银杏叶中银杏黄酮大孔树脂吸附分离性能研究报告

个人资料整理仅限学习使用个人资料整理仅限学习使用银杏叶中银杏黄酮大孔树脂吸附分别性能的争论近年来,整个世界特别是西方兴旺国家掀起了一阵绿色浪潮。国际上渐渐形成了一种共识---得自绿色生命(植物>的产品往往具有较大的安全性。银杏作为近代植物药开发争论的热点之一,正处于这一浪潮的前沿。银杏树为银杏科植物银杏(Ginkgobiloba.L.>又名公孙树,为我国特产植物.银杏叶提取物(GRE>主要含黄酮,内酯两类活性成分,黄酮以山柰酚(kaempferal>,槲皮素(quercetin>,异鼠李素(isorhamnetin>的甙类化合物为主,内酯以白果内酯及银A.B.C(gimkgolideA.B.C>为主。银杏黄酮具有捕获游离基,抑制血小板活化因子(PFA>扩张冠动脉血管,增加心脑血量等成效。可用于治疗由于血管老化,脑血管供血缺乏所导致的外周循环不良,眩晕,耳鸣,头痛失眠,短期记忆不良听力障碍,精神不振等,同时,还可以用于研制养分口服液,保健食品与化装品,其应用日益广泛有关银杏提取方法报道很多,德国首先提出银杏制剂含量的质量标准:黄酮糖甙≥24%萜内酯≥6%和白果酸≤2×10-6。为了是银杏产品能出口创汇,参与国际市场的大循环,不断探究的提取方法工艺,争论并选择出简洁且高效的工艺方法以成为这个领域的焦点。目前有关银杏叶的提取工艺主要以乙醇为提取溶剂，由于乙醇系有机溶附树脂吸附分别性能争论，以期为银杏叶银杏黄酮的开发利用供给依据。材料与仪器材料银杏叶(采自陕西略阳>，自然枯燥，粉碎。试剂银杏黄酮比照品(含量≥98%>：购自Sigma公司。大孔树脂LX-、D101，AB-8购自西安蓝小科技开发。试剂均为分析纯。(H·H·S21-6C，上海医疗器械五厂>。电子分析天平(FC204，上海精科实业>。UV-762紫外分光光度计(上海周密科学仪器>。旋转蒸发器(上海亚蓉生化仪器厂>。SHZ-D(Ⅲ>循环水式真(FZ102，天津市泰斯特仪器>方法银杏叶银杏黄酮的薄层检测硅胶薄板制作0.5%12ml，研15min后铺于20×10cm的干净玻璃平板上，要求平坦无气泡，然后晾干即可。开放剂配制2：1：160ml<30：15：15〕作为开放剂。10530min。点样：点样点距板子底端1.5cm左右，全部点样点位于同始终线上，尽可能向20μl，点样点尽可能小。饱和：将板子不没入层析缸内的展层剂中，在展层剂的蒸气中饱和约0.5h。层析：将板子下端插入展层剂中进展开放，当展层剂前沿距板子上端约1.5cm观看：开放取出晾干后，喷5%Alcl3的乙醇溶液，热风吹干、并在365nm荧光灯下观看。Rf 。硅胶薄板制作0.5%的羧甲基纤维素钠溶液12ml，研磨15min后铺于20×10cm的干净玻璃平板上，要求平坦无气泡，然后晾干即可。开放剂配制50ml<35：15〕作为开放剂。10530min。点样：点样点距板子底端1.5cm左右，全部点样点位于同始终线上，尽可能向20μl，点样点尽可能小。饱和：将板子不没入层析缸内的展层剂中，在展层剂的蒸气中饱和约0.5h。层析：将板子下端插入展层剂中进展开放，当展层剂前沿距板子上端约1.5cm时取出板子，自然晾干。观看：先喷细水雾定位后170℃加热30分钟，假设有银杏内酯存在，在波长BRf=0.23左右。络合分光光度法测定银杏黄酮的含量标准曲线的制备准确秤取芸香叶甙rutin<芦丁〕30mg，用30%乙醇溶液溶解并定容至100ml<含量为0.30mg/ml〕分别吸取标准液1、3、5、7、9ml于25ml容量瓶12.5ml,0.7mlNaNo2(1:20>,5分钟后，参加5ml1mol/LNaoH溶液并摇匀,30%的毫升013579浓度值(mg/ml>00.0120.0360.060毫升013579浓度值(mg/ml>00.0120.0360.0600.0840.108OD值样品的制备及测定2克银杏叶粉碎至粉末,150ml甲醇热回流至回流液无色，减压浓缩至小体积、定容至150ml，摇匀待测，从中移取5ml25mlUV-265紫外测定其浓度。30%100ml。结果标准曲线如下:测定结果：大孔树脂静态吸附试验型号 极性LX-38LX-1D101AB-8树脂的处理和再生：

比外表积/(m2/g> 孔径/nm1moL/LNaOH4h，用蒸0.5moL/LHCl3h，用蒸馏水洗至中性。用水浸泡待用。树脂简洁再生可用含量为95%的乙醇洗至无色，即可使用，经屡次使用的树脂吸附杂质较多，颜色较深，可用酸碱处理再生后使用。银杏叶样液制备75%30min4层纱布粗滤得粗滤液，残渣再参加500ml75%酒精超声提取30min，用4层纱布粗滤得粗滤液，合并两次粗滤液，在用滤纸或离心过滤得银杏叶提取液。65400ml进展水沉，静置过夜，次日下层为油状膏子保存备检，上层液过滤并定容至400ml，得银杏叶样液<g/ml〕。饱和吸附量的测定准确称取经预处理的用滤纸吸干外表水分的树脂1.00g于100ml三角瓶mg/ml20.0ml25℃，120r/min的条。测定吸附后溶液中银杏黄酮的量，并按下式计算树脂的饱和吸附量。饱和吸附量=(参加的银杏黄酮-未吸附的银杏黄酮>/树脂的量。树脂脱附率的测定24h静态吸附银杏黄酮的树脂分别出来，吸干外表水分，然后70%20.0ml25℃，120r/min2h。测定脱附液中银杏黄酮的量，按下式计算脱附率。脱附率(%>=洗脱出的银杏黄酮/(-未吸附的银杏黄酮>×100%。型号LX-38LX-1型号LX-38LX-1D101AB-8吸附量/(mg/g>解吸率/%树脂要求不仅要求吸附量大，而且要求解吸率要高，以保证有效成分的最大回收。在这2种树脂中树脂不仅具有大的吸附量，而且具有较高的解吸率，因此认为树脂是富集纯化银杏黄酮较为抱负的吸附材料。大孔吸附树脂解吸特性的考察5份,20mL15%、30%、45%、60%和75%的乙醇溶液进展解吸,计算不同浓度乙醇溶液对银杏黄酮的解吸率。洗脱剂浓度解吸率%15%30%45%60%洗脱剂浓度解吸率%15%30%45%60%75%将表做图图洗脱剂浓度对银杏黄酮解吸的影响由图可以看出，60%的洗脱液根本上可以将银杏黄酮完全从树脂上解吸下来，从纯化的纯度角度和节约试剂用量的角度考虑，应选用60%乙醇作为洗脱剂，没有必要使用75%的乙醇作为洗脱剂。pH对树脂吸附效果的影响51.0g，装入2mol/L2mol/LpH值18-24h，测定吸附后溶液中银杏黄酮的量。pHpH值3.54.55.56.57.5吸附量将表做图由图可以看出,之间,树脂对银杏黄酮的吸附量是最大的,由于银杏叶黄酮类化合物分子中含有酚羟基、羧基,呈弱酸性,酸性化合物在酸性溶液中易吸附。此外,酸性条件下有利于葡萄糖苷型异黄酮水解成苷元型,更简洁被树脂所吸附。酸性太强,,,会使异黄酮的亲水性增加,从而使吸附量下降。大孔树脂动态吸附试验动态吸附透过曲线的测定流出液体积ml流出液浓度mg/ml5010015020025030016mm×300mm的玻璃层析柱作为吸附柱，称取预处理好的树脂20g，湿法装柱，取银杏叶样液<g/ml〕300mL，用2mol/L的2—3流出液体积ml流出液浓度mg/ml50100150200250300将表做图由图可以看出100mL时,原料液中银杏黄酮开头透过树,200mL时,树脂柱到达饱和吸附。动态脱附解吸曲线测定洗脱剂体积ml流出液浓度mg/ml204060801001202mol/L的盐酸将银杏黄酮供试液pH2-3mL/min300mL，上样完毕洗脱剂体积ml流出液浓度mg/ml20406080100120将表做图由图可以看出,100mL75%的乙醇进展洗脱,可根本上将银杏黄酮完全解吸下来,洗脱峰集中、对称,无明显拖尾现象,起到了很好的富集和回收的作用。2.4.2洗脱产物中银杏黄酮纯度的测定<由上述试验确定方案〕分别用45%、60%和75%的乙醇作为洗脱剂，按前面的做法装柱、上样、45%75%200