA链断裂；出现凋亡小体。2.1MorphologicCharacters分子生物学细胞周期研究生第58页ProcessingofCellDeath分子生物学细胞周期研究生第59页ComparisonofNecroticwithApoptoticCellsnormalcellapoptoticcellnecroticcell分子生物学细胞周期研究生第60页ApoptoticCellandMacrophage分子生物学细胞周期研究生第61页凋亡细胞经典生化改变是将其基因组DNA进行琼脂糖凝胶电泳时，DNA片段表现为间隔180~200bp阶梯状条带。2.2BiochemicalCharacters分子生物学细胞周期研究生第62页3.PhysiologicalSignificancesofCellApoptosis细胞凋亡是多细胞生物生命活动过程中主要内容。细胞凋亡贯通于动物全部生命周期中，是确保个体发育成熟所必需过程。分子生物学细胞周期研究生第63页Section2GenesandTheirProteinsRelatedtoApoptosis分子生物学细胞周期研究生第64页1.CedGeneFamilyCed基因家族是线虫细胞凋亡相关基因，包含Ced-3、Ced-4、Ced-9等。其中，Ced-3基因编码产物与人半胱氨酸蛋白酶（如ICE）同源，Ced-4基因编码产物与人Apaf-1蛋白同源，Ced-9编码产物与人bcl-2有同源性。分子生物学细胞周期研究生第65页Ced基因家族表示产物中，Ced-3和Ced-4能促进细胞凋亡；而Ced-9能与Ced-3和Ced-4形成复合物并抑制其活性，从而抑制细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第66页RegulationofCedProteinsforCellApoptosis分子生物学细胞周期研究生第67页2.rprGenerpr基因是果蝇凋亡相关基因，该基因编码一个与FasDD结构域同源小分子多肽，以Fas介导凋亡类似方式激活ICE/Ced-3样蛋白酶，促进细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第68页3.bcl-2GeneSuperfamilybcl-2基因定位于人第18号染色体上，与线虫ced-9基因同源，能编码26kDBcl-2和22kDBcl-2两种蛋白。bcl-2基因为凋亡抑制基因，其表示产物是膜整合蛋白。分子生物学细胞周期研究生第69页Bcl-2（Bcl-XL）蛋白含有以下抗凋亡作用：能抑制线粒体PT孔（通透性转变孔）开放，降低Cytc和凋亡诱导因子（AIF）释放；能结合和灭活Apaf-1，阻断其对caspase-9活化；能特异地结合Cytc，阻止其诱导细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第70页现已发觉最少存在29个bcl-2基因同源物，它们在线粒体介导凋亡路径中起调控作用。Bcl-2蛋白家族组员都含有1~4个Bcl-2同源结构域（BH1~4），而且通常有一个羧基端跨膜结构域（transmembraneregion，TM）。分子生物学细胞周期研究生第71页普通说来，BH4是抗凋亡蛋白所特有结构域，BH3则是与促进凋亡相关结构域。所以，依据结构不一样，bcl-2家族组员中，有些含有抗凋亡活性，有些则含有促凋亡活性。分子生物学细胞周期研究生第72页依据功效和结构可将Bcl-2家族分为两大类：抗凋亡（anti-apoptotic）：如Bcl-2、Bcl-xL、Bcl-w、Mcl-1等。促凋亡（pro-apoptotic）：包含多结构域（如Bax、Bak、Bok）和只有BH3结构域（如Bad、Bid、Bim、Bik等）两种亚类。分子生物学细胞周期研究生第73页MolecularStructureofBcl-2ProteinFamily分子生物学细胞周期研究生第74页Bcl-2蛋白家族组员分子生物学细胞周期研究生第75页Bcl-2蛋白主要定位于线粒体外膜，可与促凋亡蛋白形成复合体，抑制其作用，因而含有拮抗促凋亡蛋白功效。而大多数Bcl-2家族促凋亡蛋白则主要定位于细胞浆，一旦细胞受到凋亡因子诱导，即可向线粒体膜转位。分子生物学细胞周期研究生第76页这些促凋亡蛋白经过寡聚化，在线粒体外膜形成跨膜通道；或者开启线粒体通透性转变孔（permeabilitytransitionpore，PT），促使线粒体内凋亡因子（cytc）释放，激活蛋白水解酶caspase，引发细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第77页Anti-apoptosisandPro-apoptosisEffectsofBcl-2RelatedProteins分子生物学细胞周期研究生第78页4.CaspaseGeneSuperfamily哺乳动物中存在白介素-1-转化酶（ICE）是细胞凋亡蛋白酶，与线虫Ced-3同源，都属于胱-天蛋白酶家族（cysteineaspartate-specificprotease，caspase）。这些蛋白酶是引发细胞凋亡关键酶，一旦被信号路径激活，能将细胞内蛋白质降解，使细胞不可逆走向死亡。分子生物学细胞周期研究生第79页Activesite:CysteineCleavagesite:Asparaticacid

CysteineAsparaticacidspecificproteaseAsp-Xxx天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶分子生物学细胞周期研究生第80页在人类细胞中已发觉13个ICE同源物，分为2个亚家族：ICE亚家族——包含caspase-1、4、5、11、12、13等，主要参加炎症反应；CED-3亚家族——包含caspase-2、3、6、7、8、9、10等，主要参加细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第81页TypesofICERelatedProteins分子生物学细胞周期研究生第82页当前已经判定caspase水解底物包含：多聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）；纤层蛋白（lamins）；caspase依赖DNA酶抑制蛋白（ICAD）；小核蛋白体蛋白（HnRNPproteins）等20各种。分子生物学细胞周期研究生第83页TheSubstratesofCaspases分子生物学细胞周期研究生第84页多聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）是一个与DNA损伤修复、基因完整性监护相关聚合酶，其作用是将NAD+分子中ADP转移到与DNA修复相关酶分子上，提升其催化效率。当细胞凋亡开启时，PARP被caspase剪切，造成受PARP负调控核酸内切酶活性增高，进而裂解核小体之间DNA，引发细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第85页纤层蛋白（lamins）属于中间纤维丝蛋白家族，参加组成支撑核内膜网架结构，同时对染色质定向和组织起作用。小核糖体蛋白（HnRNPproteins）则参加组成小核蛋白体，与hnRNA成熟加工相关。分子生物学细胞周期研究生第86页5.Apaf-1GeneApaf-1基因表示Apaf-1蛋白为凋亡酶激活因子-1（apoptoticproteaseactivatingfactor-1），与线虫Ced-4蛋白同源，在线粒体介导凋亡路径中起主要作用。分子生物学细胞周期研究生第87页Apaf-1含有3个不一样结构域：CARD（caspaserecruitmentdomain）结构域，能召集caspase-9；Ced-4同源结构域，能结合ATP/dATP；C端结构域，含有色氨酸/天冬氨酸重复序列，当细胞色素c结合到这一区域后，能引发Apaf-1多聚化而激活。分子生物学细胞周期研究生第88页Apaf-1含有激活caspase-3作用，而这一过程又需要细胞色素c（Apaf-2）和caspase-9（Apaf-3）参加。Apaf-1-细胞色素c复合体与ATP/dATP结合后，Apaf-1就能够经过其CARD结构域召集caspase-9，形成凋亡体（apoptosome），激活caspase-3，开启caspase级联反应。分子生物学细胞周期研究生第89页凋亡体形成分子生物学细胞周期研究生第90页凋亡体与caspase级联反应分子生物学细胞周期研究生第91页Fas基因，定位于人第10号染色体上，其编码产物为45kD跨膜受体，属于TNF受体家族。Fas受体（又称APO-1或CD95）分子结构可分为三个区，即含有三个富含半胱氨酸胞外区、跨膜区和含有死亡结构域（Deathdomain，DD）胞内区。6.FasandFasLGenes分子生物学细胞周期研究生第92页Fas胞内区DD结构域可与接头蛋白FADD（Fasassociateddeathdomainprotein）偶联，然后再经过FADD死亡效应结构域（deatheffecterdomain，DED）与Pro-caspase-8偶联，从而将胞外凋亡信号传递到细胞内。分子生物学细胞周期研究生第93页Fas分子结构DD——deathdomainDED——deatheffectordomainFADD——Fasassociateddeathdomain分子生物学细胞周期研究生第94页Fas与其配体（FasL）相互作用，是引发细胞凋亡主要路径之一。Fas与其抗体或FasL结合后，可快速激活caspase级联反应，裂解DNA，诱发细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第95页FasL基因定位于人第1号染色体上，主要在活化淋巴细胞表面表示，产生凋亡信号；也可在T细胞激活过程中被诱导表示。Fas与FasL协同表示，对胸腺中T淋巴细胞发育、分化与凋亡以及细胞毒活性起调整作用。分子生物学细胞周期研究生第96页7.IAPGeneSuperfamily细胞凋亡抑制因子（inhibitorofapoptosis，IAP）超家族组员较多，如c-IAP1，c-IAP2，XIAP，NIAP和Survivin等，新组员仍在不停被发觉。IAP家族组员有一个共同特征，含有一个或多个70个氨基酸重复序列（BIR），类似于zinc指状结构。c-IAP1、c-IAP2和XIAP还含有环指状结构域（RING）。分子生物学细胞周期研究生第97页MolecularStructureofHumanCellularIAPs分子生物学细胞周期研究生第98页BIR功效域和之间连接区域介导对caspase抑制作用，而环指状结构域（RING）则含有泛素化蛋白连接酶作用，介导caspase-3和-7泛素化降解作用。分子生物学细胞周期研究生第99页p53基因定位于人第17号染色体上，是一个多功效基因，其表示产物P53能在G1期监视DNA完整性。如有损伤，则抑制细胞增殖，直到DNA修复完成；如受损DNA不能修复，则诱导细胞进入凋亡程序。8.p53Gene分子生物学细胞周期研究生第100页P53作为一个转录因子，是Bax正调整因子，Bcl-2负调整因子。当细胞受到射线照射后，P53可快速上调Bax表示，从而促进细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第101页c-myc基因也是一个多功效基因，定位于人第8号染色体，编码分子量为62kD蛋白质。c-Myc蛋白位于细胞核内，含有转录因子活性，首先能激活控制细胞增殖基因，另首先也能激活促进细胞凋亡基因表示，故含有促进细胞增殖和凋亡双重效应。9.c-MycGene分子生物学细胞周期研究生第102页c-Myc与Bcl-2之间存在协同作用。Bcl-2能抑制c-Myc所致细胞凋亡，但不影响其促有丝分裂作用，即当生长因子存在、Bcl-2表示时，c-Myc促进细胞增殖，反之则细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第103页c-Myc蛋白作用机理与另一个转录因子Max形成异源二聚体相关。此复合物可与特定DNA序列相结合，发挥调整基因表示作用。已知这两种转录因子可形成Myc-Max和Max-Max两种不一样二聚体，但它们都能与同一DNA序列相结合，产生不一样调整效应。当缺乏生长因子时，更多形成Myc-Max复合物，从而诱导细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第104页ComplexesofMyc,MaxandMad分子生物学细胞周期研究生第105页RegulatingRolesofMyc分子生物学细胞周期研究生第106页Section3MolecularMechanismsforCellApoptosis分子生物学细胞周期研究生第107页当前已知，细胞凋亡可分为caspase依赖和caspase不依赖两种机制，而caspase依赖细胞凋亡又包含三种方式：受体介导细胞凋亡（外源通路）；线粒体介导细胞凋亡（内源通路）；内质网介导细胞凋亡（内源通路）。分子生物学细胞周期研究生第108页由存在于细胞膜上死亡受体介导，将外源性凋亡信号传递到细胞内，引发细胞调亡。常见死亡受体包含：TNFR、Fas、DR3、DR4、DR5等。1.1CellApoptosisMediatedbyDeathReceptor1.Caspase-dependentCellApoptosis分子生物学细胞周期研究生第109页ProcessofCellApoptosisMediatedbyDeathReceptor死亡受体与配体结合，使受体三聚化受体胞内DD区构象改变，与接头蛋白FADDDD区结合FADDN端DED区与caspase-8（或-10）前体蛋白结合，形成凋亡诱导信号复合体（DISC）分子生物学细胞周期研究生第110页caspase-8、10本身剪切激活，开启caspase级联反应caspase-3，-6，-7激活降解CAD抑制蛋白（ICAD/DFF-45），释放出caspase依赖DNase（CAD）降解DNA，引发细胞凋亡分子生物学细胞周期研究生第111页分子生物学细胞周期研究生第112页DeathReceptorApoptoticPathwayFADD（Fas-associateddeathdomain）；DD（deathdomain）；DED（deatheffectordomain）。分子生物学细胞周期研究生第113页1.2CellApoptosisMediatedbyMitochondria分子生物学细胞周期研究生第114页分子生物学细胞周期研究生第115页物理或化学凋亡信号激活Bax、Bad、Bid等促凋亡蛋白，线粒体PT孔开放或形成线粒体凋亡因子（Cytc等）渗透出线粒体ProcessofCellApoptosisMediatedbyMitochondria分子生物学细胞周期研究生第116页Cytc与Apaf-1及pro-caspase-9组成凋亡体caspase-9激活并开启caspase级联反应降解ICAD及细胞功效或结构蛋白，引发细胞凋亡分子生物学细胞周期研究生第117页MitochondrialApoptoticPathway分子生物学细胞周期研究生第118页1.3CellApoptosisMediatedbyEndoplasmicReticulum内质网在维持细胞内钙离子内环境稳定、膜蛋白合成、修饰和折叠等方面相关键性作用。Caspase-12位于内质网膜，是内质网应激诱导凋亡所必须。内质网应激造成Ca2+释放进入胞浆，激活Calpain（钙激活中性蛋白酶），水解并激活caspase-12，同时也造成caspase-7激活，最终造成细胞凋亡。分子生物学细胞周期研究生第119页分子生物学细胞周期研究生第120页Ask1——Apop