安捷伦1200标准操作规程

Agilent1200液相色谱仪操作规程设备组成:G13nA（四元泵）、G1329A（标准型自动进样器IG1316A（柱温箱IG1314B（VWD检测器）、G1315D（DAD检测器）。基本操作步骤：（一）、开机：1、打开计算机，进入WindowsXP画面。（IP地址由BootpService程序写入）2、打开1200LC各模块电源。3、待各模块自检完成后,双击“仪器1联机”图标，或（点击屏幕左下角的“开始”，选择“程序”，选择“AgilentChemstation”,选择“仪器1联机”）化学工作站自动与1200LC通讯,进入的工作站画面如下所示.视图”，使其命令前有“v”标志，来调用所需的界面。5、把流动相放入溶剂瓶中。6、手动旋开冲洗阀。7、点击“泵"图标，点击“设置泵”选项,进入泵编辑画面。8、设流速：3-5ml/min，点击“确定”。9、点击“泵”图标，点击“控制”选项，选中“启动"，点击“确定”,则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。若使用缓冲盐，要加入泵头冲洗（seal-wash），点击“泵”图标点击“控制”选项，选择“用于泵密封垫清洗的泵"，开启清洗泵前要配制90%水+10%异丙醇，溶剂不能干涸.10、点击“泵"图标,点击“控制”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，手动旋紧冲洗阀。11、点击“泵”图标，点击“设置泵选项”，设流速：1。0ml/min。12、点击泵下面的瓶图标，选择“溶剂瓶添充量”如下图所示（以四元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积，点击“确定”。

从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项,如下图所示选中除“数据分析”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。

2、方法信息:在“方法注释”中加入方法的信息(如Thisisfortest!)。点击“确定”，进入下一画面。AFCDELAY.5BATCH.5DEF_LC.SDGNOISE.5IN5TPERF.5LOADTEST.SROBUST.5ROUTINES5EQ□□匚,55EQSUM.55TATI5T.5-|g|x||方法|也AFCDELAY.5BATCH.5DEF_LC.SDGNOISE.5IN5TPERF.5LOADTEST.SROBUST.5ROUTINES5EQ□□匚,55EQSUM.55TATI5T.5-|g|x||方法|也方法和运行控制数据分析报告版面设计藏0I方法信息：仪器1a矗S矗矗Ba豆BB盘方法注释值)(00,.PV)在“流速”处输入流量，如1。5ml/min，停止时间：10min。在“溶剂B”处输入70.0仆=100卫一C—D)，也可“插入”一行“时间表”，编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。点击“确定"，进入下一画面。

-|g|x|浜仪器1(联机)：方法和运行控制-|g|x|文件(F)运行控制(R)仪器⑴方法(M)序列(5)视图缶)中断(A)帮助(H)DEFLC.M▼序列DEFLC.M方法和运行控制方法和运行控制未就绪上次运行0.0流速逐)|1.500ml/min停止时间⑹| 10.00—|min后运行时间CF)关闭JminA：30.0(WaterB:[70-0'%JIwZthZZI-控制I-溶剂设置泵：仪器1-压力限一上限(X):|400bar下限⑻：方法和运行控制方法和运行控制未就绪上次运行0.0流速逐)|1.500ml/min停止时间⑹| 10.00—|min后运行时间CF)关闭JminA：30.0(WaterB:[70-0'%JIwZthZZI-控制I-溶剂设置泵：仪器1-压力限一上限(X):|400bar下限⑻：|0bar厂时间表⑹追加㈤剪切on报告版面设计体积1。序列模板|方法|7序列：DEF_LCS诅囱卢|AQ2方法：DEF_LCM.遵AFCDELAY.5…密BATCH.5遑DEF_LC.S・塞DGFdOISE.S•…墨IN5TPERF.5LOADTEST.5•…理ROBU5T.5・塞ROUTINE.5■■"SSEQDOC.5•密5EQ5UM.5STATIST.5方法和运行控制数据分析■证(口Q/PV)Xdd

%%

闭闭

美美

cD“标准进样”—--—只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“洗针进样”-—-—可以输入进样体积和洗瓶位置,此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针.“使用进样器程序”---可以点击“编辑"按钮进行进样程序编辑。点击“确定”，进入下一画面。

5、柱温箱参数设定：在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如:40度。并选中它，点击“更多信息〉〉”键,如图所示,选中“与左侧相同”，使柱温箱的温度左右一致.点击“确定”，进入下一画面。

B•，遒奇旦飞〜仪器1（联机）：方法和运行控制6、VWD检测器参数设定：…n “仅.BusyB•，遒奇旦飞〜仪器1（联机）：方法和运行控制6、VWD检测器参数设定：…n “仅.Busy5@零两面圆到矛篝不722:41-方技和运行控制数据分析报告版面谩计USECoq/pv)在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm，在“峰宽（响应时间）”下方点击下拉式箭头，选择合适的响应时间，如〉0。1min（2s）.G1314B:最快采样速率13.74HZ。在“时间表”中可以“插入”一行，输入随时间切换的波长，如1min，波长=300nm。点击“确定”，进入下一画面。

-\s\x|检测波长：254nm，带宽=4nm，参比波长=360nm，带宽=100nm-\s\x|浜仪器1(联机)：方法和运行控制文件(F)运行控制(R)仪器⑴方法(M)序列⑸视图(V)中断g)帮助(H)[.5|方法电5北向LC^i ，样品带宽:一般选择最大吸收值一半处的整个宽度.序列模板|方法|乳数据分析苦AFLDELA'Y-.h程BUTCH3琨DEF_LC.S-蠢DGNOISE.S・系ir-JSTPERF.5・矗LOADTEST.5-蠢ROBUST.S•盘ROUTir-JE.5・琨5EQDOC.S-翟SEQSUM.5■^STATIST.SU方法和运行控制版面设计Ready存储样品，带宽参比，带宽序列模板|方法|乳数据分析苦AFLDELA'Y-.h程BUTCH3琨DEF_LC.S-蠢DGNOISE.S・系ir-JSTPERF.5・矗LOADTEST.5-蠢ROBUST.S•盘ROUTir-JE.5・琨5EQDOC.S-翟SEQSUM.5■^STATIST.SU方法和运行控制版面设计Ready存储样品，带宽参比，带宽「时间一停止时间出)无限制vjmin后运行时间郎)关闭vjmin-所需的灯(Q)—F紫外F可见「光谱Q回应时间)讨)]>口,1min但s)而I™I™画画存储⑻：氏 3范围⑹：画厂到回厂mn步长： 即L⑪阈值CL)：[TorrmAu时间表仃)|总行数：0|确定9)|取消I帮助QD]自动平衡(5)河预运行厂后运行厂负吸光度极限血)一|[100mAU三]检测波长：一般选择最大吸收处的波长。与■◎却濯勘国0©/警422:56参比波长:一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。峰宽（响应时间）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。狭缝—狭缝窄，光谱分辨率高;宽时，噪音低.同时可以输入采集光谱方式,步长，范围，阈值。选中所用的灯。10、在“运行时选项表”中，选中“数据采集"，点击“确定”。11、从“方法”菜单，选中“方法另存为"，输入一方法名，如“测试”，点击“确定”。12、从“视图”菜单中，选中“在线信号”，选中“信号窗口1”,然后点击“改变”钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定”。（如同时检测

二个信号，则重复10，选中“信号窗口2”。）13、从“运行控制”菜单中，选择“样品信息"选项，如下图所示，输入操作者名称,如“安装工程师";在“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”。区别:手动--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。前缀/计数器—-—-“前缀”框中输入前缀，在“计数器”框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd数据0001,vwd数据0002。点击“确定”，从“仪器"菜单选择“启动系统"。等仪器准备好，基线平稳，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”，进样.（若无自动进样器，则基线平稳后，进样并搬动手动进样阀，启动运行。）（三）、数据分析方法编辑:1、从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面.2、从“文件”菜单选择“调用信号”,选中您的数据文件名，如下图所示。点击“确定”,则数据被调出。3、做谱图优化：

从“图形”菜单中选择“信号选项",如下图所示。从“范围”中选择“满量程”或“自动量程”及合适的时间范围或选择“自定义量程”调整.反复进行，直到图的比例合适为止。点击“确定”。4、积分:从“积分”菜单中选择“积分事件"选项，如下图所示.选择合适的“斜率灵敏度”,“峰宽"，“最小峰面积”，“最小峰高”。从“积分”菜单中选择“积分”选项，则数据被积分。如积分结果不理想，则修改相应的积分参数,直到满意为止。点击左边“V”图标，将积分参数存入方法。

数据分析 ；△TGC:\CHEM32\1\DATA心口DEMO手动积分事件数据分析切能撤去模式标准拖尾峰撒去高度比cion前伸崎撤击高度比0.00撤去峰裕比20.00基线校正经典对所有信号:积分事件数值TDAD1A,Si9=254.4Ref=550,100(DEMOW5-0101.D)数据分析 ；△TGC:\CHEM32\1\DATA心口DEMO手动积分事件数据分析切能撤去模式标准拖尾峰撒去高度比cion前伸崎撤击高度比0.00撤去峰裕比20.00基线校正经典对所有信号:积分事件数值TDAD1A,Si9=254.4Ref=550,100(DEMOW5-0101.D)LEqLr--L、J0R英B•，遒4飞多IAll域省'三1事件表EIReady1积分完成口些巨训@色与底。噌»||KD…|图1…用1…|用C…|曰C.J席正 因不乱臀❹西鱼圆牙照&23:215、打印报告：从“报告”菜单中选择“设定报告"选项。点击“定量结果”框右侧的黑三角，选中“面积百分比”，其它选项不变。点击“确定”。从“报告”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告”底部的“打印”钮。（五）、关机:1、关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。2、退出化学工作站，依提示关泵，及