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PAGE45动物营养学(讲义)研究生课程讲义动物营养学第二版王康宁四川农业大学动物营养研究所二OO二年十月目录第一章序言第二章动物营养研究方法概论第一节前言………………………1一.研究内容………………1二.研究方法………………1第二节化学分析法………………2一.饲料成分………………2二.动物组织和血液成分…………………2三.动物粪便及成分………………2第三节消化试验…………………2一.进展…………………2二.试验要点……………3第四节平衡试验…………………4一.作用…………………4二.能量平衡……………4三.N平衡………………7第五节饲养试验(生长效应法)………………7一.作用……………………7二.原理……………………7三.使用原则………………7四.试验设计的注意事项…………………7第六节试验技术…………………9一.同位素示踪及同位素稀释技术……9二.外科造瘘技术及吻合术……………9第三章饲料养分营养价值的评定第一节饲料蛋白质营养价值的评定……………11一.引言…………………11二.评定方法的历史回顾………………11三.AA生物效价的评定………………12四.反刍动物蛋白质质量评定新体系…………………15五.国际上推行的反刍动物蛋白质新体系……………17第二节矿物元素和维生素生物效价的评定……17第三节饲料能值的评定…………19一.概况…………………19二.饲料有效能的实测…………………19三.用可消化养分间接推算饲料有效能………………21四.根据饲料化学成分预测饲料有效能………………24第四章动物养分需要量的评定第一节能量需要量的测定………30一.反刍动物……………30二.猪能量需要量的确定………………32三.禽能量需要量的确定………………34第二节蛋白质和氨基酸需要量的评定…………35一.反刍动物蛋白质需要量的评定……35二.猪蛋白质、氨基酸需要量的评定…………………37三.禽的蛋白质、氨基酸需要量的估计………………43第三节维生素及矿物元素需要量的评定……51饲粮配合的技巧及示范……………….55一.饲粮配合的技巧……………………55二.饲粮配方试例………55三.可以添加合成氨基酸时的配方方法………………56四.合理确定维生素和微量元素添加量………………56饲料原料价格的合理估计方法……………………56一.估计方法的原理……………………56二.现在我们计算菜籽粕的适宜价格…………………57第一章序言一、动物营养学的目的、任务动物营养——动物摄取、消化、吸收、利用饲料中营养物质的全过程,是一系列化学、物理及生理变化过程的总称。它是动物一切生命活动(生存、生长、繁殖、产奶、产蛋、免疫等)的基础,整个生命过程都离不开营养;动物营养学——研究动物营养的科学;动物营养学的任务——研究动物对养分的需求、养分的作用及功能、饲料养分的利用效率——形成营养需要或饲养标准;动物营养学的目的——以最少的投入获得最大的产出——实现高效饲养。二、动物营养学研究的内容1、对营养物质的需求:需要什么营养物质,营养物质的作用及功能,营养不足带来的危害,、确定营养需要量的方法,营养需要量的确定及其影响因素。2、饲料营养价值的评定:饲料中含有哪些动物需要的营养物质,各种营养物质在体内的消化、吸收、代谢特点、效率及其影响因素。3、作为模型动物研究营养物质代谢及调控:从分子水平上(酶、激素和肽)研究营养物质代谢的基本原理及其调控——为医学、兽医学、营养学的研究提供基本的参数,为营养的调控提供新的途径和方法。4、向其它学科拓展:与其它学科相结合,如免疫学、微生物学、生态学等,使动物营养学能够协调的发展——拓展自己的研究领域。三、本课程主要讲授内容1、动物营养需要及需要量评定方法;2、饲料养分生物效价的评定及评定方法。四、主要参考书1.动物营养学讲义
2.动物营养学(杨凤主编,2001)
3.AnimallNutrition(Maynard,1979,)
4.NutritionrequirementsofPoultry(1994,第九版)
5.NutritionrequirementsofSwine(1998,第十版)
6.NutritionrequirementsofDairyCattle(2001,第7版)第二章动物营养研究方法概论第一节前言一、研究内容能值营养物质的需要量的评定蛋白质、氨基酸矿物元素维生素能值养分生物效价的评定蛋白质、氨基酸矿物元素维生素二、研究方法1.化学分析、物理测试综合法——饲养试验需要量析因法——平衡试验(屠宰试验)斜率法2.动物试验饲养试验——生长效应法平行线法三点法标准曲线法体内消化试验生物效价体外代谢试验生物效价的几种表示方法:1)表观、真实消化率2)表观、真实利用率3)表观、真实代谢率4)沉积率(扣除周转的净沉积)同位素示踪法3.外科造瘘无菌技术第二节化学分析法一饲料成分1.Weender法1860年,BeiGoettingenDM.GE.CP.EE.CF.NFE.Ash;2.VanSoest1967的纤维分析法CP.EE.OR.Ash.NDF(hemicellulose+cellulose+ADL)、ADF(cellulose+ADL);①NDF分析:100mlAD加1克样品NDF(中性洗涤液)=1升+30g12烷基硫酸钠+18.6克乙二胺四乙酸二氢钠盐+4.56gNa2HPO4+10mlα—乙氧基乙醇(或乙二醇乙醚)pH(6.9-7.1注意:过滤杯的孔径不要太小,粗孔40-50ml,孵化时加淀粉酶,便于过滤。5-10min煮沸,微沸一小时。②ADF分析:要用16烷基甲基溴化胺,易过滤,不必加淀粉酶,测定较NDF容易。3.矿物元素、维生素、脂肪酸、抗营养因子、重金属、霉菌毒素、药物残留。二动物组织和血液成分1.各种营养物质2.与营养物质有关的功能酶或相关酶以及由此引起的代谢中间产物的积累,尾产物减少,如:Se-GSH-px(glutathioneperoxidase),Zn-血清碱性磷酸酶,Cu-血浆铜蓝蛋白氧化酶,Mo-黄嘌呤氧化酶,B1-磷酸硫胺素(辅酶),B2-谷胱甘肽还原酶,生物素-血浆丙酮酸羧化酶,B6-转氨酶(血浆或红细胞中酪氨酸或天门冬氨酸)、血浆尿素N等。三动物粪便及成分(1)粪,主要是消化、代谢和平衡试验测能、氮、AA、钙、磷及其它矿物元素和维生素的效价及存留量。(2)尿、能、氮、AA、代谢产物。如:叶酸缺乏——古胺甲基谷氨酸(FIGLV)排泄增加(中间产物)烟酸缺乏——尿中N-甲基烟酰胺减少(尾产物)B6缺乏——尿中黄尿酸或犬尿酸的量增加(中间产物)第三节消化试验一、进展传统的全收粪法测DE、可消化养分→离体消化→瘘管技术(测AA消化率、蛋白质降解率)。体内消化尼龙袋离体消化全收粪指示剂瘤胃消化道消化液人工消化液小肠肛门回肠末端内源外源二.试验要点1.影响饲料养分消化率测定的因素:动物种类、年龄、性别、饲喂量、饲粮成分。2.动物选择:一般公畜。3.头数或只数:一般4头(只)以上,AA消化率可多到16--24只。4.预饲期和试验期的长短:取决于动物消化道食糜排空时间的长短。一般大动物长,小动物短;难消化的长,易消化的短。牛羊马猪家禽10—147-105-103-5天5.试验(或被测)饲料或日粮的准备(配合原则)取样均匀,干物质测定准确(注意测定时间),尽可能补充维生素、微量元素等,测氨基酸消化率可补充能量(葡萄糖)。在不影响试验的情况下,尽可能接近全价日粮需要营养水平。强饲饲料应粗一点,能通过20目即可,便于通过强饲管,缩短强饲时间。6.粪(便)收粪采用集粪袋,家禽肛门缝合中空的瓶盖,缝合时每针穿的皮肤要深(0.2cm)、宽(0.5-0.8cm)、密一点(4-5个固定点)。猪用皮带或布条固定,注意前腿前和后腿前两圈的固定,背中线,两侧,3根与集粪袋口3根线相连;集粪袋口用0.3cm粗的铁丝,做成直径为12-15cm的圆圈,必要部下凹,铁丝可用塑料包双层,以免铁丝擦伤尾部,长25-30cm,宽12-15cm,下部10cm或三角形。粪样按总量1/10-1/50取,每100g加10%的硫酸(盐酸)5-10ml固定N,甲苯数滴防腐。计算样品量时应扣加入H2SO4的重量和能量。家禽因粪便少可全部用作样品,尽量少用水洗粪袋,也可在粪袋中混交取50-80%样,以减少样品总量和干燥的时间。7.消化率计算方法①排空强饲法(收集40-48小时排泄物,强饲量为体重的3-5%)②顶替套算法③指示剂法8.顶替量一般30-50%,适口性很差的不低于15%。9.指示剂的回收率一般要求85%以上;内源指示剂注意饲料杂质和均匀度的影响。第四节平衡试验一.作用研究营养物质的收支平衡,获得需要量和利用率等基本参数。二.能量平衡研究能量代谢的方法(一)直接法直接测畜体产热,原理简单、设备仪器昂贵。1.绝热式:在水温4℃时1毫升水上升12.梯度型测热装置:测热的传导速率,即:dH/dt=λSL(T1-T0)λ:卡/cm.秒.℃S:室的表面积L:室壁厚度例子:阉牛每日的能量平衡(动物营养学教材表12-3),直接测畜体产热,粪、尿、皮屑、甲烷,增重都测其热量。表2-1阉牛每日的能量平衡(kJ)(引自Maynard,L.A.,1979)项目能量摄入能量支出6988g梯牧草(猫尾草)(timotyhhay)116065400g亚麻籽758116619g粪596214357g尿506537g皮屑脱落物368142g甲烷7937畜体产热48110机体增重2545合计123646123646(二)间接法1.原理:根据呼吸熵全脂氧化(克分子):C16H32O2+23O2=16CO2+16H2O产热10.033MJ全糖氧化(克分子):C6H12O6+6O2=6CO2+6H2O产热2.816MJ表2-2不同的呼吸熵所对应的耗O2和CO2生成的产热量(kJ)(引自Maynrad,L.A.,1979)RQ1LO21LCO21gCO20.7017.09628.00814.2590.7519.82826.43913.4600.8020.08725.10812.7820.8520.34723.93712.2130.9020.60222.89111.6520.9520.85721.95411.1751.0021.11721.11710.749表2-3根据24h的耗氧、二氧化碳生成量和尿氮估计产热(引自maynard,L.A.,1979)基础数据耗氧392L二氧化碳生成量310.7L尿氮14.8g蛋白质代谢数据蛋白质氧化量(14.8g×6.25)a92.5g产热(92.5g×18kJ/g)a1665kJO2消耗(92.5g×0.96L/g)a88.8LCO2生成(92.5g×0.77L/g)a71.2L碳水化合物和脂肪代谢数据耗氧(392L-88.8L)303.2L二氧化碳生成量(310.7~71.2L)239.5L非蛋白RQ(239.5/303.2)b0.79RQ为0.79时消耗303.2L氧产热6079kJ总产热(1665+6079)7744kJ注:a.每克蛋白质体内氧化产热18KJ,消耗0.96L和产生0.77L二氧化碳;b.当RQ为0.79时,每消耗产热是20.05KJ。例方程组:6O2+6CO2=2.81623O2+16CO2=10.033解方程组可求得每克分子O2产热0.3609MJ,每克分子CO2产热0.1084MJ。HP(产热·兆焦)=0.3609O2+0.1084CO2如果考虑蛋白质氧化和CH4:HP(产热)=3.866×O2+1.200×CO2+0.518×CH4-1.431×N(千焦)(升)(升)(升)(克)2.仪器(1)密闭式:全密闭,O2计量进入,废气抽出CO2、H2O经H2SO4和碱石灰吸收循环加热再进入。(2)开放式:进入的是加热(与室内平衡)的空气,废气抽出计量,一部分取样分析O2和CO2(也可扣CH4),然后与进入空气O2和CO2比较可算出O2、CO2的变化量。(3)面具式:原理类似开放式测热装置,根据进出气体O2和CO2的含量计算消耗的O2和呼出的CO2。例:根据24小时耗O2和CO2生成量及尿氮估计产热(动物营养学教材174页表12-5)。(三)C、N平衡法1.原理体内沉积是脂肪和蛋白质,根据每克脂肪和蛋白质的C、N含量和产热量可计算出沉积能,粪、尿、甲烷能可测得,从摄入饲料总能,就可计算出畜体产热。2.方法用呼吸装置测CO2和CH4产生量,并收集粪尿测C、N含量;然后根据每克脂肪含C76.7%,N为零,产热39.7KJ;每克蛋白质含C52%、N16%,产热23.8KJ,再从C、N沉积量算出沉积能。例:用C、N平衡法测饲料沉积能(动物营养学教材122页,表12-4)。表2-4用碳、氮平衡法估计饲料沉积能(g)(引自Kirchgessner,M.,1987)第一阶段(基础饲粮)CN第二阶段(基础饲粮+被测饲粮)CN饲料25001603600200粪6003570050尿100120130140CH4130-160-CO21570-2110-相差+100+5+500+10一、二阶段相差--+400+5沉积400gC和5gN其能量为:如果以每克C的脂肪产热51.83KJ,每克N的蛋白质比每克C的脂肪少产热19.40KJ,沉积400gC和5gN的能量可计算如下:51.83×400-19.40×5=20635(KJ)(四)屠宰法1.原理通过屠宰直接测沉积组织的能量,也可推算出畜体产热(维持)。食入能=粪能+尿能+皮屑能+甲烷能+沉积能+畜体产热2.测定方法屠宰不放血,心脏或静脉注入麻醉药和凝血剂。除去消化道内容物,冷冻、粉碎(胴体粉碎机),取样测组织燃烧热。凡是CH4产量较高的,用屠宰法估计的畜体产热不准确,应扣除CH4能。一些试验结果表明,此法测得值低于测畜体产热推算的沉积能,有可能是间接推算比直接测沉积能多了一些其它损耗如CH4、皮屑以及胴体多次处理测定带来的误差等。三.N平衡主要用于研究蛋白质的代谢。难在进食含N日粮时,维持N(内源N排泄)的测定,不同于维持能可直接测。用同位素稀释技术可以直接测定进食含N日粮时的维持N(内源N排泄),但方法有待完善,测定值还不太可靠。测定方法在消化试验基础上,增加尿N的测定,当然也可测机体沉积N,所以N平衡试验有时也包括屠宰试验。第五节饲养试验(生长效应法)一.作用综合评定养分的需要量和养分的相对生物效价(可利用性)。二.原理养分剂量变化对机体增重,组织被测养分含量及有关的各种理化指标,如胫、股骨强度,功能酶,代谢产物异常及缺乏症。三.使用原则1.用于需要量的确定有过量水平,生长快速期,即愈小愈敏感,当然要根据试验目的确定。2.评定效价(对比法),应低于最大需要量。四.试验设计的注意事项1.唯一差异原则除考察因素外,其它条件完全一致(血缘、性别、体重、年龄、健康、环境温度(局部有效温度)、空气流速及清洁度、饮水、光照、声响等,特别是饲粮组成中的各种对考察因子能产生影响的物质。2.考察因素水平间差异愈小,对条件的一致性要求愈高,重复数要求也愈多,即群体(样本)变大。各处理间和组内间的差异(由于试验动物本身及条件不一致所引起的误差)不能比考察因素产生的真实差异还大。即误差方差的均方与处理间的均方之比(F值)能达到显著标准为宜。因此,条件的控制的严格程度随试验考察因素效应大小(差异大小)而异。原则上是在保证能达到试验目的前提下,愈一致愈好,但太严了难于实现。表2-5方差分析示例:变差来源df平方之和均方F各培养液间5847.05169.4114.37**各培养液内24282.9311.79总的291129.983.随机分组动物随机(年龄、体重、血缘)分组,再随机到试验场地的具体位置(环境条件的一致)。4.常用试验设计方法①多用单因子设计,多做两个小试验比做一个大的复因子试验,即容易控制条件,试验结果也更令人信服,可靠。②在动物数量不多,体重差异较大的情况下,为了获得较满意的结果,除了用协方差分析,也可按配对试验的原理进行设计、检验(T检验),只是检验要麻烦一点。③慎用旋转通用组合设计考察因素的效果,有加性(叠加)作用的情况下较合理,如考察化学反应的温度、时间、酶(催化剂)。④群饲与单个饲养、任食与限食群食有利采食,但对死亡动物摄食的饲料扣除麻烦。单个饲养采食受影响,从而影响增重。但饲料消耗好统计。一般用生长效应确定氧分的需要量,采用任食;评定养分生物效价的消化和代谢试验用限食。5.纯合日粮与实验动物Sem-Purifieddiet ①作用(功绩):确定必需养分确定最低需要量毒性试验②优点:试验动物(小白鼠、大鼠)血缘纯、周期快、成本低(试验动物)。缺点:费用高,对饲粮纯度要求严。第六节试验技术一.同位素示踪及同位素稀释技术1.同位素示踪技术:标记跟踪物质的代谢过程、流向及流量。2.同位素稀释技术:标记机体物质代谢库,达到全身各部组织含有与标记同样的该物质的标记元素(物质)占该物质总量的比例相同。用于物质代谢速率的测定,内源排泄量的测定。但内源N或氨基酸的测定受肠道微生物和肠粘膜代谢的影响,有悖于稀释的原理。另因同位素用量大,有污染,一般采用稳定同位素N15。但测定稳定同位素需质谱仪。二.外科造瘘技术及吻合术1.作用用于养分消化率的测定,如过瘤胃(通过瘤胃微生物作用)的饲料蛋白的能量(回肠末端氨基酸)消化率的测定。2.方法①瘘管种类A.简单T型瘘管:可安放在瘤胃、十二指肠,测反刍动物饲料蛋白质的降解率;安放在回肠末端、盲肠测氨基酸消化率。缺点是食糜样品收集缺乏代表性。简单T型瘘管由于安装在回-盲瓣前后的位置不同,有多种形式和叫法。B.桥式瘘管:实际上是两个瘘管,一个让食糜流出,取样,取样后剩下的又从另一瘘管送回消化道。样品有代表性,但很繁琐。C.可操纵(可移动)回-盲瘘管术:是简单T型瘘管的衍生,即在与回盲瓣相对的对侧盲肠壁和相应的腹壁安一个瘘管,并导入一根尼龙线,线头系一个不锈钢圈,圈的直径比回盲瓣处回肠的内径稍大(约3-3.5cm),并置入回-盲瓣前的回肠内。在回-盲瓣交接处的肠壁外套一直径小于内环的不锈钢圈,放在内环与回盲瓣交接处之间。尼龙线另一头,通过瘘管,引出体外,即瘘管头外,并固定在瘘管头上,以免头缩回腹腔盲肠内。由集食糜烂时,拉紧尼龙线,使回-盲瓣紧贴在瘘管腹壁头端,食糜就可流出瘘管外。②回-直肠吻合术将回肠近端,回盲瓣前(5cm左右)切断,靠回-盲瓣端进行荷包缝合;然后将直肠距肛门的2/3-3/4处切断,将回肠断端与近肛门直肠断端吻合,直肠距结肠端同样用荷包缝合封闭,在结肠与直肠交接处肠壁切一口安装瘘管,排泄大肠残留的食糜。回肠与直肠吻合有端-端吻合,也有端-侧吻合,但以端-端吻合效果好,手术成功率高。瘘管也可在直肠近结肠断端直接安装。如果T型瘘管两翼太短,随着肠管的长大,瘘管易脱落。肠端开口易与腹壁粘合,如果大肠残留食糜已排空完,腹壁切口愈合后没有什么危险,对试验也无影响。回-直肠吻合术安装瘘管的另一作用是为了在手术头几周,灌注电解质容液。术后头1-2周对N、AA的消化率无影响,但对矿物元素的影响较大。第一周大多数矿物元素的消化率降低,有资料报导,钠、镁、锰消化率为负值,以后逐渐升高。但锌回升缓慢,到第五周,仍为负值。第三章饲料养分营养价值的评定第一节饲料蛋白质营养价值的评定一.引言蛋白质营养价值(质量)的评定一直是营养学研究的重点和热点。从1841年法国生理学家(FrancoisMagendie)发现明胶不能代替肉蛋白以来,营养学家一直没有停止过这方面的研究。但是,由于对蛋白质营养机理的正确认识本身就是一个漫长的过程,对其营养价值的认识和评定方法也经历一个漫长的进化过程,至到理想蛋白模式和可消化氨基酸的提出与实践,使蛋白质营养价值的评价,才真正实现了分子水平的需要和供给的较精确的统一。二.评定方法的历史回顾1.N与CP各种蛋白质含氮是15.5-18.0,平均取16,取N×6.25为CP。由于动物和消化利用的是氨基酸或肽的形式,而不是氮,所以平均乘6.25求得的CP也只是蛋白质及含氮化合物的量的一种表示形式,不是生物可利用值。2.DCP(DigestibleCrudeprotein)曾经盛行一时,因不能反映蛋白质是以氨基酸、肽消化吸收的实质,对于评定单胃动物饲料蛋白质的营养价值已无多大意义,但对反刍动物意义较大。3.BV(BiologioalValue)thomas(1909)提出,Michell(1924)修订4.NPU(Netproteinutilization)净蛋白利用率,BenderandMiller1953年提出,其原意为:5.NPV(净蛋白质Netprotoinvalue)NPV=食入N×NPU×6.256.PER(蛋白质效率比Proteinefficiencyratio)OsborneandMendel1919年提出,其定义为:PER=体增重/食入CP7.NPR(净蛋白比Netproteinratio)BenderandDoll1957年提出,其意义为:式中CP换成N即为NPU8.GPV(总氮价值Grossproteinvalue)9.RS(斜率比Sloperatio)HegstedandChang1965年以生长大鼠为实验动物,多用于测定人的食物蛋白质量。又称相对蛋白质价值(Relativeproteinvalue)。10.化学比分(Chemicalscore)MitchellandBlock1946提出,其实质是以一种优质的动物蛋白的第一限制氨基酸(如赖氨酸)含量为标准,被检饲料所含此氨基酸相当于它的百分比值。一般是以鸡蛋蛋白为标准。例如玉米蛋白含Lys为2.79、鸡蛋蛋白含Lys为7%,其玉米蛋白对于鸡蛋白的比分为:11.必需氨基酸指数EAAIEssentialaminoacidindex,Oxer(1951)。a:为被测蛋白必需氨基酸,猪为10,鸡为11。b:为标准蛋白必需氨基酸,猪为10,鸡为11。综上所述,上面的所有方法只能比较一种饲料或饲粮蛋白质的好坏。后两种方法虽反映了蛋白质氨基酸的质量情况,其表示方法仍无可加性,因此仍不能与需要量直接挂勾。在50年代确定了动物的必需氨基酸以后,结合限制性氨基酸,既可判别蛋白质量的好坏,也可与需要量挂勾。因此从总氨基酸进入可消化氨基酸,才真正实现了需要与供给较精确的统一。三.AA生物效价的评定可消化氨基酸、可利用氨基酸、有效氨基酸都属于AA生物效价,由于评定的方法不同,叫法有所不同,但实际都是以能否被动物消化利用为基础的。可消化氨基酸的最大优点是:1.抓住了蛋白质营养的实质,即以AA或肽的形式吸收和构建新的蛋白质。2.能够与动物的需要准确挂勾,而且使理想蛋白更具有实际意义。(一)DAA的测定1.猪由于大肠微生物干扰较大,使测定值偏多(略高10%),故均采用回肠末端收取食糜的方法。主要有以下几种方法;a.T型瘘管(simple-T-cannulas)-由Horszcaruk等(1972)首创,一般将瘘管安在回-盲瓣前3-10cm处。Laplace和Borgida(1976)、Darcy等(1980)认为回-盲瓣后安瘘管对猪生理影响较小。但Moughan和Smith(1987)认为两种T型瘘管对AA消化率的差异无显著影响。最大缺陷是必须用指示剂,因不可能收集全部粪尿,由此也带来取样缺乏代表性,而且较麻烦。b.桥式瘘管(重进瘘管)(r-entrantcannulas)1973年由Horszcaruk和Zebrowska首创。有以下几种形式:回-回桥式瘘管(ileo-ileo)回-盲桥式瘘管(ileo-caecal)瓣后回-结肠桥式瘘管(ileo-colic-post-valve)不同部位桥式瘘管测干物质消化率有差异(DenHartog等,1988)。Darcy等(1980)的研究表明,瓣后回-结肠桥式瘘管对荷术猪的生理影响较小,手术成功率较高。桥式瘘管的缺点是粪样(食糜)取后又要送回消化道,相当繁琐。c.回-直肠吻合术(ileo-rectalanastomosistehnique)1984年Pioard提出,后经演变,由于回-直肠断端的位置和结合方式的不同,又有以下几种形式。端-端吻合(end-to-end)端-侧吻合(end-to-side)但以端-端吻合手术成功率高些。一般在回盲瓣前切断回肠,在直肠与结肠交结处前的直肠部位切断。回-直肠吻合术的最大优点是收粪简便,而且可收集全部粪样。不足之处是手术较复杂,手术成功率相对较低,但也取决于技术的熟练的程度。术后对猪的护理也较麻烦。d.可移动(可操纵)的回-盲瘘管术(steeredileo-caecalvalve)Morz(1989)提出,手术具体作法前已叙及。此法的最大优点是手术简单,荷术猪生理影响小。不足之处仍需指示剂。上述各种方法的测值并无太大的差异,加上AA分析测定的误差本身较大,所以很难说那一个方法测值最准确。目前主要是看那种方法最简便,包括取样手术和对术荷猪的影响。相对说来,回-直肠吻合术还较可取,虽手术麻烦,但粪样(食糜)收集简单,而且可做到有代表性。2.禽禽饲料氨基酸消化率的测定相对较简单。因禽大肠较短,而且主要是盲肠,所以不必安装瘘管。为减少盲肠的影响,可切除盲肠。但大多数饲料切除盲肠与否对AA消化率无显著影响,只少数饲料,如肉骨粉等切除盲肠AA消化率降低。关于切不切除盲现有争议,一些人认为盲肠在氮代谢中对尿中尿酸的二次利用以及对消除NH3的不利影响有重要作用。未经小肠吸收的氨基酸和短肽也可为盲肠微生物充分利用,因此不宜切除。但盲肠切除与否对大多数饲料AA消化率无影响,盲肠对AA的吸收只有在通过其颈部时才存在极有限的吸收。而且切除盲肠主要是减少微生物的影响,因此切除盲肠只是测定少数饲料(如肉骨粉等)的AA消化率可能更准确,对于大多数饲料切与不切影响不大。由目前AA分析仪的测定值误差较大,必然会影响到饲料氨基酸的消化率测值的准确性,一次试验测得的值很难说准确、可靠,一般取平均值较合理。(二)内源氨基酸的测定方法氨基酸真消化率的准确测定关键在于内源氨基酸的准确测定,特别是近似正常含氮日粮情况下内源氨基酸的准确测定至今还没有理想的方法。1、传统方法饥饿法无氮日粮法回归法2、胍基化法(同型精氨酸法)(Moughan等,1990)原理:该方法通过将日粮中的赖氨酸全部胍基化后转变为同型精氨酸,消化道内的赖氨酸全部为内源氨基酸。同型精氨酸吸收进入机体后可降解成赖氨酸参与机体蛋白质合成,而不影响机体赖氨酸的需要。家禽由于体内缺乏将同型精氨酸转变为赖氨酸的酶,所以导致尿液中有大量的同型精氨酸排出,影响该方法的应用。胍基化其它氨基酸,影响消化率饲喂胍基化蛋白日粮采食量下降胍基化不完全,影响计算准确性。3、酶解酪蛋白(EHC)/超滤法(Darragh等,1990)原理:以EHC作为唯一氮源,假定分子量(MW)<10KDa可完全被吸收,食糜中排出的N和AA全部为内源。不足处:MW<10KDa作为完全吸收标准证据不够充分。食糜中含有MW<10KDa的内源含N物占总含N的10-27%4、同位素标记法原理:(1)标记饲料(Vanleeuwen等,1994)食糜外源N/食糜总N=食糜N15丰度/饲料N15丰度食糜内源N=食糜总N-食糜外源N。不足:随食入后时间的延长(7-8h),饲料N经再循环进入消化道。(2)内源物标记(动物标记)(deLange等,1990)原理:血液15N-Leu/血液总Leu=食糜15N-Leu/食糜内源总Leu食糜15N-Leu食糜内源总Leu=×血液总Leu血液15N-Leu不足:(1)N和AA前体池的存在与否及稳定性(2)肠粘膜利用微生物合成的AA合成蛋白质,并分泌进入肠道,影响其内源N及AA的测定。(3)一次性注射少剂量3H-Leu(姚军虎,2000)原理:根据稀释原理,注射后一定时间,下式可能成立或近似相等。食糜3H-Leu丰度(内源)血液3H-Leu丰度=食糜中Leu血液中Leu不足:等式成立的时间难确定准确5、差量法(Ammerman,1957)原理:假设在动物进食正常日粮粗蛋白范围内,内源氮或内源AA的排泄量不随日粮CP水平的升高而变化或者变化很小可忽略不记,下式成立。前后两次食入量之差-前后两次排泄物之差真消化率=前后两次食入量之差内源N或AA=食入N或AA×(真消化率-表观消化率)不足:内源N或AA排泄量较稳定或变化很小的日粮CP水平范围的确定较困难。(三)有效赖氨酸的测定1.原理主要是基于美拉德氏或褐变反应(Maillardorbrowningreactiong)反应后还原糖与肽链中的ε-NH3结合,使胰蛋白酶无法切开,从而不能被消化吸收,如果糖-赖氨酸、半乳糖-果糖-赖氨酸。因此,有多少游离的ε-NH3能够被定量测出,就能确定有多少仍可被利用的(有效的)赖氨酸。2.方法(1)二硝基氟苯(FDNB)法Carpenter,1957年提出,FDNB与游离的ε-NH3结合,生成ε-DNP-赖氨酸,此物再与氯甲酸甲酯络合成可溶于醚的衍生物,再用石油醚提取,然后分别比色测定标准液(E标)、A、B对照管(EA、EB)的消光系数,最后计算:此法的不足之处是水解24小时,碳水化合物可破坏生成的ε-DNP-Lys。为此,KakadeandLiener(1969),提出了改进的TNBS(三硝基苯磺酸)法,此法较简单,只水解2小时,但碳水化合物干扰更严重,而且TNBS属危险化学试剂,不易购得。(2)染料结合法(Dye-bindingmethods)染料有茚三酮、酸性橙-12(A0-12)、金橙Ⅱ、指示剂-Ⅰ。先用丙酸酐将ε-氨基掩蔽,再与染料结合(染料可与赖、组、精等碱性氨基酸结合),然后与直接用染料结合的样品的吸光度之差,即可算有效赖氨酸的量,即用丙酸酐掩蔽的量。四.反刍动物蛋白质质量评定新体系(一)新体系产生的背景(原因)反刍动物蛋白质质量的评定一直是一个难题,由于瘤胃微生物的作用,使饲料蛋白质通过瘤胃后面目全非,以往用可消化蛋白或酸洗涤不溶氮AND(aciddctergentinsolublenitrogen)来衡量其质量的好坏,显然不能反映反刍动物蛋白质消化代谢的实质,而不能准确地指导饲养实践。具体说有以下几点不足:1.不能反映日粮CP在瘤胃中的降解和非降解部分;2.不能反映日粮降解蛋白转化为瘤胃微生物蛋白的效率及合成量;3.不能反映进入小肠的日粮非降解蛋白质和微生物蛋白质的量、氨基酸的量及其真消化率。简单说反映不出进入小肠的真可消化蛋白的质量。(二)新体系的核心和实质核心是饲料蛋白质降解率的测定。实质是将所需CP分为微生物需要CP和宿主需要CP两部分。(三)饲料蛋白质降解率的测定1.体内法(1)同位素标记结合瘘管技术原理:十二指肠非氨氮的测定——安装瘘管微生物氮测定——用同位素标记内源氮测定——估计、实测困难(2)增量法(回归法)基础日粮(能满足微生物氮需要)+不同水平的待测饲料(保持TDN相当),然后以十二指肠非氨氮对待测饲料摄入作回归直线,根据回归直线斜率可计算降解率。2.尼龙袋法(自然位置法)原理:但在实际测定中,饲料中有一部分是速溶的,可不经微生物作用就很快降解,而非速溶部分在微生物作用下,逐步降解。由于瘤胃内降解后又不断在排出,所以外排速度又影响到降解速度;所以在一定时间内的降解率可用下面两式表示:①不考虑外排速度②考虑外排速度随T增加(1-e-(c+k)t)趋于1,故有:a:可溶性蛋白消失量(率)常数b:为降解速率,单位时间能降解多少c:为b的降解速率常数t:孵化时间k:外排速度由于在降解过程中饲料颗粒大小也影响降解速度,所以可进一步考虑大颗粒降解为小颗粒的速度(k2),小颗粒排出瘤胃的速度为k1,则有:NRC(2001)奶牛的标准对饲料中RDP及UDP提出了如下的估计方案。总粗蛋白质总粗蛋白质酸性洗涤剂硼酸缓冲液中性洗涤剂酸性洗涤剂硼酸缓冲液中性洗涤剂可溶AB1不可溶B2B3可溶AB1不可溶B2B3可溶AB1B2B3可溶AB1B2不可溶B3C不可溶CRDP=A+B1(KdB1/(KdB1+Kp))+B2(KdB2/(KdB2+Kp))+B3(KdB3/(KdB3+Kp))RUP=B1(Kp/(KdB1+Kp))+B2(Kp/(KdB2+Kp))+B3(Kp/(KdB3+Kp))+CKd为潜在降解组分B的降解速率(%,h)KP为外排速率(%,h)RDP=A+B(Kd/(Kd+Kp))RUP=B(KP/(Kd+KP))+C在用尼龙袋技术测定饲料降解率要考虑表中所列因素:项目推荐饲粮类型与测定值使用的条件一致,提供原料组成和化学成分(至少应包括DM、CP、NDF和粗灰分)饲喂水平与测定值使用的条件一致,报告DMI和瘤胃pH值饲喂频率自由采食;如果DMI不是自由采食,则每天饲喂2次用于评价的原料化学成分至少提供饲料DM、CP、NDF和灰分含量的数据物理特性经过加工的原料要予以特别说明(如蒸汽压片,密度0.39kg/L;加热150℃,3h等)取样过程2mm筛孔(Wiley粉碎机)尼龙袋材料聚脂纤维孔径40-60μm培养过程动物数量2头,标明体重试验时间2d重复数1预先浸泡推荐的瘤胃中的位置瘤胃底部放入/移走同时培养时间(h)0,2,3,8,16,24和48(粗料时还包括72),提供0时间点的洗涤消化率,以便能够计算延滞期润洗洗衣机洗涤(5次,每次洗涤1min)标准底物按推荐进行微生物校正视需要情况而定数学模型非线性模型3.体外法①溶解度法,缓冲液或者0.15M②瘤胃液孵化法,39℃③酶解法、注意pH、孵化时间、温度、酶饱和条件及缓冲液组成。五.国际上推行的反刍动物蛋白质新体系1.英国降解(RDP)和未降解蛋白(UDP)体系1977年由Rog等提出,1980年由ARC公布,1984年和1992年由ARC作了两次修订(AgricaltureandFoodResearchCouncil)。采用的校正外排速度的尼龙袋法。2.法国小肠可消化蛋白体系(PDC)1978INRA(InstiturdelaRechercheAgronomique)公布,1988年作进一步修订。用体外法测定的,不需校正外排速度。用能量计算的小肠可消化蛋白质为PDIE,根据降解氮计算的小肠可消化蛋白质是PDIN。3.瑞士的小肠可吸收蛋白质体系(简称API体系)由Landis(1979)在法国的PDI体系的基础上提出。4.北欧的小肠可吸收氨基酸(AAT)和瘤胃蛋白质平衡(PBV)体系用尼龙袋法测定,由Madsen(1985)提出。5.美国吸收的蛋白质体系降解,采用((RDP)和未降解蛋白(UDP)),用校正外排速度的尼龙袋法。由NRC于1985年公布。1989年NRC奶牛营养需要已采用。6.前西德的十二指肠粗蛋白体系,1986年Rohr等人提出。7.澳大利亚的离开真胃的表观消化蛋白质体系,由AAC(1990)公布。8.荷兰的小肠可消化蛋白质体系,于1991年公布。9.中国的小肠可消化蛋白质体系1985年发表了建议,于1991年通过了部级验收,1994年通过部级专家组鉴定。这些新体系的共同特点是以小肠蛋白质为基础,包括瘤胃非降解蛋白质和微生物蛋白质。表3-1列出了八个国家新体系的有关参数,可以推知动物对饲料蛋白质的需要,或者饲料可提供的有效蛋白量。表3-1各新体系所采用的参数参数新体系英国法国德国北欧美国澳大利亚荷兰中国微生物粗蛋白/日粮降解粗蛋白微生物粗蛋白/可消化有机物质微生物粗蛋白/MJ代谢能微生物粗蛋白/可消化碳水化合物微生物粗蛋白/可发酵有机物质微生物真蛋白/微生物粗蛋白微生物真蛋白的消化率日粮非降解蛋白的消化率体组织蛋白(氨基酸)/吸收的氨基酸维持产奶生长产毛由于各国的研究条件和方法有所不同,故这些参数不完全一致,有的甚至相差很大(表1),例如用饲料可消化有机物质去估测瘤胃微生物蛋白质合成量,各国参数的变化范围为95-165克微生物蛋白质/千克可消化有机物质。因此应立足于本国的研究或有分析的借用。6.进入小肠(十二指肠)AA量的预测RUPLys(全部饲粮RUP提供Lys的量)=∑f(DMIf×CPf×RUPf×LysF×0.001)Y(AA占十二指肠CP(MCP+RUP+内源CP中EAA的%))=a+bx1+cx2x1:AA占RUP中EAA的%x2:RUP占十二指肠CP的%MCP+内源Lys=Lys总流量RUPLysLys总流量:十二指肠CP中总的Lys(g),RUPLys,经校正的RUP中的Lys总EAA:y=30.9+0.863x1+0.433x2(RMSE=58.8)Y,十二指肠CP中总的EAA(g);x1,RUP提供的EAA(g);x2,MCP(g)第二节矿物元素和维生素生物效价的评定矿物元素和维生素生物效价的评定,一般都是测相对效价。测定的指标多是组织中的含量,功能酶的活性,代谢的中、尾产物、缺乏症等指标。所以不同的维生素、矿物质测定的指标不同。但一般都是用生长效应法,结合统计方法,如前所述的斜率比法、平行线法、三点法和标准曲线法,因此属相对效价,故又称相对法。很少采用消化代谢试验直接测消化率、代谢率。大量元素Ca、P可考虑直接测消化率。微量元素因内源周转占的比例大,直接测表观消化率意义不大。测真消化率内源扣除较麻烦,一般用同位素标记。(1)Ammerman等1957年提出用差量法测磷的真吸收率(真消化率)。其原理是:TPI1、TPI2分别为前后两次摄入的磷。TFP1、TFP2分别为前后两次总的粪磷。由上式可知,此法是假设在一定磷的摄入量范围内,内源磷的排泄量不变,前后两次摄入磷之差(TPI2-TPI1)减去前后两次粪磷之差(TFP2-TFP1)。扣除了内源磷的多摄入磷的净吸收量,再除以前后两次多摄入的磷量(TFP2-TFP1)即为多摄入的磷的真消化率,可代表整个摄入磷的真消化率。此法的前提是前后两次喂给动物磷源的消化率是相同的,或磷源组成的模式相同,同时内源磷的排泄不受前后两次摄入磷差异的影响。Hintzt等(1973)和Blaney等(1981)用此法测得马粪中镁的最低内源排泄量为每天每千克体重2.2mg。Blaney(1982)用此法测得牛内源镁的排泄量为每天每千克体重3.0mg。此法也可偿试用于氮和氨基酸内源排泄量的测定。(2)饲料有效磷的预测有效磷一般指动物可利用磷,可用非植酸磷、可消化磷等表示。表3-2估计植物性饲料有效磷的方法有效磷计算模型来源时间总磷—植酸磷数据库19970.371植酸磷+(总磷—0.817植酸磷)刘金旭1982总磷(81.7—44.6植酸磷/总磷)苏琪1984总磷(73.33—81.42植酸磷/总磷)孙长春1990饲料中可消化磷与总磷、植酸磷和植酸酶有高度相关,可建立预测可消化磷的模型。饲料分类建立模型可提高其预测的准确性。因为不同饲料所含总磷、植酸磷与植酸酶的量不同,糠麸、糟渣类饲料的植酸磷、植酸酶对可消化磷的贡献大于谷物及饼粕;经高温处理的饼粕类饲料,植酸酶破坏、植酸磷的利用率降低;饲料总磷含量与有效磷的相关性最高。饲料可消化磷预测模型不分类Y=-0.220+0.589X1-0.304X2+0.003X3R2=0.882(四川农大,2004)不分类(去掉菜粕和棉粕)(n=19)Y=-0.931+0.527X1+0.269X2+0.00064X3R2=0.962(四川农大,2004)谷实类(n=8)Y=0.455+0.169X1+0.0602X2+0.0043X3R2=0.874(四川农大,2004)
谷实类副产品(n=6)Y=-1.635+0.301X1-0.219X2+0.0225X3R2=0.999(四川农大,2004)
饼粕及豆类(n=5)Y=3.411-0.0031X1+0.176X2-0.006X3R2=0.796(四川农大,2004)(X1=总磷X2=植酸磷X3=植酸酶)表3-3不同饲料类型建立的真可消化磷预测模型的R2与RSD值比较(%,g/kg)变量及个数回归方程R2RSD不分类(n=21)一元总磷0.8050.504植酸酶0.501.356二元总磷+植酸磷0.8590.386总磷+植酸酶0.8560.393植酸磷+植酸酶0.6171.049三元总磷+植酸磷+植酸酶0.8820.244去掉菜粕和棉粕(n=19)三元总磷+植酸磷+植酸酶0.9620.109谷物类(n=8)一元总磷0.9620.120植酸酶0.8570.063二元总磷+植酸磷0.7710.120总磷+植酸酶0.8730.067植酸磷+植酸酶0.8670.070三元总磷+植酸磷+植酸酶0.8740.083谷物类副产品(n=6)一元总磷0.980.221植酸酶植酸酶0.820.961.6730.034二元总磷+植酸磷0.9930.097总磷+植酸酶0.9990.013植酸磷+植酸酶0.9860.197三元总磷+植酸磷+植酸酶0.9990.011饼粕及豆类(n=5)总磷0.5650.525植酸酶0.6380.435总磷+植酸磷0.5940.773总磷+植酸酶0.7880.038植酸磷+植酸酶0.7960.368总磷+植酸磷+植酸酶0.7960.734第三节饲料能值的评定一.概况对饲料中有效能评定的认识较蛋白质早。1809年德国的Darie(1752-1828)就提出了干草价(当量),以每千克干草为标准评定饲料的单位。1872年Fjord提出了北欧饲料单位,1874年作了修订,后改为大麦单位;1913年瑞典的Hansson,1931年丹麦的Frederkson作了进一步修改,并定义每千克大麦的肥育净能为1650Kcal,产奶净能为2100Kcal。Wolff(1874)提出了可消化养分,后来Wolff和Lehmann提出了TDN的计算公式。最初可消化粗脂肪的系数是2.4,10年后美国的工作者将其改为现在的2.25。1917年Armsbe提出了净能体系;Armsbe的净能体系是用呼吸测热仪测定维持需要。1900-1905年Kellner提出了淀粉价或淀粉单位,以每千克淀粉的脂肪量(248克)为一个淀粉价或1000淀粉单位(StE)。近年流行的体系有美国加洲的肉牛净能体系(Lofgren和Garrett,1968),NRC(1978)的产奶净能体系,荷兰A.J.HVanes(1979)提出的欧洲产奶净能体系以及英国的ARC体系(1965)。二.饲料有效能的实测通过消化和代谢试验测定DE和ME已较熟悉,不再过多赘述。注意禽的氮校正代谢能(MEN)。部分学者认为,沉积氮在家禽的代谢过程中,是以尿酸的形式排出,每克氮的尿酸产热是34.4KJ(HillandAnoderson)或者36.5KJ(Titus),因此测定ME能应校正零氮平衡,即每沉留1克氮应扣除34.4或36.5KJ的能量。下面介绍几种净能的评定方法:1.Kellner的淀粉价(StE)或淀粉单位(SE-stardequivalent)Oscarkellner(1851-1911)在1990年就提出了StE,德国沿用至今。为纪念OscarKellner德国Rostocker的营养生理代谢实验室以OscarKellner命名。StE(1000StE=1个淀粉价)是以1千克淀粉(又称可消化淀粉)沉积248克脂肪为1000个StE,饲料的几大供能成分对于肥育牛的贮脂力、StE当量以及净能如表2所示。表3-4饲料成分对于生长肥育牛的净能1g可消化物质NEKcalKJgFettStEStarch2.369.870.2481.00CP2.229.290.2340.94EE粗饲料、块根4.5018.830.4741.91新鲜籽实5.0020.920.5262.12油饼5.6823.770.5982.41NFE*2.369.870.2481.00CF2.369.870.2481.00Sugar1.797.490.1880.76*:对于产奶、NFE不是1而是0.76个StE由于粗纤维含量的不同,按可消化成分算出的StE量应减去粗纤维增加的校正值。随粗纤维含量的增加校正值增加,详见表3。表3-5粗饲料和青绿饲料的粗纤维校正系数每克粗纤维StE的扣除数干草、粗饲料0.58青绿及青贮饲料新鲜基的CF含量(%)干青绿饲料的干物质基础CF含量(%)≤4≤220.294.1-622.1-240.316.1-824.1-260.348.1-1026.1-280.3810.1-1228.1-300.4312.1-1430.1-320.4814.1-1632.1-340.53>1634.1-360.58注:对于谷物籽实按表2计算出的StE应打0.95的折扣。表3-6燕麦StE的计算每kg燕麦含量g消化率%可消化物质g系数StECP11083910.9486EE4791432.1291CF10233341.0034NFD596784651.00465676校正StE=676×0.95=642表3-7开花后抽穗前的牧草每kg燕麦含量g消化率%可消化物质g系数StECP3677280.9426EE85641.918CF4278331.0033NFE8081651.0065132扣除CF校正42×0.31=13-131192.维持净能(NEm)、生长净能(NEg)、产奶净能(NFl)、产脂净能(NEf)的测定NEM一般用间接或直接测热法测定,也可用平衡试验或屠宰试验测出沉积能再推算NEM。通过平衡试验的原理,NEM测出后也可推算出NEP(NEG、NEL、NEF)。除NEM外,NEP目前大都是类似StE的方法,实测或从可消化养分间接推算的。NEM一般用每千克代谢体重需多少能量表示的,可转换成MEM或DEM。三.用可消化养分间接推算饲料有效能这种方法不是直接用摄入总能扣粪能实测得,而是建立DE或ME和NE与饲料可消化的CP、EE、NFE、CF等的回归公式来预测饲料DE、ME和NE。由于仍需测消化率,故采用的不多。1.猪①DE:用中、酸性洗涤纤维先估计能量的消化率,再乘以总能即为DE。消化率(%)=93.83-1.75×ADF%消化率(%)=100.77-1.19×NDF%②MEBFS(KJ/kg干物质)=21×DCP+37.4×DEE+14.4×DCF+17.1×DNFE-1.4×sugar*-6.8×(BFS-100)***当每千克干物质suger含量≥80g时才扣除**当DCF+DNFE-Starch-Sugar超过100的部分才扣除。表3-8例:糖蜜渣的MEBFS成分粗养分g/kg消化率%ME的系数MEMJ/kgCP1124521.01.06EE74637.40.12CF1568314.41.86NFE6479017.19.96Sugar210Starch0校正sugar210-1.4-0.29校正BFS(502-100)-6.8-2.73校正MEBFS9.98BFS-BacterialFermentationSubstance③NERostocker的净能体系(NEF)(Nehring1969)。NEF(KJ/kg)=10.7×DCP(克)+35.8×DEE(克)+12.4×(DCF+NFE)每克双糖(disaccharid)扣0.63KJ,每克单糖(monosaccharid)扣1.26KJ,每克乳蛋白加4.2KJ:每克乳脂扣4.2KJ。表3-9例1kg甜菜切块对于猪的产脂NEF可消化养分g/kg系数KJ/gNEFKJCP2410.7257EE035.80CF5012.4620NFD68212.48457合计9334校正糖528-0.63-333校正后值9001EF614.4EF为猪的产脂净能单位,每单位为14.65KJ, 9001/14.65=614.402.禽禽一般是ME或MEn,但也有用净能的。MEn(KJ)=18.3×MCP+38.8×MEE+17.3×MNFE式中CP、EE、NFE前的M表示可代谢的意思。3.反刍动物美洲一般只用可消化养分用TDN估计各种净能(NE),而欧洲是ME、NE和SE。在此主要介绍几个用可消化养分估计有效能的体系。(1)TDN-可消化总养分(NRC,1989)TDN(kg/kg)=DCP+DCF+DNFE+2.25×DEETDNFC=0.98×(100-(NDF-NDICP)+CP+EE+Ash)×PAFTDCPf=CP×exp(-1.2×(ADICP/CP))TDCPC=(1-(0.4×(ADICP/CP)))×CPTDFA=FA如果EE<1,则FA=0TDNDF=0.75×(NDFn-L)×(1-(L/NDFn))×0.667对于动物性蛋白饲料:FDN=TDCP+FA×2.25+0.98×(100-CP-Ash-EE)-T对于含甘油的脂肪:TDNIX(%)=(EE×0.1)+(FA消化率×(EE×0.9)×2.25)对不含甘油的脂肪:TDNIX(%)=EE×FA消化率×2.251磅TDN(玉米)≈1McalNE1磅TDN(优质干草)≈0.75Mcal1磅TDN(粗饲料)≈0.50McalDE(Mcal/kgDM)=0.04409×TDN(%)(Cramptoetal.,1957,Swift,1957)。对于大多数饲料:DEIX(Mcal/kgDM)=(tdNFC/100)×4.2+(tdNDF/100)×4.2+(tdCP/100)×5.6+(FA/100)×9.4-0.3对于动物必饲料:DEIX(Mcal/kgDM)=(tdNFC/100)×4.2+(tdCP/100)×5.6+(FA/100)×9.4-0.3对含甘油的脂肪:DEIX(Mcal/kgDM)=9.4×(FA消化率×0.9×(EE/100)+4.3×0.1×(EE/100))对不含甘油的脂肪:DEIX(Mcal/kgDM)=9.4+FA消化率×(EE/100)饲喂不同水平引起TDN下降的百分点:0.18×TDNIX-10.3TDN转化为消化能下降的百分率:((TDNIX-(0.18×TDNIX)-10.3)×采食量/TDNIX当EE<3%时,NELP(Mcal/kgDM)=(0.703×MEP(Mcal/kg))-0.19当EE>3%时,NELP(Mcal/kgDM)=0.703×MEP-0.19+((0.097×MEP+0.19)/97)×(EE-3))(2)NRC(1989)奶牛标准中用DE推算MEEE<3%时,ME(Mcal/kgDM)=-0.45+1.01×DE(MoeandTymell,1975)。EE>3%时,ME(Mcal/kgDM)=1.01×(DEP)-0.45+0.0046×(EE-3)添加脂肪:MEP(Mcal/kgDM)=DEP(Mcal/kgDM)(3)几种NE的估计①Rostocker产脂净能(Nehring1969)NEF(KJ/kg)=7.2×DCP+31.5×DEE+8.4×(DCF+DNFE)表3-10例:1kg干草对于牛的产脂净能(NEF)可消化养分g/kg系数KJ/gNEFKJCP567.2403EE1031.5315CF1698.41420NFE2508.421004238=405EFEF为牛的产脂净能单位,每单位为10.46KJ。对于饲粮消化率低于67%以下的饲料,按上式算出的NEF应进行校正,校正系数见表4。②Vanes的产奶净能体系(NEL)此净能体系的实质是从可消化养分先估计ME。NEL(MJ)=K1·ME=0.6[1+0.004(q-57)]ME(MJ)式中:,ME按Schiemann的方法估计。表3-11饲粮NEF的校正系数饲粮能量的消化率%校正系数67.0-85.01.0065.0-66.90.9763.0-64.90.9661.0-62.90.9559.0-60.90.9357.0-58.90.9155.0-56.90.8953.0-54.90.8751.0-52.90.8450.0-50.90.82ME(KJ)=15.2×DCP+34.2×DEE+12.8×DCF+15.9×DNFE-0.7Sugar(克)GE(KJ)=24.2×CP+36.6×EE+20.9×CF+17.0×NFE-0.7×sugar(克)③NRC(1989)是用ME推算NENEM(Mcal/kgDM)=-1.12+1.37ME-0.138ME2+0.0105ME3NEG(Mcal/kgDM)=-1.65+1.42ME-0.174ME2+0.0122ME3(Garrett,1980)NEL(Mcal/kgDM)=0.0245×TDN(%DM)-0.12(MoeandTyrnell1976)④德国Kirchgessner用可消化有机物(VQOSC)和EE估计青绿饲料和粗饲料的SE和NEL的两个公式:SE(StE/kgDM)=-342+11.2VQOSC(克)+2.01×EE(克)(±7.1%)NEL(MJ/kgDM)=-0.35+0.081VQOSC(克)+0.0216×EE(克)(±6.4%)四.根据饲料化学成分预测饲料有效能由于实测有效能相当麻烦,耗时、耗工、耗资,在有一定实测数据的基础上,根据饲料成分与有效能的相关关系,可以建立预测的回归方程。通常分为两类,一类是用供能的组分建立,一般是多元;另一类是用总能减去不能提供有效能的组分,如纤维、灰分等。但多元分析指标较多,比较繁琐,而且也不是越多越好,一般三到四个指标即可;而对于不同的饲料原料指标的选择上也有所不同。饲料分类预测效果优于不分类,但工作量较大。1.猪多为预测DE和ME,NE一般可由DE推算。用供能养分估计的回归公式较多也较准确,但为多元回归,要测定的参数较多,相对较烦琐。近年来,美国康乃尔大学的Noblet等提出了一套较成熟的用NDF或ADF、CF等成分预测猪DE、ME、NE的回归公式。目前我们也正在研究用NDF等预测猪饲料的消化能,因NRC推荐的公式并非十全十美,何况我国有很多饲料是美国没有的,同名的也不一定同质。(1)GE的估计:GE(Kcal/kgDM)=4143+(56×%EE)+(15×%CP)-(44×%Ash)R²=0.98NRC(1998)(2)DE的估计:①以NRC(1998)为代表:ME(Kcal/kgDM)=-174+(0.848×GE)+(2×%SCHO)-(16×%ADF)R²=0.87Ewan(1989)SCHO(solublecarbohydratecalculated)为:SCHO=100-(%CP+%EE+%Ash+%NDF)DE小=949+(0.789×%GE)-(43×%Ash)-(41×%NDF)R²=0.91NobletandPerez(1993)DE小=4.151-(122×%Ash)+(23×%CP)+(38×%EE)-(64×%CF)R²=0.89NobletandPerez(1993)因随体重增加饲料的消化率略有增加,对于育肥猪和母猪NobletandShi(1993)提出采用下式估计饲料DE:DE大=1.391+(0.58×DE)+(23×%EE)+(12.7×%CP)R²=0.96或者:DE大=-712+(1.14×DE)+(33×%NDF)R²=0.93②NRC(1988)和其它一些估计方法:DE(Mcal/kgDM)=4.10-0.09×%ADFNRC(1988)DE=4179.0-86%ADFr=0.87DE=4159.0-160NDF%r=0.96DE=110×%CP+130×%EE+90×%NFE-5050r=0.96表3-12是按照能量饲料的化学成分范围设计的不同梯度的几种日粮建立的回归方程,用于能量饲料有效能的预测。表3-12十种饲粮建立的预测能量饲料DE的回归方程(MJ/kgDM)(p<0.01)刘彩霞等,2001回归方程R2RsdDE=16.575-0.333CF0.84650.1784DE=16.255-0.182ADF0.90150.1389DE=17.590-0.147NDF0.90700.1350DE=15.149+0.257CF-0.048CF20.93700.1188DE=15.280+0.063ADF-0.011ADF20.95150.1042DE=14.728+0.142NDF-0.0065NDF20.96160.0927DE=11.127-1.229CF+2.268Ash0.97160.0853DE=15.487-0.235ADF+0.268Ash0.91140.1506DE=16.454-0.290NDF+0.862Ash0.96470.0951DE=-89.220-0.604CF+5.650GE0.96640.0927DE=-38.398-0.251ADF+2.910GE0.95160.1113DE=-48.681-0.217NDF+3.563GE0.97
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