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学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精PAGE1学必求其心得,业必贵于专精PAGE阶段质量检测(二)细胞工程(A卷学业水平达标)(满分:100分时间:45分钟)一、选择题(每小题3分,共45分)1.下列生物工程技术中,不属于细胞工程的是()A.通过细胞培养获取细胞产物B.利用含有人胰岛素基因的大肠杆菌生产胰岛素C.通过体细胞克隆技术培养出克隆羊D.将某人的肝癌细胞在实验室中繁殖成一个细胞系解析:选BA、C、D三项操作水平为细胞或细胞器水平,属于细胞工程;B项操作水平为DNA分子水平,属于基因工程。2.下列关于植物体细胞杂交技术的叙述,错误的是()A.获得原生质体的过程需要用到纤维素酶和果胶酶B.利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株C.植物体细胞杂交过程就是原生质体融合的过程D.可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂种细胞解析:选C利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,才能获得原生质体;通过植物体细胞杂交可获得多倍体,并可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定是否是杂种细胞。植物体细胞杂交过程包括原生质体融合和植物组织培养过程。3.植物体细胞杂交制备原生质体和动物细胞培养配制一定浓度的细胞悬浮液,所需要的酶依次是()A.淀粉酶和磷脂酶B.纤维素酶和胰蛋白酶C.脂肪酶和二肽酶D.过氧化氢酶和半乳糖苷酶解析:选B制备原生质体应用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁;可用胰蛋白酶将动物细胞离散开.4.下列有关单克隆抗体制备的叙述,正确的是()A.先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠,再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞B.为避免病毒感染,只能用聚乙二醇、电激等处理来诱导骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞融合C.体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清和抗生素D.经过选择培养基初次筛选的杂交瘤细胞即可进行体内或体外培养解析:选C先向小鼠注射特定的抗原,再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞;诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合也可用灭活的病毒处理;体外培养杂交瘤细胞利用的是动物细胞培养技术,故需要在培养液中添加动物血清和抗生素;经过选择培养基初次筛选的杂交瘤细胞,不一定是能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,故需多次筛选和鉴定后才能进行体内或体外培养。5.关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述,错误的是()A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖D.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物脱除病毒解析:选B动物细胞培养用液体培养基,而植物组织培养用固体培养基;动物细胞培养过程中要加入胰蛋白酶,而植物组织培养过程中则不用;植物细胞具有全能性,所以烟草叶片离体培养能形成新个体,而动物细胞离体培养只能增殖;植物组织培养中常用根尖、茎尖等培养无病毒植物个体,而动物细胞培养的一个重要应用是检测有毒物质.6.细胞工程中,选择合适的生物材料是成功的关键.下列选择不合理的是()A.选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞B.选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率C.选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗D.选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得优质的突变体解析:选A高度分化的动物体细胞已经没有分裂能力,因此对其培养得不到大量细胞。7.在克隆羊培育过程中,将雄羊的体细胞核移入雌羊的去核卵细胞中.产生该克隆羊的方式及该克隆羊发育成熟后所分泌的性激素依次是()A.无性生殖、雄性激素B.无性生殖、雌性激素C.有性生殖、雄性激素D.有性生殖、雌性激素解析:选A克隆羊的产生属于无性生殖。由于是雄羊供核,故此克隆羊的性别为雄羊,所分泌的性激素是雄性激素.8.下列实例与所利用的技术或原理不相符合的是()A.转基因抗虫棉的培育需要利用植物组织培养技术B.植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性C.原生质体融合和动物细胞融合都利用了细胞膜的选择透过性D.植物愈伤组织的形成和杂交瘤细胞的培养都与细胞分裂有关解析:选C原生质体融合和动物细胞融合都利用了细胞膜的流动性。9.下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()A.连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型B.某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞C.由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆D.未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状解析:选B连续细胞系的细胞大多数具有异倍体核型;癌细胞仍能逆转为正常细胞,如小鼠畸胎癌能分化为各种正常体细胞;由一个共同的祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆;未经克隆化培养的细胞系具有异质性。10.在现代生物工程技术中,下列研究方案能实现其目的的是()选项方案目的A诱导人胰岛B细胞和奶牛卵细胞融合培育转基因克隆奶牛B将外源基因导入受体植物叶绿体中防止外源基因扩散C通过体外培养或体内培养骨髓瘤细胞制备单克隆抗体D用胃蛋白酶处理剪碎的动 物组织块制备动物细胞悬浮液解析:选B转基因克隆奶牛涉及基因工程和核移植;骨髓瘤细胞不能产生抗体;动物细胞培养的pH为7。2~7.4,胃蛋白酶的最适pH为2左右.11.单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞,在含有次黄嘌呤、氨基嘌呤和胸腺嘧啶的培养基(HAT)中无法生长;而小鼠脾细胞是正常细胞,在HAT培养基上可正常存活.用聚乙二醇诱导细胞融合后,经过数代培养,最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是()A.骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞B.脾细胞之间形成的融合细胞C.骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞D.脾细胞解析:选C只有杂交瘤细胞能在HAT培养基上增殖生长,依此方法可筛选杂交瘤细胞。12.下面是“白菜—甘蓝"杂种植株培育过程示意图.在下列叙述中正确的一项是()A.如将纯种的白菜和甘蓝的卵细胞分别制成原生质体,按相同的方法操作也可得到与图示相同基因型的杂种植株B.可以通过在0.3g/mL蔗糖溶液中是否发生质壁分离来判断白菜原生质体的死活C.该培养过程中可能发生细胞分化、染色体变异或基因突变,一般不会发生基因重组D.植物组织培养和动物细胞培养的培养基、培养目的不完全相同,但诱导细胞或原生质体融合的方法却是完全相同的解析:选C用卵细胞杂交得到的植株的细胞的遗传物质是体细胞杂交的一半,卵细胞是经减数分裂形成的,遗传物质减半;白菜的原生质体已经去掉了细胞壁,不会发生质壁分离;植物培养过程中细胞进行有丝分裂,只能发生细胞分化、染色体变异或基因突变,不会发生基因重组;植物组织培养的目的是得到植株或细胞产物,而动物细胞培养的目的是得到大量的细胞;融合的方法也不完全相同,动物细胞融合可用灭活的病毒.13.下列有关细胞工程的叙述,正确的是()A.PEG是促细胞融合剂,可直接诱导植物细胞融合B.用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂C.骨髓瘤细胞经免疫处理,可直接获得单克隆抗体D.核移植克隆的动物,其线粒体DNA来自供卵母体解析:选DPEG是促细胞融合剂,能诱导植物原生质体融合,融合前需先用酶解法去除植物细胞的细胞壁;制备人工种子应该用组织培养形成的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,而不是原生质体;单克隆抗体是杂交瘤细胞产生的,骨髓瘤细胞不能分泌抗体;利用核移植技术克隆动物时,是将体细胞的细胞核移入去除细胞核的卵母细胞中,所以克隆动物的线粒体DNA来自供卵母体。14.下图是两种二倍体植物细胞(甲、乙)融合并培育新植株的过程,有关分析正确的是()A.过程①需要将植物组织置于含有纤维素酶和果胶酶的溶液中,且溶液中的渗透压应大于细胞液渗透压B.过程②要用聚乙二醇等方法诱导原生质体融合,主要依据细胞膜具有选择透过性原理C.过程④⑤⑥需要根据生长发育进程更换不同的培养基D.最终得到的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异,不具有可育性解析:选C过程①需要将植物组织置于含有纤维素酶和果胶酶的溶液中,且溶液中的渗透压应等于细胞液渗透压,使细胞维持正常形态。诱导原生质体融合主要依据细胞膜具有流动性.过程④⑤⑥需要根据生长发育进程更换不同的培养基,诱导生芽、生根。最终得到的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异,由于存在同源染色体,具有可育性。15.下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程,有关叙述错误的是()A.图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B.利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙C.用特定的选择培养基对乙进行筛选,融合细胞均能生长,未融合细胞均不能生长D.对丙需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁解析:选C图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原;常用于诱导动物细胞融合的物质或方法有灭活的病毒、聚乙二醇和电激等;用特定的选择培养基进行筛选,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长.二、非选择题(共55分)16.(12分)植物组织培养的过程如下图所示。请分析并回答:eq\x(离体的组织或器官)eq\a\vs4\al(\o(→,\s\up7(A),\s\do5()))eq\x(愈伤组织)eq\a\vs4\al(\o(→,\s\up7(B),\s\do5()))eq\x(胚状体)eq\a\vs4\al(\o(→,\s\up7(C),\s\do5()))eq\x(植株)(1)B、C过程是通过细胞的__________、________实现的.(2)胚状体根据其来源不同,可以分为“体细胞胚”和“花粉胚”。①用花药离体培养可获得“花粉胚”,同种植物的花粉胚与体细胞胚在染色体数目上的主要区别是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。②如果用__________处理二倍体植株的花粉胚,能获得可育的植株,该过程是__________育种中不可缺少的步骤.③在一定条件下培养离体细胞可以形成体细胞胚进而发育成完整的植株,其根本原因是每个细胞都含有____________________,这一过程体现了____________________。(3)植物组织培养得到的胚状体经过人工薄膜包装可以获得“人工种子”,由“人工种子”萌发出的植株是否可育?_________________________________________________。(4)微型繁殖培育无病毒草莓时,一般选取茎尖或根尖作为外植体,其依据是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)在培养过程中,愈伤组织在培养基中未形成根,但形成了芽,其原因可能是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析:(1)离体的组织或器官经过脱分化形成愈伤组织,再通过分裂和分化形成胚状体结构.(2)由花药离体培养得到的“花粉胚",其细胞内的染色体数目是体细胞胚的一半。用秋水仙素处理花粉胚,可使细胞内的染色体数目加倍,获得可育的二倍体植株,该过程是单倍体育种中不可缺少的步骤。离体细胞发育成完整植株的根本原因是每个细胞中都含有该物种的全套基因,该过程体现了植物细胞的全能性。(3)花粉胚的细胞中染色体数是体细胞胚的一半,减数分裂过程中染色体联会紊乱,不能产生正常配子,一般是不可育的;而体细胞胚的细胞中含本物种正常的染色体数,可进行正常的减数分裂,产生正常的配子。(4)茎尖或根尖由于细胞不断分裂,病毒来不及侵染,所以在培养无病毒植株时常选用茎尖或根尖作外植体.(5)植物组织培养过程中需用生长素和细胞分裂素来调节细胞的分裂、分化,若培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏高,容易诱导根的生成;若培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏低,则易诱导芽的生成.答案:(1)分裂(或增殖)分化(2)①花粉胚细胞中的染色体数目是体细胞胚的一半②秋水仙素单倍体③本物种的全套基因(或全套遗传信息)植物细胞的全能性(3)由花粉培养发育的植株一般不可育,由体细胞经组织培养发育的植株则是可育的(4)茎尖(或根尖)病毒极少,甚至无病毒(5)培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量比例不合理(或培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏低)(合理即可)17.(12分)自然界中有一种含有叶绿体的原生动物-—眼虫,这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活。某同学提出问题:“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?”他尝试设计出如图所示的实验方案。结合实验方案回答问题:实验原理:根据眼虫的特点,动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。实验步骤如下:(1)①中选的植物材料细胞中,必须有的细胞器是______________________。(2)③过程所用的酶是_____________________________________________________。(3)④过程除了用电激之外,还可以用________________________等作为诱导因素。(答出两种)(4)⑤过程中动物细胞体外培养需要满足的条件是____________________,________________,____________________。(5)在整个实验过程中,要强调所用的器械的灭菌和无菌操作,原因是各种杂菌可以在培养基上面迅速生长,培养基一旦被污染,迅速生长的各种杂菌不但会和________争夺营养,而且这些杂菌生长的过程中可能会生成大量________导致培养物迅速死亡。(6)在⑤⑥过程中,通常要添加血清,原因是____________________________________________________________________________。解析:(1)根据题意知,所选植物材料中必须含有叶绿体。(2)图中③是去除植物细胞细胞壁的过程,所用的酶是纤维素酶和果胶酶。(3)诱导细胞融合的方法除了电激外,还有振动、离心、聚乙二醇等。(4)图中⑤是动物胚胎细胞的培养,此过程需要满足以下条件:无菌、无毒的环境,合适的营养、温度和pH以及气体环境.(5)整个实验过程中,都是严格无菌的,否则各种杂菌会在培养基中生长,与所培养的细胞争夺营养,同时杂菌代谢也可能会产生出对培养物有毒的物质,导致培养物死亡。(6)动物细胞培养过程中需要加入血清或血浆,因为动物细胞生长过程中需要一些未知的天然成分,而血清、血浆中含有这些天然成分.答案:(1)叶绿体(2)纤维素酶和果胶酶(3)聚乙二醇、振动、离心(任写两种)(4)无菌、无毒的环境合适的营养、温度、pH气体环境(5)培养物对培养物有害的物质(6)人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚,通常加入血清、血浆等一些天然成分18.(10分)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下面是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答问题:(1)制备单克隆抗体过程中要用到__________________和__________________技术。(2)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于________,使小鼠产生分泌相应________的淋巴细胞,此过程属于特异性免疫中的______免疫。(3)在细胞内DNA的合成一般有两条途径,主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶的催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的____________具有筛选杂交瘤细胞的作用.②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是____________________________________。(4)此过程生产的单克隆抗体可以与________________________特异性结合,从而诊断早孕。解析:(1)制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。(2)给小鼠注射HCG,使小鼠进行体液免疫,产生能分泌抗体的B淋巴细胞.(3)骨髓瘤细胞的DNA合成只有一条途径,在培养基中加入氨基嘌呤,阻断了骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合体的增殖。杂交瘤细胞有两条合成DNA的途径,因此在选择培养基上杂交瘤细胞能生存并无限增殖。B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生单一抗体.(4)此单克隆抗体是针对人绒毛膜促性腺激素(HCG)作抗原产生的,可以与人绒毛膜促性腺激素(HCG)特异性结合。答案:(1)动物细胞培养动物细胞融合(2)抗原抗体体液(3)①氨基嘌呤②能无限增殖并分泌特异性抗体(4)人绒毛膜促性腺激素(或HCG)19.(10分)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株.流程如下图。据图回答下列问题:(1)过程①所需的酶是___________________________________________________。(2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的________存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是______________________。原生质体经过________再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。(4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和____________植株的根尖,通过______、________、染色和制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。解析:(1)过程①是获得黑芥叶肉细胞的原生质体和花椰菜根细胞的原生质体,该过程需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。(2)供体细胞为黑芥叶肉细胞含有叶绿体,而受体花椰菜的根细胞无叶绿体,因此可以根据叶绿体的有无初步筛选出杂种细胞。(3)加入甘露醇以保持渗透压,是为了维持原生质体的完整性,防止原生质体吸水涨破。原生质体再生出细胞壁,经过脱分化形成愈伤组织.(4)若分析再生植株的染色体变异类型,需将再生植株细胞的染色体与亲本即黑芥和花椰菜的染色体进行比较;观察染色体的形态和数目需在有丝分裂中期观察,因此需要经过解离、漂洗、染色、制片等过程制成装片。答案:(1)纤维素酶和果胶酶(2)叶绿体(3)保持原生质体完整性细胞壁(4)双亲(或花椰菜和黑芥)解离漂洗20.(11分)右图为细胞融合的简略过程,请据图回答:(1)若A、B是动物细胞,通常用________处理获得分散的单个细胞.A、B到C的过程中,常用的不同于植物细胞融合的手段是________________________。(2)若该图是生产抗甲型流感病毒的单克隆抗体的制备过程.A为从小鼠体内获取的________,在获得此细胞之前,小鼠需注射______________,图中B细胞是小鼠骨髓瘤细胞,符合要求的D细胞具有的特点是__________________________。(3)若A、B是植物细胞,则之前已用________________去除了细胞壁。常用来诱导细胞融合的化学试剂是________。(4)若A是番茄原生质体,B为马铃薯原生质体,D要再生出________。通过植物组织培养技术把D培养成杂种植株,D个体____________(填“可育”或“不育”)。这种育种方式的优点是________________________________________________________________.利用上图原理育种工作者还可以进行________育种。解析:动物细胞培养过程中需要使用胰蛋白酶处理,以便获得单个分散的细胞,制成细胞悬浮液;而植物体细胞杂交过程中,需要用纤维素酶和果胶酶处理,得到原生质体.在促融方法上,要注意题目的限制条件,是物理方法、化学方法还是生物方法,是促融动物细胞还是植物细胞,这些都要分清。单克隆抗体制备的过程应注意:对提供浆细胞的动物要进行免疫,以便能获得产生抗体的浆细胞;要进行两次筛选,最终获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。原生质体融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁,植物体细胞杂交能克服远缘杂交不亲和的障碍,得到的杂种植株是多倍体,体细胞内有同源染色体,可以正常减数分裂产生配子,是可育的.如果用同种植物的细胞进行融合则可以进行多倍体育种.答案:(1)胰蛋白酶灭活的病毒诱导(2)浆细胞灭活甲流病毒既能分泌抗甲流病毒抗体又能无限增殖(3)纤维素酶、果胶酶(酶解法)聚乙二醇(PEG)(4)细胞壁可育按照人们的意愿改变了生物的遗传物质,克服了远缘杂交不亲和的障碍多倍体阶段质量检测(二)细胞工程(B卷能力素养提升)(满分:100分时间:45分钟)一、选择题(每小题3分,共45分)1.下列关于克隆技术的叙述中,错误的是()A.可利用原生质体进行植物组织培养B.原生质体可作为转基因的受体细胞C.植物克隆的技术基础是植物组织培养D.动物克隆的技术基础是核移植解析:选D在植物细胞工程中,原生质体可以作为基因工程的受体细胞,经组织培养可再生出新的植株;动物克隆的技术基础是动物细胞培养。2.在现代生物科技的应用中,不需要进行检测与筛选的是()A.对植物的离体组织进行培养,大规模培育优良品种B.将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,制备单克隆抗体C.利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜—甘蓝”D.将抗虫基因导入植物细胞,培育具有抗虫特性的新植株解析:选A植物组织培养为大规模无性繁殖,子代性状都与亲代相同,不需检测与筛选。两种细胞会形成不同种类融合细胞,目的基因不会百分百成功导入和表达,均需进行检测与筛选。3.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是()A.纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性B.植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性C.原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性D.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂解析:选B植物组织培养的原理是细胞的全能性,而动物细胞培养的原理是细胞增殖。4.将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”,能够用于杀死人类的某些癌细胞,其过程如图所示。下列相关叙述错误的是()A.①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同B.经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体C.②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性解析:选B图解中①过程为动物细胞融合,其原理和植物原生质体融合的原理(细胞膜的流动性)是基本相同的;经①形成的杂交瘤细胞,还要进一步筛选出同时具有骨髓瘤细胞的特点能无限增殖,又具有脾细胞产生特异性抗体即单一抗体的能力的杂交瘤细胞;②过程需要进一步去筛选符合要求的杂交瘤细胞,再进行增殖培养;抗体具有特异性,其靶向作用于具有相应抗原的靶细胞。5.下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B.克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D.恶性细胞系的细胞可进行传代培养解析:选D由于接触抑制,动物细胞培养时只能形成单层细胞;克隆培养法在培养时,由于所有子代细胞都来自于一个亲代细胞,所以基因型一般都相同;二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的,只有少数细胞遗传物质发生改变,才能无限增殖;恶性细胞系的细胞具有癌变的特点,可进行传代培养。6.玉米是一种重要的农作物,为了提高玉米的产量,科学家在玉米育种中和栽培中作了大量的研究。如图是关于玉米培养的过程,据图判断下列说法中错误的是()A.从繁殖原理上分析,A→D属于无性生殖B.植株D和G中的染色体组数不同C.E→G不能体现细胞的全能性D.E→F过程中获得的植株一般没有直接的使用价值即应用于大田生产解析:选CA→D过程表示植物组织培养过程,其繁殖方式属于无性生殖;植株D细胞是二倍体细胞,植株G细胞是单倍体细胞,两者的染色体组数不同;E→G从一个细胞培养成了一个完整的植株,体现了细胞的全能性;E→F表示花药离体培养,获得的单倍体植株一般没有直接的使用价值。7.将烟草和大豆的原生质体混合后,转移到适当的培养基上培养,使原生质体再生出细胞壁,这时,在细胞混合物中,可用显微镜观察到的细胞有()①烟草—大豆杂种细胞②烟草细胞③大豆细胞④烟草—烟草细胞⑤大豆—大豆细胞A.① B.①②③C.①④⑤ D.①②③④⑤解析:选D解答该题必须明确以下要点:一是原生质体间的融合,可以在同种生物之间,也可以在非同种生物之间;二是原生质体有可能发生融合,也可能不发生融合.综上两点①②③④⑤均有可能存在。8.在现代生物工程技术中,下列研究方案可能实现其目的的是()选项方案目的A将外源生长激素基因导入奶牛体内获得克隆奶牛B将外源基因导入受体植物叶绿体中防止外源基因污染C通过体外培养或体内培养骨髓瘤细胞制备单克隆抗体D用胃蛋白酶处理剪碎的动物组织块制备动物细胞悬浮液解析:选B选项A是转基因技术,不能获得克隆奶牛;选项C制备单克隆抗体应先制备杂交瘤细胞;选项D中动物细胞培养的pH为7.2~7.4,而胃蛋白酶的最适pH为1。8左右。9.动物细胞融合的主要应用是制备单克隆抗体,单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是()①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A.①②③④ B.①③④⑤C.②③④⑤ D.①②④⑤解析:选A该特定培养基上要选择保留杂交瘤细胞,所以能存活、增殖的只有杂交瘤细胞,其他细胞均不能存活、增殖。10.在下列选项中,需要采用植物组织培养技术的是()①利用基因工程培养抗棉铃虫的植株②脱毒苗的培育③利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,获得多倍体植株④单倍体育种⑤无子西瓜的快速大量繁殖⑥“胡萝卜-羊角芹”杂种植株的培育A.①②③④⑤⑥ B.①②④⑥C.①②④⑤⑥ D.②③④⑤解析:选C植物基因工程培养抗棉铃虫植株,由于把目的基因导入植物体细胞后,需要采用植物组织培养技术得到转基因植物,故①正确;脱毒苗需要采用植物的茎尖分生区进行植物组织培养,故②正确;用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,没有采用植物组织培养技术,故③错误;单倍体育种过程包括花药离体培养和人工诱导染色体加倍,其中花药离体培养属于植物组织培养,故④正确;无子西瓜的获得过程没采用植物组织培养技术,但是快速繁殖需要植物组织培养,故⑤正确;“胡萝卜—羊角芹”杂种植株利用了植物组织培养技术,故⑥正确.11.植物A与植物B有性杂交不亲和,但科学家设法获得了两者的杂种植株.科学家可能使用的方法是()A.将A嫁接到B上,或将B嫁接到A上B.利用植物体细胞杂交工程技术手段,培养成一个杂种植株C.将A的花粉授给B,再将所得种子培养成植株D.将A和B的花粉分别进行离体培养获得单倍体植株,再让两种单倍体植株相互授粉,将获得的种子培养成植株解析:选B植物A与植物B有性杂交不亲和,存在生殖隔离,植物体细胞杂交克服不同生物远缘杂交的障碍。12.通过细胞工程生产单克隆抗体时,要涉及到以下三个筛选过程()①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞②选出能产生抗体的B淋巴细胞③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群这三个过程的先后次序是A.②③① B.③①②C.②①③ D.①③②解析:选C单克隆抗体制备过程中涉及的三次筛选次序分别是:给小鼠注射特定抗原,在体内筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞;筛选得到杂交瘤细胞,去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞;筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。13.下图表示单克隆抗体的制备过程,下列叙述错误的是()A.图中有一处明显错误B.②中培养基应加入具有选择性抑制骨髓瘤细胞DNA复制的物质C.④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞D.⑤可以称为一个细胞系解析:选C④筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞。14.关于“番茄—马铃薯”杂种植株,下列叙述错误的是()A.这项技术已经广泛应用到杂种植物的培育中B.若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞含有n条染色体,则“番茄—马铃薯"细胞内含有m+n条染色体C.过程②结束后,需要淘汰自身融合的细胞D.过程③存在细胞分裂解析:选A据图分析该过程是植物体细胞杂交技术,其很多理论、技术问题未解决,距离推广应用有一定差距。“番茄-马铃薯”细胞具有两个细胞的染色体,有m+n条染色体。过程③结束后,需要淘汰自身融合的细胞,筛选出“番茄-马铃薯"杂种细胞。过程③进行有丝分裂,在末期形成新的细胞壁,标志着原生质体融合成功。15.如图为细胞融合的简略过程(只考虑两个细胞的融合)。若A、B分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上,由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用,在光照强度大于800lx时,都不能增殖。下列叙述中正确的是()①实验开始时必须用纤维素酶和果胶酶除去不利于原生质体融合的物质②实验中除了杂种细胞外,还有5种融合细胞③要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,可在大于800lx光照下培养,收集增殖分化的细胞团④要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr或Hhrr的杂种细胞,可在大于800lx光照下培养,收集增殖分化的细胞团⑤从理论上分析考虑,将融合细胞的培养液放在大于800lx光照下培养,有2种融合细胞不能增殖分化A.①②③⑤ B.①②③C.①③④⑤ D.①③⑤解析:选D实验开始时必须用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁,有利于原生质体融合。实验中除了杂种细胞外,还有两种融合细胞,即同种花粉细胞的融合。在大于800lx光照下培养,含隐性纯合基因(rr或hh)的是同种花粉的融合体,不能生长,只有基因型为HhRr的杂种细胞才能增殖。二、非选择题(共55分)16.(10分)下图为A、B不同物种间体细胞杂交示意图,请回答下列问题。(1)去除细胞壁而不损伤细胞可用________、________处理。在用促融剂处理时,使用的促融剂主要有__________________。(2)融合细胞中可能包括________种类型,其中杂种细胞的遗传物质组成是________________________________________________________________________。(3)由杂种细胞经人工诱导培养,经____________分裂增加细胞数目并不断分化,逐渐发育成C植株。该植株的性状与亲本植物的性状区别是____________________________.(4)整个培养过程应用了细胞工程的________和____________________两大技术,这种培育杂种植株方法的意义是___________________________________________________。解析:(1)去除植物细胞壁的常用方法为酶解法,即使用纤维素酶与果胶酶溶解并去除细胞壁,制得原生质体。(2)融合细胞可包括AA型、BB型及AB型三种,其中杂种细胞的遗传物质组成应为A、B两种植物遗传物质之和。(3)融合后的杂种细胞经有丝分裂及细胞脱分化、再分化可形成杂种植株。(4)该培养过程应用了植物体细胞融合及植物组织培养技术,该方法培育杂种植株的意义在于克服了远缘杂交不亲和的障碍.答案:(1)纤维素酶果胶酶PEG(或聚乙二醇)(2)3A和B植物的遗传物质之和(3)有丝具有A和B两种植物的性状(4)植物体细胞融合植物组织培养克服远缘杂交不亲和的障碍17.(10分)不同类型的细胞表达不同的基因组合.那么不同类型的动物细胞都具有全套基因吗?科学家进行了如图所示的克隆研究,Ⅰ~Ⅶ代表有关过程,a~h代表有关结构或个体。(1)a细胞的名称是________。选用该细胞作为核移植受体细胞的原因________________________________________________________________________.(2)对b的操作方法通常是________。若g是能产生人生长激素的羊,则培育g时,应将人生长激素基因导入______________________。(3)从d中取出细胞进行培养时,一般不超过________代,原因是________________________________________________________________________。此培养过程与植物组织培养所用的培养基有何不同?____________________________________________________________________________.(4)如果图中的细胞均是人体细胞,则获得的h细胞或器官可用于供体本人组织器官的移植,其优点是____________________。(5)上述过程中用到的生物技术有__________________________________________。(列举两项)解析:(1)分析题图可以推知:a表示去核卵母细胞;c为重组细胞;d为桑椹胚;e为代孕母羊;f为胚胎干细胞;g表示克隆羊;h表示胚胎干细胞分化形成的特定细胞;Ⅰ、Ⅱ为核移植过程;Ⅲ为早期细胞胚胎培养过程;Ⅳ为胚胎移植过程;Ⅴ表示从桑椹胚中取出胚胎干细胞;Ⅵ表示妊娠;Ⅶ表示胚胎干细胞体外培养。选用去核卵母细胞作为受体细胞的原因是体积大,易操作;含有促使细胞核表达全能性的物质等。(2)图中b所采用的方法是显微注射法;培育转基因羊时,应将目的基因导入供体细胞核中,核移植后得到的重组细胞中会含有目的基因。(3)进行动物细胞培养时,一般选用10代以内的细胞,因为10代以内的细胞核型一般不发生变化;动物细胞培养与植物组织培养的培养基区别有:动物细胞培养一般为液体培养基,植物组织培养一般采用固体培养基,动物细胞培养时需要向培养液中添加血清等天然成分.(4)用供体自身的器官移植不会发生免疫排斥反应。(5)图中运用的生物技术有:动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植等。答案:(1)去核卵母细胞体积大,易操作;营养物质丰富;含有促使细胞核表达全能性的物质(答两点即可)(2)显微注射法核移植的供体细胞核(3)1010代以内的细胞,其细胞核型不会发生变化此培养过程所用的培养基一般是液体培养基,并加入动物血清(4)不发生免疫排斥反应(5)动物细胞培养、细胞融合、核移植、胚胎移植等(任选两项)18.(13分)利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体的流程如下图所示。请根据下图回答问题:(1)通过过程①得到的B淋巴细胞在从小鼠体内分离出之前,需对小鼠______________。(2)过程②诱导融合运用的原理是____________,该过程中区别于原生质体融合的方法是用____________处理。(3)过程③至少需要通过2次筛选和克隆培养,其中第一次筛选的目的是获得__________。图中X细胞具有____________________的特点.单克隆抗体的特点是________________________________________.(4)经过筛选和克隆化培养得到杂交瘤细胞后,一般采用体内培养和体外培养两种方式进行培养,动物细胞的体外培养对环境条件的要求比较高,如培养液需适宜的温度、____________________________等。(答出两项即可)(5)从图中可以看出,单克隆抗体的制备过程运用了________________和______________等动物细胞工程技术.解析:诱导细胞融合运用了细胞膜的流动性原理,该过程中区别于原生质体融合的方法是用灭活病毒处理.杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞和浆细胞的特点,即既能无限增殖,又能产生特异性抗体。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、并可能大量制备的特点。答案:(1)注射特异性抗原(2)细胞膜具有流动性灭活病毒(3)杂交瘤细胞既能产生特异性抗体,又能无限增殖特异性强、灵敏度高、并可大量制备(4)pH、动物血浆、气体环

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