肿瘤继承性免疫治疗DecJN

肿瘤继承性免疫治疗DecJN第一页，共九十一页，编辑于2023年，星期一全球癌症趋势今后20

年全球新患人数每年1000万→1500万死亡人数每年600万→1000

万

18thInternationalCongressonAnti-Treatment,Paris,2007第二页，共九十一页，编辑于2023年，星期一中国癌症趋势

2000年发病约180-200万死亡140-150万0～64岁人口中，1/4死于癌症

中国癌症预防与控制规划纲要（2004-2010）

第三页，共九十一页，编辑于2023年，星期一癌症的三大常规治疗１．手术---破冰船历史悠久手术本身的两面性：消除（降低）肿瘤负荷促进转移的倾向难以清除肿瘤微小转移灶很多患者就诊时已失去手术最佳时机第四页，共九十一页，编辑于2023年，星期一癌症的三大常规治疗２．化疗---轰炸机肿瘤内科治疗的基石对肿瘤细胞的杀伤缺乏选择性损伤正常组织Goldie-Coldman假说及“一级动力学”理论：化疗对数杀灭细胞，不可能彻底清除肿瘤细胞第五页，共九十一页，编辑于2023年，星期一癌症的三大常规治疗1898年发现镭镭用于治疗肿瘤放疗有效破坏或消灭癌细胞，甚至可以治愈部分肿瘤放疗损伤机体正常细胞，降低机体免疫力

3．放疗---太阳能第六页，共九十一页，编辑于2023年，星期一肿瘤治疗的现状靶向药物靶向药物肿瘤生物治疗是进一步提高疗效的很有前景的方法第七页，共九十一页，编辑于2023年，星期一目前癌症疗效的总体评估“近20年来，我国癌症死亡率上升了29%，……癌症治愈率(5年生存率)仍徘徊在20%-30%左右。其中肺癌仅10%，肝癌3%左右”。

--卫生部2006年《中国慢性病报告》“近30年来，晚期转移肿瘤5年生存率基本上没有改变。这主要是由我们目前肿瘤治疗不当和过度治疗造成的。”

--程书钧院士第八页，共九十一页，编辑于2023年，星期一癌症治疗的误区

注重肿瘤本身，想尽办法杀死肿瘤细胞体内正常细胞被错杀为什么要长肿瘤？

第九页，共九十一页，编辑于2023年，星期一癌症认识的误区只有确切了解癌症，才可能找到治愈的方法

重大突破通常来源于认识上的巨大转变细菌与感染的联系得到证实后，才意识到要治愈此类疾病便必须除去细菌。结果是促使抗生素的诞生，从而控制一系列的传染病第十页，共九十一页，编辑于2023年，星期一癌症治疗的困境与未来术后1年复发率达60%死于肿瘤复发和转移的人超过80%彻底消灭癌细胞及体内不再产生癌细胞的“根治”任务很可能落在生物治疗身上第十一页，共九十一页，编辑于2023年，星期一癌症治疗的生物疗法肿瘤生物免疫疗法成为最令人瞩目、最鼓舞人心的焦点，将成为21世纪人类攻克癌症具有战略意义的一个重要方面.

37-39届美国临床肿瘤学会（ASCO）

第7届中国抗癌协会临床肿瘤学协作专业委员会（CSCO）

第十二页，共九十一页，编辑于2023年，星期一Strength(优势)细胞免疫技术发展给成功的临床治疗带来可能性。科学家和临床专家全力发展此技术卫生部医政处也大力支持。己批准此临床技术,并核准收费标准Opportunity(机会)目前各研究所及医科大学各自为政地，并且各机构只有少量临床病例报道，因此给产业化，系统化发展带来可能。肿瘤生物治疗现状

Weakness(劣势)部分各科临床医师对此技术认知程度偏低广大病人对此知识一无所知Threat(威胁)各单位技术力量大小不一，并参差不齐，易造成混乱，阻滞此技术的临床健康发展。

第十三页，共九十一页，编辑于2023年，星期一政府全力支持

----卫生部文件国家发展改革委、卫生部、国家中医药管理局关于印发《全国医疗服务价格项目规范》新增和修订项目（2007年）的通知发改价格[2007]2193号新增项目

修订项目

第56条310800024

细胞因子活化杀伤（CIK）细胞输注治疗含药物加无血清培养基、体外细胞培养；

包括树突状细胞治疗(DC)次LAK细胞治疗酌情加收

第十四页，共九十一页，编辑于2023年，星期一政府全力支持

----卫生部文件

医疗技术临床应用管理办法

卫生部明确国家建立医疗技术临床应用准入和管理制度，对医疗技术实行分类、分级管理。

医疗技术分三类管理卫医政发(2009)18号第十五页，共九十一页，编辑于2023年，星期一癌症治疗的生物疗法肿瘤免疫的概念起源于本世纪初1909年Ehrlich首先提出，免疫系统不仅负责防御微生物侵犯，而且清除机体内改变了的宿主成分肿瘤生物免疫疗法已成为肿瘤治疗基础和临床研究的重要领域第十六页，共九十一页，编辑于2023年，星期一癌症生物治疗的分类---操作模式非细胞治疗抗体、多肽/蛋白质疫苗、基因疫苗、体内基因治疗等可以规模化生产有严格、均一的产品质量标准主要由制药公司开发细胞治疗采集患者自体细胞进行制备，再回输给患者无法规模化生产更适于在医疗机构开展，完成从采集、制备到回输的全过程第十七页，共九十一页，编辑于2023年，星期一正常机体免疫系统识别和清除突变细胞：免疫监视免疫逃逸的机理还不很清楚，但主要的机制与CD8+T细胞不能有效地清除肿瘤细胞有关第十八页，共九十一页，编辑于2023年，星期一肿瘤免疫治疗的三种新途径----针对肿瘤免疫逃逸增强免疫应答间接作用如抑制血管生成直接抑制肿瘤生长毒素放射性核素药物细胞介导免疫治疗过继性免疫细胞治疗供体淋巴细胞输注肿瘤疫苗第十九页，共九十一页，编辑于2023年，星期一限制肿瘤免疫应答的因素第二十页，共九十一页，编辑于2023年，星期一免疫均衡与免疫逃逸淋巴细胞因素肿瘤细胞因素第二十一页，共九十一页，编辑于2023年，星期一肿瘤过继性免疫治疗体外分离细胞APC（巨噬细胞、树突状细胞）T淋巴细胞自然杀伤（NK）细胞离体培养、扩增、活化细胞因子刺激抗原冲击基因修饰自体或(同种异体)回输诱发机体特异性抗肿瘤免疫第二十二页，共九十一页，编辑于2023年，星期一淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)树突状细胞（DC）共培养免疫细胞(DC-CIK)自然杀伤细胞型的淋巴细胞(NKT)肿瘤过继性免疫治疗第二十三页，共九十一页，编辑于2023年，星期一淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)树状突细胞（DC）双克隆免疫细胞(DC-CIK)肿瘤过继性免疫治疗第二十四页，共九十一页，编辑于2023年，星期一淋巴因子激活的杀伤细胞

lymphokine-activatedkillercells,LAK1980年，Rosenberg实验室首报荷瘤小鼠的脾脏淋巴细胞和肿瘤患者外周血淋巴细胞在含有IL-2的条件下，短期培养后可诱导出一种非特异性的杀伤细胞，能杀伤新鲜分离的实体瘤细胞和体外培养的多种肿瘤细胞目前尚未发现LAK细胞特有的表面标志LAK细胞的前体细胞是NK细胞和T细胞。第二十五页，共九十一页，编辑于2023年，星期一LAK的临床应用1984年Rosenberg研究组首次应用IL-2与LAK协同治疗25例肾细胞癌、黑素瘤、肺癌、肝癌/结肠癌等患者LAK细胞0.6～18.4×1010IL-22.8×105～3.3×106U/kg11例肿瘤缩小超过50％，1例黑色素瘤完全消退第二十六页，共九十一页，编辑于2023年，星期一LAK的临床应用1988年用IL-2与LAK细胞协同治疗222例16例转移灶完全消退26例肿瘤消退50％以上对转移性肾细胞癌、黑色素瘤、肝癌、结肠癌和非霍奇金淋巴瘤疗效较显著第二十七页，共九十一页，编辑于2023年，星期一LAK的临床应用乳腺癌、膀胱癌局部联用IL-2也获得明显疗效由于IL-2用量大，一些病例出现较大毒副反应第二十八页，共九十一页，编辑于2023年，星期一异体LAK：采用抗原性较弱的5个月以内胎儿的脾细胞、肝细胞和胸腺细胞体外诱导培养后具有很强的LAK细胞活性出现早而持久，不易引起移植排斥反应骨髓细胞用rhIL-2培养后有很强的LAK活性，比外周血来源者强而持久；胎儿脐血细胞经IL-2诱导后，LAK活性也明显强于成人。第二十九页，共九十一页，编辑于2023年，星期一淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)树状突细胞（DC）双克隆免疫细胞(DC-CIK)肿瘤继承性免疫治疗第三十页，共九十一页，编辑于2023年，星期一肿瘤浸润淋巴细胞

tumorinfiltratinglymphocyte,TIL

1986年Rosenberg研究组首先报道从肿瘤局部分离出TIL，加入高剂量IL-2体外培养，残存的肿瘤细胞7～13天全部死亡。从手术切下的肿瘤组织、肿瘤引流淋巴结、癌性胸腹水中获得淋巴细胞，加IL-2培养后，其生长、扩增能力强于LAK细胞14例转移性肺癌等晚期肿瘤患者,其中4例肿瘤缩小50％以上，副作用明显低于IL-2/LAK疗法。第三十一页，共九十一页，编辑于2023年，星期一肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）治疗转移性黑色素瘤2002.Science第三十二页，共九十一页，编辑于2023年，星期一2007年，法国热那亚大学细胞与基因治疗中心对用TIL+IL-2治疗过的Ⅲ期黑色素瘤进行了长期随访，发现经治疗过的只有一个淋巴结转移的患者其复发率明显低于对照组，总生存期也明显长于只用IL-2治疗的患者。肿瘤侵润性淋巴细胞第三十三页，共九十一页，编辑于2023年，星期一

2007年南京大学医学院附属南京市鼓楼医院肿瘤中心刘宝瑞等用快速制备自体肿瘤浸润淋巴细胞方法联合白细胞介素2胸腔输注治疗癌性胸腔积液、2001年江西省萍乡市人民医院肿瘤科用TIL/LAK治疗恶性浆膜腔积液38例等报道，他们发现经过TIL治疗后，患者生活质量明显提高,体力状况得到恢复，有效患者随访中治疗侧胸腔未再出现胸腔积液或胸腔积液量增加,治疗后除少数病例短时间内出现可耐受的低热及胸痛外,无一例出现其他不良反应。肿瘤侵润性淋巴细胞第三十四页，共九十一页，编辑于2023年，星期一淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)树状突细胞（DC）双克隆免疫细胞(DC-CIK)肿瘤继承性免疫治疗第三十五页，共九十一页，编辑于2023年，星期一细胞因子诱导的杀伤细胞Cytokine-inducedkillercell,CIK由-IFN、TNFa、CD3单抗、IL-1、IL-2等在体外诱导并大量扩增的具有杀伤肿瘤活性的细胞1991年斯坦福骨髓移植中心首先报道1994年Schmidt-wolf报道了体外大量增殖CIK细胞的方法。是目前国际上广泛应用的肿瘤免疫治疗手段第三十六页，共九十一页，编辑于2023年，星期一细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)第三十七页，共九十一页，编辑于2023年，星期一分2-3次静脉回输体内采集病人外周血单个核细胞加入多种细胞因子培养扩增、活化、诱导成为CIK细胞发挥抗肿瘤作用到达病变部位直接清除残存肿瘤细胞调节和增强全身免疫机能防止肿瘤复发及转移第三十八页，共九十一页，编辑于2023年，星期一CIK细胞的特点1）高增殖活性：培养第18-22天达顶峰；

CD3+CD56+细胞增加1000-6000倍；

28-30天达平台期，细胞毒活性亦达峰值2）高细胞毒力

CIK细胞的肿瘤细胞抑制指数为1.5-3.5，

LAK细胞为0.5-1.5；3）杀瘤谱广泛：非MHC限制性第三十九页，共九十一页，编辑于2023年，星期一4）细胞来源丰富正常或患者的骨髓单个核细胞或外周血单个核细胞、干细胞均可诱导获得CIK细胞；5）对多耐药性肿瘤细胞同样敏感6）不受免疫抑制剂CSA、FK506影响7）抵抗肿瘤细胞诱发的效应细胞Fas-FasL凋亡，细胞内表达抗凋亡基因和保护基因8）对正常骨髓前体细胞毒性很小第四十页，共九十一页，编辑于2023年，星期一256例各种中晚期肿瘤患者（乳腺癌、肺癌、肠癌、肝癌、胃癌、淋巴瘤等）1-4疗程CIK治疗部分缓解和轻度缓解为207例（80.86%）1年生存期为96.06%2年生存期为92.96%3年生存期为88.38%生存质量卡氏评分提高率为88.28%无心、肝、肾不良反应，仅数例有一过性发热，24小时即正常国内2003年报道第四十一页，共九十一页，编辑于2023年，星期一CIK细胞治疗癌性胸、腹水136例癌性胸水61例完全消失57例显著减少有效率86.8%83例癌性腹水26例完全消失44例显著减少有效率84.3%第四十二页，共九十一页，编辑于2023年，星期一1999年，德国柏林Freie大学Schmidtwolf等人报告用自身CIK细胞治疗10例肿瘤肿瘤患者，结果1例完全缓解，3例稳定。2005年，美国斯坦福大学医学中心LeembuisT等人用自身CIK（1×109-1010）治疗9例霍奇金氏淋巴瘤和非霍奇金氏淋巴瘤，结果2例部分缓解，2例稳定，5例无反应，无严重毒副作用。2007年，意大利卡利亚里骨髓移植中心用供者CIK细胞治疗11例恶性血液疾病，结果病人能够耐受治疗，有助于控制疾病复发。CIK细胞治疗第四十三页，共九十一页，编辑于2023年，星期一淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)树突状细胞（DC）双克隆免疫细胞(DC-CIK)肿瘤过继性免疫治疗第四十四页，共九十一页，编辑于2023年，星期一树突状细胞（dendriticcell,DC）应用负载肿瘤抗原的树突状细胞激发机体产生肿瘤特异性CTL有效地杀伤肿瘤细胞建立持久的抗肿瘤的特异性免疫应答第四十五页，共九十一页，编辑于2023年，星期一

DC研究历史美国学者Steinman及Cohn于1973年发现1992年Steinman建立了应用GM-CSF从小鼠骨髓中大规模培养制备DC的方法此后建立并完善了多种培养扩增DC的方法DC的研究得以深入第四十六页，共九十一页，编辑于2023年，星期一2009年，英国伯明翰英国癌症研究临床试验组的Palmer等人用肝癌细胞株溶胞产物致敏DC治疗35例晚期肝癌病人部分缓解和病情稳定者10例4例AFP明显下降7例T细胞对AFP有免疫反应DC细胞--近期研究第四十七页，共九十一页，编辑于2023年，星期一DC细胞的基本特征体内功能最强的抗原提呈细胞显著刺激初始型T细胞增殖机体免疫反应的始动者在免疫应答的诱导中具有独特的地位第四十八页，共九十一页，编辑于2023年，星期一DC对抗原的加工处理与提呈DC与T细胞接触表面的MHC-肽复合物被T细胞识别将抗原信息传递给T细胞——抗原提呈第四十九页，共九十一页，编辑于2023年，星期一树突状细胞与T细胞的作用第五十页，共九十一页，编辑于2023年，星期一脑以外的全身各脏器皮肤、肝、脾、骨髓、淋巴器官和外周血中仅占人外周血单个核细胞的1％左右外周血中有很多DC前体细胞，在体外诱导成DCDC的组织分布第五十一页，共九十一页，编辑于2023年，星期一第五十二页，共九十一页，编辑于2023年，星期一第五十三页，共九十一页，编辑于2023年，星期一肿瘤抗原致敏患者自身的树突状细胞制备成瘤苗(或细胞悬浮液)回输患者DC细胞治疗肿瘤的方案和途径第五十四页，共九十一页，编辑于2023年，星期一树突状细胞（DC）治疗流程图

收集患者外周血单个模细胞PBMC抗原致敏的DC体外细胞因子刺激回输给同一患者相关多肽致敏第五十五页，共九十一页，编辑于2023年，星期一树突状细胞（杀伤性T细胞）杀伤性T细胞机理第五十六页，共九十一页，编辑于2023年，星期一淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)树状突细胞（DC）共培养免疫细胞(DC-CIK)肿瘤继承性免疫治疗第五十七页，共九十一页，编辑于2023年，星期一共培养免疫细胞(DC-CIK)

共培养免疫细胞(DC-CIK)

树突状细胞(DC)+细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)

DC和CIK是肿瘤免疫治疗的两部分DC识别病原,激活获得性免疫系统CIK通过发挥自身细胞毒性与分泌细胞因子杀伤肿瘤细胞二者联合确保有效和谐的免疫反应之完成第五十八页，共九十一页，编辑于2023年，星期一共培养免疫细胞(DC-CIK)大容量体外CIK细胞扩增技术诱导CIK细胞按一定比例与DC细胞混合培养得到一种新的抗肿瘤免疫活性细胞群DC-CIK疗法拥有更强的增殖能力及特异性识别﹑杀伤肿瘤细胞之特性共培养免疫细胞(DC-CIK)

第五十九页，共九十一页，编辑于2023年，星期一2008年中国科学院生物物理研究所邓笑伟等用不同来源的CIK和DC联合治疗21例中晚期肺癌，结果CR2例,PR7例,SD5例,PD7例,有效率为42.9%,临床获益率(CR+PR+SD)为66.7%，细胞回输后主要不良反应为一过性发热。CIK-DC共培养细胞治疗第六十页，共九十一页，编辑于2023年，星期一Barry等（匹兹堡大学肿瘤研究所2003年）15例转移性乳腺癌回输NK细胞4例完全缓解，耐受性良好，无毒副作用NK细胞第六十一页，共九十一页，编辑于2023年，星期一Koehl等（德国法兰克福大学医院2004年）3例ALL干细胞移植病人NK细胞+IL-2治疗患儿能充分耐受NK细胞第六十二页，共九十一页，编辑于2023年，星期一Miller等（明尼阿波利大学肿瘤中心2005年）NK细胞联合CTX+Fludarabine治疗19例AML5例血液学完全缓解NK细胞第六十三页，共九十一页，编辑于2023年，星期一Arai等（芝加哥Risb大学医学中心2008年）同种异基因细胞系NK-92治疗12例晚期肾癌和黑色素瘤病人1例完全缓解，1例稳定，1例为混合反应NK细胞第六十四页，共九十一页，编辑于2023年，星期一Kobayashi等（东京女子医学大学2007年）自身γδT细胞治疗7例进展期肺癌治疗后患者γδT细胞明显增多无明显毒副作用。γδT

细胞第六十五页，共九十一页，编辑于2023年，星期一Bennouna等（2008年，法国）自身γδT细胞（8×109）+IL-210例转移性肾癌患者6例患者治疗后25.7周内病情稳定仅出现感冒样症状γδT

细胞第六十六页，共九十一页，编辑于2023年，星期一Okai等（澳大利亚昆土兰州医学研究所2002年）α半乳糖神经酰胺（α-galcer）荷载DC4例癌转移患者治疗后病人NKT细胞明显增多患者未出现不良反应NKT细胞

第六十七页，共九十一页，编辑于2023年，星期一Shikawa等（神奈川县千叶大学医院2005年）α-galcer荷载DC9例复发性非小细胞肺癌治疗后5例病情稳定未出现不良反应NKT细胞

第六十八页，共九十一页，编辑于2023年，星期一2008年，千叶大学医院α-galcer荷载DC9例头部肿瘤1例部分缓解4例稳定NKT细胞

第六十九页，共九十一页，编辑于2023年，星期一DC-CIK免疫治疗联合常规治疗方法治疗时机与方案联合治疗意义术后联合DC-CIK1.快速恢复手术造成的免疫损伤；2.特异清除术后残余肿瘤细胞；防治转移复发3.增强放疗敏感性，减少放疗毒副作用；4.抵抗化疗药物的免疫抑制作用；5.增强对化疗药物敏感性；6.支持骨髓功能衰竭后的免疫重建；放疗联合DC-CIK化疗联合DC-CIK常规治疗无效支持疗法第七十页，共九十一页，编辑于2023年，星期一DC-CIK治疗与常规治疗方法比较

治疗种类特点DC-CIK免疫治疗增强机体免疫功能增强放、化疗的敏感性清除微小病灶和残余肿瘤细胞无明显毒副作用手术局部快速切除肿瘤组织；见效快；微小病灶或转移病灶；放疗局部减少肿瘤负荷；见效快；不敏感细胞，复发根源；造成免疫损伤；化疗全身减轻肿瘤负荷；见效快；不敏感细胞，复发根源；毒副作用大，造成免疫损伤；第七十一页，共九十一页，编辑于2023年，星期一CD3AK细胞：免疫原性较强的肿瘤（具有T细胞受体（TCR）除外）CIK细胞：各种肿瘤，对低表达MHCⅠⅡ分子更有效γδT细胞：各种肿瘤，对呼吸系统、消化系统和生殖系统以及部分血液恶性疾病疗效好树突状细胞：成熟DC可与各种细胞联合应用，增强抗肿瘤免疫效果树突状细胞疫苗：可以预防和治疗相应的各种肿瘤NKT细胞：对消化系统尤其是肝癌和呼吸系统肿瘤以及头颈部肿瘤效果好NK细胞：对不表达MHC分子的肿瘤效果好巨噬细胞：Ⅰ型MФ具有一定的抗肿瘤作用，可一其他免疫细胞联合应用免疫细胞和细胞群抗癌谱第七十二页，共九十一页，编辑于2023年，星期一免疫联合治疗CIK细胞DC-CIK共培养细胞DC联合CIK细胞CD3AK细胞DC疫苗联合CIK、CD3AK细胞共刺激T细胞巨噬细胞联合CIK细胞肿瘤特异性T细胞联合NK、γδT细胞、NKT细胞……第七十三页，共九十一页，编辑于2023年，星期一细胞培养实验场所细胞培养场所条件:符合GMP要求按照《品质管理架构》之模式管理。

GTP细胞培养/治疗流程实验室管理流程生物安全实验流程消毒程序与周期流程维护和性能验证程序

设备3Q品质验证设备清洁和维护保养试剂、耗材的外购品质检测流程最终细胞产品检测流程:

用常规方法进行细菌和真菌培养试验用鲎试剂法进行内毒素检测用功能性杀瘤实验法进行杀伤活性检测用流式细胞仪进行表面标记检测用常规方法检测细胞总数、细胞存活率、特定生物活性效价第七十四页，共九十一页，编辑于2023年，星期一各种细胞回输方法培养细胞收集于离心瓶。2500rpm×8min，20℃

进行细胞计数、检查内毒素、细胞表型，将细胞重悬于自身血浆中，按照不同的细胞选择不同的回输方法。留样封存。0.9％注射用生理盐水2000rpm×8min×2次，20℃核对好病人姓名、性别、年龄、住院号、细胞数、无菌结果、病区及治疗项目第七十五页，共九十一页，编辑于2023年，星期一CIK细胞制备培养

用血液保养袋采集200ML外周血2000g×15min，20℃

75cm2培养瓶CIK培养液（含IFN-γ）第2天加混合细胞因子PMNC层CIK培养隔天扩瓶培养瓶内细胞收集、离心、洗涤回输第7天扩瓶后抽样送检（细菌培养和表型分析）第3天扩瓶培养留血浆50ML备用分离出6ml富含白细胞的血液淋巴细胞分离液第七十六页，共九十一页，编辑于2023年，星期一第10天培养瓶内DC细胞收集、离心、洗涤和回输第3天补充含半量细胞因子的培养基，并加肿瘤抗原第6天补充培养基，加TNF-，抽样送检（细菌培养和表型分析）75cm2培养瓶1640培养液2000g×15min，20℃

留血浆50ML备用分离出6ml富含白细胞的血液淋巴细胞分离液PMNC层用血液保养袋采集200ML外周血细胞贴壁120min贴壁细胞进行DC细胞培养方案悬浮细胞进行CIK培养方案树突状细胞制备流程第七十七页，共九十一页，编辑于2023年，星期一癌症生物治疗的优点1）应用范围广几乎可以应用于所有肿瘤患者。

2）对原发肿瘤转移肿瘤均有明显疗效

3）对于手术后的恶性肿瘤患者的残存肿瘤细胞的清除预防肿瘤的复发有着比化疗更明显的作用。

4）副作用小，目前仅发现有发烧类似感冒的副作用。

5）不损伤正常组织并能提高机体免疫力和改善身体状况的作用。生物治疗具有无创伤无痛苦安全无副作用等特点，是未来肿瘤治疗的重要发展方向。特异性强适应症广延长生命性强抗复发性强安全性好(副作用低几乎没有)合适的费用第七十八页，共九十一页，编辑于2023年，星期一适应症

主要用于恶性黑色素瘤、前列腺癌、肾癌、膀胱癌、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、宫颈癌、各种肺癌、喉癌、鼻咽癌、胰腺癌、肝癌、胃癌等实体瘤手术后防止复发；也可以用于多发性骨髓瘤、B细胞淋巴瘤和白血病等血液系统恶性肿瘤缓解期进一步预防复发；还可以用于上述实体瘤缓解期进一步巩固治疗或上述晚期肿瘤配合放化疗、介入治疗、热疗等方法，达到延长生存期、提高生活质量和控制肿瘤进展的目的。第七十九页，共九十一页，编辑于2023年，星期一适应症A、适合免疫治疗者：①年龄大于16岁；②病理组织学或细胞学确诊为肿瘤患者③生活自理，卡氏体力状况评分标准60分以上；④预计生存期至少大于6个月；⑤签署知情同意书；⑥放化疗结束一个月以上的；⑦如若可以接受手术治疗或其它方式能够获得一定数量的肿瘤组织件或细胞的患者最佳。第八十页，共九十一页，编辑于2023年，星期一不适合症不适合免疫治疗者：①怀孕或哺乳期妇女；②器官功能衰竭者：心脏：IV级以上；肝脏：达到国内肝功能分级C级以上；肾脏：肾功能衰竭及尿毒症期以上；肺：出现严重的呼吸衰竭症状，并累及到其他脏器，如肝、肾功能；脑：脑转移并伴意识障碍者；③脏器移植者；④长期使用免疫抑制药物或正在使用的自身免疫性疾病患者；⑤精神疾病者，发生急性肝炎或其他急性感染病活动期；⑥对本治疗中所用生物试剂过敏者。治疗者中途撤出者：①病情恶化；②患者产生无法忍受的副作用;③患者要求退出治疗。第八十一页，共九十一页，编辑于2023年，星期一禁忌症:

病人生命体征己出现衰竭的现象病人处于怀孕期和哺乳期病人明确诊断肉瘤(除恶性黑色素瘤)病人明确诊断软骨瘤病人明确诊断原发性颅内肿瘤第八十二页，共九十一页，编辑于2023年，星期一肿瘤临床分期及治疗原则:

第八十三页，共九十一页，编辑于2023年，星期一肿瘤临床分期及治疗原则:

第八十四页，共九十一页，编辑于2023年，星期一肿瘤临床分期及治疗原则:

第八十五页，共九十一页，编辑于2023年，星期一（一）常规检查评估影像学