原辅料药的含量测定技术-仪器分析定量技术（兽药检测技术）

电化学分析定量技术兽药检测技术电位分析法是电化学分析法的一个重要组成部分。电化学分析法是利用物质的电学和电化学性质进行分析的一类方法，主要包括在原电池内进行的电位分析法和在电解池内进行的库仑分析法、极谱分析法、电解分析法等。电位分析法是将指示电极和参比电极插入待测溶液中组成化学电池，在零电流的条件下，通过测定电池的电动势，进而求得溶液中待测组分含量的方法。电位分析法包括直接电位法和电位滴定法。一、电位分析法概述二、参比电极和指示电极兽药检测技术电位分析法中，电位已知并基本保持不变的电极称为参比电极，其电位不受溶液中待测离子活（浓）度的影响。常用的参比电极有：①甘汞电极②银-氯化银电极1.参比电极电化学分析定量技术二、参比电极和指示电极兽药检测技术电位分析法中，电极电位随溶液中被测离子活（浓）度的变化而变化，并能指示待测离子浓度的电极称为指示电极。常用的指示电极有：①金属基电极

②膜电极2.指示电极电化学分析定量技术三、电位滴定法兽药检测技术电位滴定法是利用电极电位的突跃来指示滴定终点的到达。测定过程中，将参比电极和对待测离子或滴定剂有响应的指示电极插入待测溶液中，随着滴定剂的滴入，待测离子的浓度不断发生变化，指示电极的电位也在不断变化，在化学计量点附近，待测离子浓度发生突变，电池的电势也发生突变。通过一定的数据处理方法，可以得到突跃点时滴定液的准确用量，据此可以计算待测组分的含量。

1.原理电化学分析定量技术三、电位滴定法兽药检测技术2.电位滴定仪电化学分析定量技术兽药检测技术3.滴定终点确定方法电化学分析定量技术

作两条与滴定曲线成45o倾斜的切线，在两条切线间作一垂线，通过垂线的中点作切线的平行线，与曲线相交的点为曲线的拐点，即为滴定的终点。（1）E-V曲线法——拐点为滴定终点兽药检测技术3.滴定终点确定方法电化学分析定量技术曲线上存在着极值点，该点对应着E-V曲线中的拐点。（2）ΔE/ΔV-V曲线法——极值点为滴定终点兽药检测技术3.滴定终点确定方法电化学分析定量技术（3）Δ2E/ΔV2-V曲线法（二级微商法）——零点为滴定终点四、永停滴定法兽药检测技术1.原理电化学分析定量技术永停滴定法又称双电流滴定法，是电位滴定法的一个特例。将2支相同的指示电极（铂电极）插入待测溶液中，在两电极间外加一小电压（10～100mV），然后进行滴定。观察滴定过程中电解电流的变化以确定终点。四、永停滴定法兽药检测技术2.永停滴定电流变化示意图电化学分析定量技术图4-8永停滴定过程中电流的变化示意图四、永停滴定法兽药检测技术3.操作方法电化学分析定量技术取供试品适量，精密称定，置烧杯中；除另有规定外，可加水40mL与盐酸溶液（1→2）15mL，置电磁搅拌器上，搅拌使溶解；再加溴化钾2g；插入铂-铂电极；将滴定管的尖端插入液面下约2/3处；用亚硝酸钠迅速滴定，边滴定边搅拌；至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，然后缓慢滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。

电位滴定法测定苯巴比妥的含量

巴比妥类药物结构中含有丙二酰脲母核，能发生银盐反应，即与硝酸银反应产生一银盐和二银盐。本测定即利用产生的可溶性的一银盐与难溶性的二银盐之间电位的突变确定滴定终点。兽药检测技术原理电位滴定法测定苯巴比妥的含量（1）仪器

电子天平、自动电位滴定仪，滴定管（10mL），烧杯（250mL），量筒（50mL）。（2）试剂

苯巴比妥，硝酸银滴定液（0.1mol·L-1），甲醇（A.R），无水碳酸钠溶液（3%）。兽药检测技术仪器与试剂电位滴定法测定苯巴比妥的含量

取苯巴比妥供试品约0.2g，精密称定，加甲醇40mL使溶解，再加新制的3%无水碳酸钠溶液15mL，照电位滴定法，用硝酸银滴定液（0.1mol·L-1）滴定。每1mL硝酸银滴定液（0.1mol·L-1）相当于23.22mg的C12H12N2O3。兽药检测技术检查方法电位滴定法测定苯巴比妥的含量兽药检测技术数据记录与报告样品名称：样品批号：日期：温度（℃）：湿度（%）：天平型号：自动电位滴定仪型号：测定次数123供试品的量m，g

滴定液的体积V，mL

含量

含量平均值

相对平均偏差

结果判定：含量计算公式：检验依据：检验人：复核人：电位滴定法测定苯巴比妥的含量

（1）无水碳酸钠溶液需临用前配制，否则因吸收空气中的二氧化碳产生碳酸氢钠，将使含量偏低。

（2）银电极在临用前需用硝酸浸洗1-2min，再用水淋洗干净后使用。兽药检测技术注意事项磺胺对甲氧嘧啶的含量测定（永停滴定法）

磺胺对甲氧嘧啶分子结构中含有芳伯氨基，能与亚硝酸钠在酸性条件下发生定量的重氮化反应，用永停滴定法控制滴定终点。兽药检测技术原理磺胺对甲氧嘧啶的含量测定（永停滴定法）（1）仪器

电子天平，托盘天平，永停滴定仪，滴定管（25mL），烧杯（250mL）。（2）试剂

磺胺对甲氧嘧啶，溴化钾，亚硝酸钠滴定液（0.1mol·L-1），盐酸溶液（1→2）。兽药检测技术仪器与试剂磺胺对甲氧嘧啶的含量测定（永停滴定法）

精密称定磺胺对甲氧嘧啶约0.5g，置于250mL烧杯中，加盐酸溶液（1→2）20mL后，置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，加水50mL，放冷。称取溴化钾2g，加入上述溶液中，插入铂-铂电极，调整装置高度，使滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol·L-1）迅速滴定，直至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。每1mL亚硝酸钠滴定液（0.1mol·L-1）相当于28.03mg的C11H12N4O3S。兽药检测技术检查方法磺胺对甲氧嘧啶的含量测定（永停滴定法）兽药检测技术数据记录与报告样品批号

样品名称

日期：温度（℃）：湿度（%）：天平型号

仪器编号

检验依据：滴定液名称：滴定液浓度：测定次数123供试品质量m，g

滴定液初读数，mL

滴定液终读数，mL

滴定液消耗体积V，mL

供试品含量，%

含量平均值，%

相对平均偏差，%

含量计算公式：标准规定：结果判定：检验人：复核人：磺胺对甲氧嘧啶的含量测定（永停滴定法）

（1）电磁搅拌器的搅拌速度要适宜，速度太快易打破烧杯，速度太慢，增加测定时

（2）污染的电极会使终点变化迟钝，应预先进行处理。处理方法是：将电极插入10mL含1滴三氯化铁的浓硝酸溶液中，煮沸数分钟，取出后用水冲洗干净。兽药检测技术注意事项气相色谱和高效液相色谱定量技术兽药检测技术色谱法因具有强大的分离功能，并且在分离的同时能够进行定量测定，在药物含量测定中应用越来越广泛。用于定量参数为峰高或峰面积。在一定的色谱操作条件下，流入检测器的待测组分i的量mi（质量或浓度）与检测器的响应信号（峰面积A或峰高h）成正比：一、色谱法定量依据mi=fiAimi=fhihi二、色谱法定量分析方法兽药检测技术外标法中所用标准物质是待测组分的纯品。药典中许多药物的含量测定均采用了高效液相色谱外标法。在相同操作条件下，配制供试溶液和一个与被测组分含量相近的标准溶液，分别取等量的标样和试样进行色谱分析，比较两色谱图中待测组分的峰值，求出待测组分的含量。

1.外标法气相色谱和高效液相色谱定量技术二、色谱法定量分析方法兽药检测技术外标法不需要测定校正因子，操作简单、计算方便、应用广泛，但所需标准物质的纯度高，而且要严格控制操作条件及进样量，否则结果不准确。

1.外标法气相色谱和高效液相色谱定量技术二、色谱法定量分析方法兽药检测技术内标法需要选择合适的内标物。内标物必须满足以下几个条件：试样中不存在的纯物质；其色谱峰应位于待测组分色谱峰附近或几个待测组分色谱峰之间，并与待测组分完全分离；不与样品发生反应。准确称取m（g）试样，加入ms（g）内标物，配成混合试液进样，记录色谱图。根据待测组分i和内标物s的质量和相应的峰面积，计算待测组分的含量

。

2.内标法气相色谱和高效液相色谱定量技术二、色谱法定量分析方法兽药检测技术内标法不受进样量、操作条件以及不同操作者进样技术的影响，定量准确，但选择合适的内标物有一定困难，且需要测定待测组分和内标物的校正因子，比较费时。2.内标法气相色谱和高效液相色谱定量技术二、色谱法定量分析方法兽药检测技术如果试样中所有组分均能流出色谱柱，并在检测器上都有响应信号，都能出现色谱峰，可用此法计算试样中各待测组分的含量。3.归一化法气相色谱和高效液相色谱定量技术二、色谱法定量分析方法兽药检测技术归一化法简便、准确，进样量多少不影响定量的准确性，仪器及操作条件的变动对结果的影响也较小，尤其适用多组分的同时测定。但要求试样中所有组分必须均能流出色谱柱并出峰，即使不必定量的组分也必须能测出峰面积，且所有组分的校正因子均需测定。

3.归一化法气相色谱和高效液相色谱定量技术色谱法工作站定量计算兽药检测技术

1.定量分析依据

组分的浓度（c）与峰面积（A）呈正比色谱法工作站定量计算兽药检测技术

外标法2.计算原理色谱法工作站定量计算例：对照品溶液发浓度为459μg/mL，供试品溶液峰面积为1931143，对照品溶液峰面积为1701394，求供试品溶液的浓度。兽药检测技术

紫外-可见吸收光谱定量技术兽药检测技术紫外-可见分光光度法用于定量分析时通常有三种方法：吸收系数法、对照品比较法、工作曲线法。在药物含量测定中前两种使用频率较高。紫外-可见吸收光谱定量技术一、吸光系数法兽药检测技术将供试品按规定方法配制成供试液，在规定波长处测量其吸光度。利用被测组分的吸光系数计算供试品中被测组分的含量。

紫外-可见吸收光谱定量技术二、对照品比较法兽药检测技术按各品种项下规定的方法，分别配制供试液和对照液，并在规定的波长处测定吸光度A。配制溶液时，对照液中所含被测成分的量应为供试液中被测成分规定量的100%±10%，所用溶剂也应完全一致。紫外-可见吸收光谱定量技术三、标准曲线法兽药检测技术对照法采用单点比较，为减小误差可以采用多点比较，即先以标准品配制成一系列浓度不同的标准溶液，在相同条件下，分别测定其吸光度，然后以标准溶液的浓度c为横坐标、相应的吸光度A为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线，即A-c曲线，若符合朗伯-比尔定律，可获得一条通过原点的直线，称为标准曲线或工作曲线。再在相同条件下配制供试液并测出吸光度，从标准曲线上查出该吸光度对应的供试液中待测组分的浓度。

紫外-可见吸收光谱定量技术三、标准曲线法兽药检测技术实际应用时应注意以下几个问题：①绘制一条标准曲线至少要5至7个点；②供试液的浓度应在标准曲线浓度范围内；③供试液和标准溶液必须使用相同的溶剂系统和显色系统，并在相同条件下进行测定；④仪器更换元件、维修或重新校正波长时，必须重新绘制标准曲线。采用标准曲线法进行测定时，只能使用曲线的线性范围，否则将产生较大误差。紫外-可见吸收光谱定量技术三、标准曲线法兽药检测技术对乙酰氨基酚的含量测定（吸收系数法）

将对乙酰氨基酚按规定方法配制成供试液，在规定波长257nm处测量其吸光度。利用对乙酰氨基酚的吸光系数为715计算乙酰氨基酚供试品中乙酰氨基酚的含量。兽药检测技术原理对乙酰氨基酚的含量测定（吸收系数法）（1）仪器

分析天平，紫外-可见分光光度计，移液管（5mL），容量瓶（250mL,100mL），量筒（50mL、10mL）。（2）试剂

对乙酰氨基酚（供试品），氢氧化钠溶液（0.4%）。兽药检测技术仪器与试剂对乙酰氨基酚的含量测定（吸收系数法）

取本品约40mg，精密称定，置250mL量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50mL溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5mL，置100mL量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10mL，加水至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在257nm的波长处测定吸光度，按C8H9NO2的吸收系数（）为715计算，即得。兽药检测技术检查方法对乙酰氨基酚的含量测定（吸收系数法）兽药检测技术计算公式对乙酰氨基酚的含量测定（吸收系数法）兽药检测技术数据记录与报告样品名称：批号：日期：温度（℃）：湿度（%）：检查项目

检验依据《中国兽药典》（2020版，一部）天平型号

紫外可见分光光度计型号

供试品取样量

吸光度测定值

标准规定

结论□符合规定□不符合规定检验者：校对者：审核者：水中微量铁的含量测定（标准曲线法）

邻二氮菲（1，10-菲罗琳），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。在pH2-9范围内（一般控制在5-6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物，Fe3+与邻二氮菲作用生成蓝色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe3+还原为Fe2+。兽药检测技术原理水中微量铁的含量测定（标准曲线法）（1）仪器

紫外-可见分光光度计，容量瓶（50mL），吸量管（10mL），量筒（10mL、5mL）。（2）试剂

水样，铁标准储备溶液（100ug/mL），铁标准使用液（10ug/mL），盐酸羟胺10%（新鲜配制），邻二氮菲溶液0.1%（新鲜配制），HAc-NaAc缓冲溶液（pH=5）。兽药检测技术仪器与试剂