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文档简介
减数分裂的制片与观察演示文稿目前一页\总数三十一页\编于三点减数分裂的制片与观察目前二页\总数三十一页\编于三点
一、实验目的
1、观察染色体在减数分裂中的行为和变化,识别减数分裂各个时期特点,加深对减数分裂遗传学意义的理解;2、掌握动、植物减数分裂的制片技术。目前三页\总数三十一页\编于三点二、实验原理
减数分裂是性母细胞在配子形成过程中一种特殊的细胞分裂方式。在减数分裂过程中染色体只复制一次,而细胞却连续分裂两次,因此一个二倍体的性母细胞便形成为四个单倍体的性细胞。
高等植物花粉母细胞经减数分裂产生四个小孢子,染色体数目已减半为n。小孢子进一步发育为花粉粒。目前四页\总数三十一页\编于三点减数分裂过程1、间期(前间期)
2、减数第一分裂
3、中间期
4、减数第二分裂
前期I中期I后期I末期I前期II中期II后期II末期II目前五页\总数三十一页\编于三点
在适宜的时期采集植物的花蕾,经固定液杀死固定,使细胞保持活体时形态。然后进行压片染色等处理,在显微镜下进行观察,可以看到小孢子母细胞的减数分裂过程,研究染色体在形态和数量上的动态变化特点。目前六页\总数三十一页\编于三点三、实验用品实验材料:玉米(Zeamays2n=20)雄花序或小麦、蚕豆(Viciafaba
2n=12)花蕾、蝗虫(grasshopper初级精母细胞2n=22+X)精巢仪器物品:显微镜、水浴锅、镊子、解剖针实验药品:卡诺氏固定液、70%乙醇、改良品红或醋酸洋红。目前七页\总数三十一页\编于三点四、实验操作流程取材固定剥离花药染色压片镜检目前八页\总数三十一页\编于三点
1.取材:选取适当大小的花蕾,是观察花粉母细胞减数分裂的关键性步骤。不同植物取材时期不同。玉米:抽雄前两周(大喇叭口期),雄穗尖端露出以前7-10d时,先以手指挤摸穗尖的外部,觉得松软时在雄花序所在部位用刀片纵向划一切口,用镊子取出花序分枝。此时雄花序先端小穗颖长4mm左右,花药长2~3mm。每小穗中有两朵小花,各有花药3个。通常从一个分枝上从幼嫩的部位向较为成熟的区域混合制片。
小麦:孕穗期以后,旗叶抽出1~2cm,取出穗子。时间一般在上午9时~10时,不同材料间稍有差异。目前九页\总数三十一页\编于三点玉米大喇叭口期玉米小穗玉米雄花序目前十页\总数三十一页\编于三点小麦孕穗期小麦的小花实验中注意观察:每一分枝是中上部还是下部小穗发育最早?目前十一页\总数三十一页\编于三点2.固定:取下的材料应立即放入固定液中杀死固定。一般采用卡诺氏固定液,无水酒精:冰醋酸=3:1,一般固定4~24h。可用95%乙醇代替无水乙醇。如需长期保存,可先用70%酒精冲洗2次然后转入70%酒精中保存。注意:固定液时应现配现用,固定时不要在阳光下暴晒。目前十二页\总数三十一页\编于三点3、剥离花药取出保存的花序,吸去小穗过多保存液,置于载玻片中央,挑出花药目前十三页\总数三十一页\编于三点4.染色:在剥离的材料上滴加1滴染液,在室温下染色10~15min。目前十四页\总数三十一页\编于三点5.压片盖上盖玻片,在盖玻片上垫1-2层吸水纸,用一只手稳住载玻片和盖片防止滑动,另一只手用解剖针的针柄敲击盖片目前十五页\总数三十一页\编于三点6.镜检观察先用低倍镜观察,找到一个好的分裂相,再转用高倍镜观察。要求能够分辨减数分裂的各个时期,特别是能够独立辨认第一次减数分裂前期的各个时期7.观察永久制片
在显微镜下观察,并与自己的制片比较,掌握各个时期的特点。注意:怎样区分各个时期?目前十六页\总数三十一页\编于三点五、实验结果与分析1.绘出自己所制作片子的分裂相(3个以上时期),说明其时期和特点。2.分析自己制片操作过程中出现的问题及可能原因。目前十七页\总数三十一页\编于三点注意事项
爱护显微镜。一次取材不要太多。用过的载玻片必须刷洗干净,用过的盖玻片丢入垃圾桶,不得直接冲入水池。目前十八页\总数三十一页\编于三点减数分裂前期I细线期偶线期偶线期目前十九页\总数三十一页\编于三点粗线期双线期终变期中期后期后期目前二十页\总数三十一页\编于三点前期II中期II后期II末期II四分体小孢子目前二十一页\总数三十一页\编于三点目前二十二页\总数三十一页\编于三点玉米减数分裂中期I玉米减数分裂中期IIM1中期与M2中期的比较目前二十三页\总数三十一页\编于三点前期I细线期偶线期粗线期目前二十四页\总数三十一页\编于三点双线期终变期中期I目前二十五页\总数三十一页\编于三点后期I末期I目前二十六页\总数三十一页\编于三点前期II中期II目前二十七页\总数三十一页\编于三点后期II末期II目前二十八页\总数三十一页\编于三点取材及固定捕捉雄性蝗虫,直接投入到卡诺固定液中固定24小时,然后转到70%的酒精中保存。雌雄虫辨别(外观)雄性蝗虫虫个体小,雌虫较大;雌性蝗虫尾部有产卵瓣,雄虫无。目前二十九页\总数三十一页\编于三点解剖取出精巢:先将蝗虫翅膀剪去,在翅基部的后方,相当于腹部背侧的前端,用解剖剪将其体壁剪开,上方两侧的黄色团块就是精巢。精巢由许多排列在一起的精小管组成。将精巢取出置于一洁净的培养皿内,用蒸馏水洗涤干净。
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