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文档简介
几种溶液的配制方法、PBS:取ZLI-9061PBS于1000ml的馏水中匀pH值在之偏离此范围,请用0.1N的HCL或NaOH调整。、:2.1Tris缓液配方MpH7.6(羟基氨基甲烷)60.57gHCL双蒸水缓液配制方法:
约加至1000ml先以少量双蒸水300~500ml)溶解Tris,加入HCl后用HCl)NaOH(1N)将pH至7.6,最后蒸水加至。此液为储备液4冰箱中保存。2.2TBS配:缓冲液(0.5MNaCI8.5-9g双蒸水
加至1000mlTBS配方法:先以少量双蒸水溶解,再加入Tris-HCl缓液,最后加双蒸水至,分摇匀。、枸橼酸盐缓冲液Citrate3.1储液枸酸溶液:称取枸酸C6H8O7·)溶于蒸水中。0.1M枸酸钠溶液称取29.41g枸酸C6H5Na3O7溶1000ml蒸水中。3.2工液取A液41mlB液加入450ml蒸水中,溶液值为6.0±0.1、胰酶Trypsin4.1ZLI-9011蛋白酶消化液:常用浓度为0.125%用将滴试剂胰溶液和三滴试剂胰稀释液均匀混1:3稀释可直接滴加使用。胰的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整,浓度范围可以从(稀)至(1:1稀4.2ZLI-9010胰白酶:取或胰白酶加入到0.05%0.1%无水氯化钙水溶液中即可。、胃酶Pepsin4%蛋白酶,用0.1mol/LHCL配制。
、DAB6.1Kit:使用前只需将试剂盒提供的A三试剂各一滴至1ml双水中获1ml工作液,简单易用。6.1ZLI-9030DAB:6mgDAB溶于(0.05M加入0.1ml度为%过掉沉淀物,即可。、:溶于1ml二基甲酰胺中,加入14ml浓度为0.1M的醋酸缓冲液(后加入0.15ml,滤掉沉淀物。、RIPA×PBS,1%NP,,0.1%SDS(此液体可长期存下制剂以储存液方式保存,临用前加入中)10mg/ml异醇溶液(用量为)(品,用量为8.31000mMsodiumorthovanadate冷液)量10、BlottoA:常规使用1×,milk,Tween2010B与Phosphotyrosine体共用×0.05%Tween。部分实验可全去除,但可能引起背景增高。常用缓冲溶液的配制方法.甘酸–盐酸缓冲液0.05mol/L)X毫0.2mol/L甘酸+Y毫mol/L,再加水稀释至200毫2.02.42.62.8
X
Y
3.03.23.43.6
X
Y8.26.45.0甘氨酸分子量,mol/L甘酸溶液含15.01克/。.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液0.05)X毫0.2mol/L邻二甲酸氢钾+mol/LHCl再加水稀释到毫升℃2.22.42.62.8
X
Y
℃3.23.43.63.8
X
Y3.0
邻苯二甲酸氢钾分子量=,0.2mol/L邻苯二甲酸氢溶液含克升
.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液(毫升)
柠檬酸(毫升)
(毫升)
柠檬酸(毫升)2.22.42.62.83.03.23.43.63.84.04.24.44.64.85.0
5.25.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.0
分量=14.98,0.2mol/L溶为克升。·分量178.05,0.2mol/L液含克/。·分量210.14,0.1mol/L液为克/。.柠檬酸–氢氧化-盐酸缓冲液
钠离子浓度(mol/L
柠檬酸(克)氢氧化钠·H2O()
盐酸(毫升)最终体积HCl浓)(升)①NaOH2.23.13.34.35.35.86.5
①使时可以每升中加入克酚,若最后pH有变化,再用少量50%氢化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液0.1)0.1mol/L柠檬酸(毫升)
0.1mol/L柠檬酸钠(毫升)
0.1mol/L柠檬酸(毫升)
0.1mol/L柠檬酸钠(毫升)3.03.23.43.63.84.04.24.44.6
1.42.84.05.16.06.97.78.69.7
5.05.25.45.65.86.06.26.46.6
8.27.36.45.54.73.82.82.01.4
4.8
9.2
柠檬酸C6H8O7:分子量,mol/L溶液为克升。柠檬酸钠·2H2O分子量,0.1mol/L液为克/升。.乙酸–乙酸钠缓冲液0.2mol/L)℃2.63.84.04.24.44.6
0.2mol/L(毫升)
0.3mol/LHAc(毫升)
℃4.85.05.25.45.65.8
0.2mol/L(升)
0.3mol/LHAc(毫升)Na2Ac·3H2O分量=,0.2mol/L液为27.22/。
.磷酸盐缓冲液(1磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液)5.85.96.06.16.26.36.46.56.66.76.8
0.2mol/L(毫升)8.0
0.3mol/L(毫升)
7.07.17.27.37.47.57.67.77.87.98.0
0.2mol/L(升)
0.3mol/L(毫升)8.57.05.36.9
Na2HPO4·2H2O分量=,0.2mol/L溶为85.61克升。Na2HPO4·12H2O子量358.22,0.2mol/L液为71.64克/。Na2HPO4·2H2O分量=,0.2mol/L溶为31.21克升。(2磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液)mol/L/15Na2HPO(毫升)
mol/L//15KH2PO(毫升)
(毫升
mol/L//15KH2PO(毫升)
Na2HPO4·2H2O分量=,1/15M溶液为11.876/。KH2PO4分量=,1/15M溶为克/。.磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液)X毫Y毫0.2NNaOH加稀释至升℃5.86.06.26.46.66.8
X(毫升
Y(毫升)
℃7.07.27.47.67.88.0
X(毫升
Y毫升)
.巴比妥钠-盐酸缓冲液(℃)0.04M巴妥钠溶液
0.2V盐
0.04M巴比妥钠溶液毫
盐(升)升)6.87.07.27.47.67.88.08.2
8.48.68.89.09.29.49.6
巴比妥钠盐分子=溶为克/10–酸缓冲液(0.05M25℃)毫0.1M三羟甲基氨基甲烷Tris)溶液与X毫盐酸混匀后,加水稀释至100毫升。
X(毫升)
X(毫升)8.57.0三羟甲基氨基甲烷()HOCH2CH2OH分子量121.14;1M液为克升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将盖严。.硼酸–硼砂缓冲液0.2M硼根)7.47.67.88.0
0.05M硼砂(毫升)1.01.52.03.0
0.2M硼砂(毫升)9.08.58.07.0
8.28.48.79.0
0.05M硼砂(毫升)3.54.56.08.0
0.2M硼(毫升)6.55.54.02.0硼砂分量381.43;0.05M溶液(=0.2M酸根)含19.07克升。硼酸H2BO3,分量溶为12.37克升。硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。
.硼酸-硼砂缓冲液(0.2M硼根)7.47.67.88.0
0.05M硼砂(毫升)1.01.52.03.0
0.2M硼酸(毫升)9.08.58.07.0
8.28.48.79.0
0.05M硼砂(毫升)3.54.56.08.0
0.2M硼(毫升)6.55.54.02.0硼砂分子量381.43;0.05M溶液硼根)含克升。硼酸H2BO3分子0.2M溶液为12.37/升。硼砂易失去结晶水,必须在塞的瓶中保存。12甘氨酸–氢氧化钠缓冲液)X毫甘酸+Y升0.2NnaOH加水稀释至毫升8.68.89.09.29.4
X
Y4.06.08.8
9.69.8
X
Y甘氨酸分子=75.07;0.2M溶含15.01克/升。13硼砂-氧化钠缓冲液(0.05M硼根)X毫0.05M砂+Y毫0.2NNaOH水稀释至毫9
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