体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座

罗伯特·爱德华兹获诺贝尔生理医学奖罗伯特·爱德华兹首个试管婴儿路易斯.布朗路易斯.布朗25岁生日聚会体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第1页“代孕”体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第2页专题3

胚胎工程3.2

体外受精和早期胚胎培养体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第3页试管动物技术经过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并经过培养发育为早期胚胎后，再移植产生后代。概念生殖方式有性生殖体外受精+胚胎培养技术基础体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第4页体外受精其中包含哪几个关键步骤？1、卵母细胞采集和培养2、精子采集和获能3、体外受精胚胎培养4、胚胎早期培养体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第5页1、卵母细胞采集（1）几个采集方法（3）采集部位（4）详细操作过程（5）得到卵子可否能够直接收精（2）适用动物2、体外获能（3）使用培养液（1）几个获能方法（2）适用动物2、卵母细胞培养（1）培养到哪个时期1、精子采集（1）几个采集方法（2）详细操作过程体外受精（1）受精环境（2）受精要求胚胎早期培养（1）培养目标（2）培养液成份（3）培养后早期胚胎处理方式（4）不一样动物进行移植时间是否相同（3）精液为何要进行离心处理一组二组三组四组体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第6页采集方法采集部位适宜动物操作卵子可否直接收精

卵母细胞采集超数排卵法卵巢取卵法输卵管卵巢小鼠、兔、猪、羊大家畜或大型动物，如牛用促性腺激素处理，使其排出更多卵子，然后从输卵管中冲取卵子①已屠宰母畜卵巢中采集卵母细胞②借助工具，直接从活体动物卵巢中吸取卵母细胞采集卵子可直接参加体外受精采集卵母细胞，要体外人工培养成熟后，才能参加受精体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第7页精子采集采集方法适宜动物操作手握法电刺激法体型小，易控制家畜，如，猪、犬野生动物或经济动物麻醉动物，用特制电极伸入动物直肠，直接刺激射精中枢神经(腰骶部)无需设备，徒手或戴上橡胶手套，直接把握雄性动物阴茎，给予适当压力和刺激采取仿生学方法，模仿发情雌性动物阴道环境，满足雄性动物交配时对压力、温度和润滑度要求，同时配有活台畜或假台畜体型较大家畜假阴道法体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第8页获能方法适宜动物培养液啮齿类动物、家兔和猪等人工配制获能液牛、羊等家畜一定浓度肝素或钙离子载体中精子获能培养法化学诱导法体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第9页获能溶液或专用受精溶液精子和卵子普通要放在培养液小滴内共同培养一段时间才能完成受精

受精环境要求体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第10页

受精卵巢卵母细胞新鲜或解冻精液卵母细胞培养精液离心处理精子获能处理MⅡ期卵母细胞受精卵培养获能精子体外受精分离精子和精液培养法化学诱导法获能液/专用受精溶液体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第11页

体外受精哺乳动物卵子和精子在体外人工控制环境中完成受精过程技术概念基本原理人工模拟体内环境，（营养物质、PH、温度等）使卵母细胞成熟、精子获能，最终完成受精体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第12页受精卵移入发育培养液中继续培养，以检验受精情况和受精卵发育能力受精植入子宫×

？体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第13页受精卵应移入发育培养液中继续培养，以检验受精情况和受精卵发育能力胚胎早期培养原因和目标培养液成份无机盐与有机盐维生素、激素、氨基酸、核苷酸等血清胚胎后期操作向受体移植/冷冻保留体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第14页培养条件1、无菌2、适宜温度和PH值3、营养物质和激素体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第15页动物胚胎移植时间胚胎早期培养胚胎移植时间不一样牛、羊等小鼠、家兔等试验动物人桑椹胚或囊胚阶段桑椹胚或囊胚前阶段8－16个细胞阶段体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第16页澳大利亚海福特牛荷兰黑白花奶牛3万～5万1、价格昂贵，资金限制2、牛生育力低，一生只能生育4-5头体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第17页体外受精和早期胚胎培养技术应用快速繁殖优良品种体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第18页试管牛工厂化生产体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第19页采集良种母牛卵母细胞卵母细胞体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精良种牛体外受精胚胎胚胎移植受体牛良种犊牛成熟期牛屠宰加工厂市场采集卵巢中卵母细胞“试管牛”工厂化生产技术流程图体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第20页试管动物技术经过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并经过培养发育为早期胚胎后，再移植产生后代。概念生殖方式有性生殖+胚胎培养技术基础体外受精工业化生产意义实现优良家畜快速繁殖总结：体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第21页

试管动物与克隆动物相比生殖方式：技术伎俩：遗传规律：有性生殖无性生殖核移植技术、胚胎移植遵照无体外受精胚胎移植体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第22页及时巩固1、以下关于体外受精和早期胚胎培养说法错误是（）A、在体外受精前，要对精子进行获能处理B、精子和卵子普通要放在培养液小滴内共同培养一段时间才能完成受精作用C、受精卵在受精溶液中进行早期发育D、胚胎发育到适当阶段可进行冷冻保留C受精溶液区分：获能溶液受精溶液发育培养液体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第23页2、依据下列图回答卵细胞①●○○○×○○○●②③○○○○○○○④母体精子①所作处理为，②是，③是，④是。精子获能受精过程胚胎早期培养胚胎移植及时巩固体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第24页活体卵巢采卵法示意图体外受和早期胚胎培养医学讲座专家讲座第25页1、超数排卵法用处理，而非直接注射性激素。2、采集部位不一样：超数排