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文档简介
职业教育医学检验技术专业教学资源库检验仪器分析技术离心机-常用的离心方法职业教育医学检验技术专业教学资源库沧州医学高等专科学校苏忠玉差速离心法1密度梯度离心法2分析型超速离心法3主要用于一般及特殊样品的分离,例如分离细胞器和病毒。一、差速离心法(differentialvelocitycentrifugationmethod)利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别,在同一离心条件下,通过不断增加相对离心力,使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分步沉淀的离心方法。操作过程
差速离心法原理示意图一般是在离心后用倾倒的办法把上清液与沉淀分开然后将上清液加高转速离心,分离出第二部分沉淀如此反复加高转速,逐级分离出所需要的物质差速离心法优点1.操作简单,离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开;2.可使用容量较大的角式转子;分离时间短、重复性高;3.样品处理量大。缺点1.分辨率有限、分离效果差,不能一次得到纯颗粒;2.壁效应严重,容易使颗粒变形、聚集而失活。二、密度梯度离心法(isodensitycentrifugationmethod)样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡,在一定离心力作用下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。又称为区带离心法。密度梯度离心法优点1.分辨率高,分离效果好,可一次获得较纯颗粒2.适用范围广,既能分离沉淀系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度的颗粒3.颗粒不会积压变形,能保持其活性,并可防止已形成的区带由于对流而引起混合缺点1.离心时间较长;需要制备成梯度液2.操作严格,不宜掌握速率区带离心法等密度区带离心法密度梯度离心法
1.速率区带离心法速率区带离心法是根据被分离的粒子在梯度液中沉降速度的不同,离心后分别处于不同的密度梯度层内形成几条分开的样品区带,达到彼此分离的目的。2.等密度区带离心法当不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力场中,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上(即
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