血清蛋白电泳的临床应用

主要内容血清蛋白电泳免疫分型电泳第一页，共九十三页，编辑于2023年，星期二电泳技术的发展历程1809年发现电泳现象1937年建立了界面电泳技术1948年诺贝尔化学奖1950年后区带电泳从发展到成熟1980年

毛细管电泳技术2001年

sebia首次推出全自动毛细管电泳仪19世纪21世纪sebia第二页，共九十三页，编辑于2023年，星期二蛋白电泳技术的变迁滤纸电泳醋酸纤维素薄膜电泳凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳—临床聚丙烯酰胺凝胶电泳—科研毛细管电泳电泳技术的革命第三页，共九十三页，编辑于2023年，星期二蛋白电泳技术的临床应用描绘出蛋白组分的全貌各种体液血清、血浆尿液脑脊液胸腹水全血临床疾病肝病肾病肿瘤心脑血管疾病、代谢病、中枢神经病变、血红蛋白分子病……第四页，共九十三页，编辑于2023年，星期二CapillarysElectrophoresisPrinciple正极负极检测器氘光源200nm约1万伏高压毛细管(内径25微米）样本进入-+温控装置电泳方向毛细管电泳工作原理第五页，共九十三页，编辑于2023年，星期二++++++++++++++++++++++++++++++++++++毛细管的内表面是带负电荷当毛细管内部充满缓冲液被活化后，在毛细管内表面的负电荷层上形成了一正电荷层毛细管电泳工作原理第六页，共九十三页，编辑于2023年，星期二++++++++++++++++++++++++++++++++++++阳极阴极+电渗流作用方向内部充满电泳缓冲液的毛细管带电后，

-毛细管内的正电荷层整体向阴极移动，这种现象称之为电渗流第七页，共九十三页，编辑于2023年，星期二++++++++++++++++++++++++++++++++++++阳极-阴极

+电渗流作用方向电场力作用方向在毛细管内部的正电荷粒子同时到受电渗流和电场力的作用，两种作用力方向一致→快速向负极端迁移+第八页，共九十三页，编辑于2023年，星期二--++++++++++++++++++++++++++++++++++++阳极-阴极

+电渗流作用方向电场力作用方向（负电荷）在毛细管内部的负电荷粒子同时到受电渗流和电场力的作用，两种作用力方向相反；电渗流>>>电场力→向负极端迁移第九页，共九十三页，编辑于2023年，星期二---------------++++++++++++++++++++++++++++++++++++++阳极-阴极+电渗流作用方向负电荷电场力作用方向样品进入到毛细管之中的运动正电荷电场力作用方向无论是带正电、带负电或不带电的粒子，都在电渗流的作用下，向阴极迁移，带正电的，受到同方向的电场力作用，迁移最快，不带电的迁移速度次之，带负电的迁移速度最慢，因为它受到与电渗流反方向的电场力作用。第十页，共九十三页，编辑于2023年，星期二优点性能特征减少手工操作全自动,人机分离操作操作简单,可根据用户需求调整操作模式提供多种检测项目供溯源性,减少误差原管条码识别增加用户满意度高通量优化的工作流程持续进样、双向通讯、快捷的数据读取优化结果用200nm氘光直接检测蛋白，无需染色简化结果分析高分辨率、高清晰度M蛋白检测的高灵敏度毛细管电泳技术的优势第十一页，共九十三页，编辑于2023年，星期二毛细管血清蛋白电泳图谱白蛋白GammaBeta-2Beta-1Alpha-2Alpha-1免疫球蛋白C3补体α-1抗胰蛋白酶结合珠蛋白转铁蛋白白蛋白α-1酸性糖蛋白

α-2巨球蛋白血红素结合蛋白第十二页，共九十三页，编辑于2023年，星期二临床疾病的识别炎症肝病肾病……“M”蛋白的筛查及定量对疑似骨髓瘤患者检测单克隆免疫球蛋白早期检出无症状的骨髓瘤患者对骨髓瘤疾病进行随访及疗效观察血清蛋白电泳的临床应用第十三页，共九十三页，编辑于2023年，星期二CapillarysElectrophoresis

毛细管血清蛋白电泳第十四页，共九十三页，编辑于2023年，星期二正常血清蛋白电泳图谱白蛋白GammaBeta-2Beta-1Alpha-2Alpha-1免疫球蛋白C3补体α-1抗胰蛋白酶结合珠蛋白转铁蛋白白蛋白α-1酸性糖蛋白

α-2巨球蛋白血红素结合蛋白第十五页，共九十三页，编辑于2023年，星期二电泳图谱---急性炎症免疫球蛋白C3补体α-1抗胰蛋白酶结合珠蛋白转铁蛋白白蛋白α-1酸性糖蛋白

α-2巨球蛋白血红素结合蛋白急性期反应蛋白第十六页，共九十三页，编辑于2023年，星期二电泳图谱---慢性炎症第十七页，共九十三页，编辑于2023年，星期二电泳图谱---肝脏肝脏是血清蛋白合成的主要器官白蛋白GammaBeta-2Beta-1Alpha-2Alpha-1免疫球蛋白C3补体α-1抗胰蛋白酶结合珠蛋白转铁蛋白白蛋白α-1酸性糖蛋白

α-2巨球蛋白血红素结合蛋白第十八页，共九十三页，编辑于2023年，星期二电泳图谱---肝病第十九页，共九十三页，编辑于2023年，星期二beta2区：多克隆IgA↑gamma区：多克隆IgG↑电泳图谱---肝硬化Beta-Gamma桥第二十页，共九十三页，编辑于2023年，星期二BetaGamma桥第二十一页，共九十三页，编辑于2023年，星期二电泳图谱---肾病第二十二页，共九十三页，编辑于2023年，星期二电泳图谱---肾病肾小球滤过屏障损伤→白蛋白流失低白蛋白高α-2贾晓辉,马彧旻.齐齐哈尔医学院学报.2009,30(16):2015Alpha-2巨球蛋白第二十三页，共九十三页，编辑于2023年，星期二Alba1a2b1b2g总蛋白浓度降低(低于60g/l)α-2巨球蛋白脂蛋白低白蛋白电泳图谱---肾病综合征三高一低：高脂蛋白血脂第二十四页，共九十三页，编辑于2023年，星期二电泳图谱---肾病综合征性别：男

年龄：24 科室：肾脏内科

诊断：肾病综合征第二十五页，共九十三页，编辑于2023年，星期二原因:免疫缺陷病、免疫抑制剂、游离轻链病电泳图谱---低免疫球蛋白第二十六页，共九十三页，编辑于2023年，星期二电泳图谱---高免疫球蛋白原因:慢性感染、自身免疫病、慢性肝病、慢性肉芽肿第二十七页，共九十三页，编辑于2023年，星期二血清蛋白电泳图谱常见类型图谱类型

总蛋白Albα1α2βγ低蛋白血症↓↓↓↓N↑N↓N↑急性炎症/急性时相反应N↓N↑↑/N慢性炎症型

↓↑↑↑弥漫性肝损害↓N↓↓↑↓↑肝硬化↓N↑↓↓N↓N↓β-γ↑桥肾病↓↓↓↓↑↑↑不定弥漫宽γ球蛋白血症型↑↓N↑↑M蛋白血症型

在α2-γ区出现异常峰高α2（β）球蛋白血症↓↑↑↑妊娠（高α型）↓N↓↑↑N蛋白质缺陷个别区带出现特征性缺乏第二十八页，共九十三页，编辑于2023年，星期二Gammaglobulins(免疫球蛋白区带)免疫球蛋白是机体的正常生理成分多克隆分类重链：IgG、IgA、IgD、IgE、IgM轻链：κ、λ10种类型第二十九页，共九十三页，编辑于2023年，星期二10种免疫球蛋白IgDLambdaIgELambdaIgEKappaIgDKappaIgALambdaIgGKappaIgGLambdaIgMLambdaIgAKappaIgMKappa第三十页，共九十三页，编辑于2023年，星期二B淋巴细胞

转化为浆细胞3浆细胞

合成抗体,即免疫球蛋白.4浆细胞免疫球蛋白造血干细胞分化为3类细胞:红细胞

粒细胞巨核细胞免疫球蛋白

在免疫系统中被用来识别和消灭如细菌或病毒等外源物52骨髓

(颅骨,盆骨,肋骨,胸骨)1免疫球蛋白的合成过程第三十一页，共九十三页，编辑于2023年，星期二正常浆细胞多克隆免疫球蛋白P1P2P3P4P5正常电泳结果免疫球蛋白电泳结果正常

所有浆淋巴细胞同步合成免疫球蛋白=多克隆免疫球蛋白第三十二页，共九十三页，编辑于2023年，星期二浆细胞恶性增殖多克隆免疫球蛋白单克隆免疫球蛋白异常电泳结果M蛋白免疫球蛋白电泳结果骨髓瘤第三十三页，共九十三页，编辑于2023年，星期二IgG

LambdaIgG

KappaIgM

KappaIgM

LambdaIgA

LambdaIgA

Kappa200nm第三十四页，共九十三页，编辑于2023年，星期二多克隆Igs单克隆Ig---“M”蛋白正常异常第三十五页，共九十三页，编辑于2023年，星期二什么是M蛋白单克隆浆细胞恶性增殖产生的均一蛋白“M”MultipleMyeloma 多发性骨髓瘤Macroglobulinemia 巨球蛋白血症Malignantlymphoma 恶性淋巴瘤MonoclonalGammapathies 单克隆丙种球蛋白病电泳曲线：单株峰第三十六页，共九十三页，编辑于2023年，星期二恶性浆细胞增殖仅次于白血病（血液肿瘤）发病率占所有肿瘤的1~2%，血液肿瘤的10%美国：白人4/10万；黑人10/10万欧洲：2.5~3.0/10万亚洲：1~2/10万中国：无确切数据发病年龄老年病，随年龄↑发病率↑欧美：高峰65~70岁，中位年龄68岁中国：高峰55~65岁，中位年龄57岁男女比例男：女=2~2.5:1多发性骨髓瘤(MultipleMyeloma,MM)第三十七页，共九十三页，编辑于2023年，星期二多发性骨髓瘤临床表现/并发症CalciumRenalAnemiaBoneCRAB第三十八页，共九十三页，编辑于2023年，星期二骨髓瘤相关器官/组织损伤（ROTI）CRAB血清钙升高>2.8mmol/L或升高0.25mmol/L以上肾功能不全肌酐>176.8mmol/L贫血<100g/L或低于正常下限20g/L骨损伤溶骨性损害、骨质疏松、病理性骨折其他高粘血症、反复细菌感染（≥2次/年）、淀粉样变……多发性骨髓瘤临床表现/并发症第三十九页，共九十三页，编辑于2023年，星期二临床特征缺乏特异性临床表现骨痛、病理性骨折：最常见贫血高钙血症免疫功能失调，感染肾功能受损、肾衰心、脑脏器微循环障碍，心脑血管病变多学科

骨科、感染科、呼吸科、内分泌肾内科、泌尿科、心内科、神经科、消化科多发性骨髓瘤临床表现/并发症第四十页，共九十三页，编辑于2023年，星期二多发性骨髓瘤病人溶骨报告肱骨颅骨盆骨第四十一页，共九十三页，编辑于2023年，星期二临床特征缺乏特异性临床表现骨痛、病理性骨折：最常见贫血高钙血症免疫功能失调，感染肾功能受损、肾衰心、脑脏器微循环障碍，心脑血管病变多学科

骨科、感染科、呼吸科、内分泌肾内科、泌尿科、心内科、神经科、消化科多发性骨髓瘤临床表现/并发症第四十二页，共九十三页，编辑于2023年，星期二我院实例-1患者信息性别：女年龄：69科室：血液科诊断：多发性骨髓瘤第四十三页，共九十三页，编辑于2023年，星期二我院实例-2患者信息性别：女年龄：69科室：消化内科诊断：慢性胃炎第四十四页，共九十三页，编辑于2023年，星期二我院实例-3患者信息性别：女年龄：73科室：中医科诊断：贫血？第四十五页，共九十三页，编辑于2023年，星期二

就诊晚2/3确诊时已达中晚期

误诊率高1/3非血液科首诊>60%多发性骨髓瘤诊治现状晚骨折预后差增加负担感染发生率高肾脏病变不可逆死亡率↑↑第四十六页，共九十三页，编辑于2023年，星期二多发性骨髓瘤误诊分析第四十七页，共九十三页，编辑于2023年，星期二1557例多发性骨髓瘤误诊分析吕鸿雁,张金巧.河北医药.2009,31(9):1052-54误诊率：65.17%重视实验诊断39.8%15.6%19.8%7.6%15.6%第四十八页，共九十三页，编辑于2023年，星期二国际骨髓瘤基金会2010推荐的M蛋白早期筛查流程第四十九页，共九十三页，编辑于2023年，星期二

多发性骨髓瘤分型M蛋白骨髓克隆性浆细胞

/浆细胞瘤ROTI有症状MM√≥10%√无症状MM

(冒烟型,SMM)√≥10%意义未明M蛋病

MGUS√<10%早发现、早诊断、早治疗早发现、早诊断、早治疗肿瘤第五十页，共九十三页，编辑于2023年，星期二

多发性骨髓瘤分型M蛋白骨髓克隆性浆细胞

/浆细胞瘤ROTI有症状MM√≥10%√无症状MM

(冒烟型,SMM)√≥10%意义未明M蛋病

MGUS√<10%早发现、早诊断、早治疗早发现、早诊断、早治疗肿瘤M蛋白筛查是关键第五十一页，共九十三页，编辑于2023年，星期二正常血清单克隆Ig单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的检测血清蛋白电泳是检测M蛋白的唯一方法若在区出现异常的峰，且高宽比大于2:1,可以初步判定为M蛋白峰第五十二页，共九十三页，编辑于2023年，星期二

单克隆M蛋白的电泳位置常见于gamma球蛋白区亦可出现在其他区Beta2beta1

alpha2单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的检测第五十三页，共九十三页，编辑于2023年，星期二白蛋白GammaBeta-2Beta-1Alpha-2Alpha-1徐玲令,杨再兴,赵文静,屠小卿,高春芳,孔宪涛.第二军医大学学报.2004,25(12):1343-45单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的检测单克隆M蛋白的电泳位置M蛋白阳性患者2007例的体液免疫特征分析

第五十四页，共九十三页，编辑于2023年，星期二单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的检测gamma区：峰第五十五页，共九十三页，编辑于2023年，星期二单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的检测微量M蛋白gamma区：曲线异常第五十六页，共九十三页，编辑于2023年，星期二单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的检测Beta2区第五十七页，共九十三页，编辑于2023年，星期二单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的检测Beta1区第五十八页，共九十三页，编辑于2023年，星期二单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的检测Beta1与beta2融合第五十九页，共九十三页，编辑于2023年，星期二单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的检测alpha2区第六十页，共九十三页，编辑于2023年，星期二单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的检测3个单克隆第六十一页，共九十三页，编辑于2023年，星期二Mode‘’fromthetoptothebottom

’’Mode‘’fromvalleytovalley’’M蛋白定量的两种方法对患者的M蛋白随访过程只能使用其中一种方法，并坚持使用第六十二页，共九十三页，编辑于2023年，星期二难以辨别的图谱第六十三页，共九十三页，编辑于2023年，星期二血红蛋白-触珠蛋白复合物游离HbAlba1a2b1b2g溶血标本电泳图谱特征第六十四页，共九十三页，编辑于2023年，星期二Alba1a2b1b2g纤维蛋白原beta2区抗凝血蛋白电泳图谱特征第六十五页，共九十三页，编辑于2023年，星期二Alba1a2b1b2gAlba1a2b1b2g可能原因:基因突变药物：beta内酰胺类胰腺炎

白蛋白区双峰第六十六页，共九十三页，编辑于2023年，星期二白蛋白区干扰Alba1a2b1b2g可能原因:

脂蛋白升高胆红素升高造影剂第六十七页，共九十三页，编辑于2023年，星期二CRPAlba1a2b1b2g

急性炎症期CRP>200mg/LGamma区：多克隆Ig，异常峰C反应蛋白---CRP第六十八页，共九十三页，编辑于2023年，星期二Alba1a2b1b2gα-1抗胰蛋白（A1AT）缺乏症第六十九页，共九十三页，编辑于2023年，星期二Alba1a2b1b2gα-1抗胰蛋白（A1AT）杂合子表型第七十页，共九十三页，编辑于2023年，星期二表型I-II表型I-I表型II-IIα2区：触珠蛋白的不同表型第七十一页，共九十三页，编辑于2023年，星期二寡克隆免疫球蛋白异常的电泳图谱第七十二页，共九十三页，编辑于2023年，星期二常见于

:自身免疫病类风湿关节炎，干燥综合症，红斑狼疮等)病毒、细菌和寄生虫引起的感染H.I.V.病毒性肝炎巨细胞病毒感染与移植相关的自身免疫反应免疫抑制治疗寡克隆免疫球蛋白第七十三页，共九十三页，编辑于2023年，星期二M蛋白可能类型完整的免疫球蛋白分子重链轻链半分子IgM单体（7S-IgM）……第七十四页，共九十三页，编辑于2023年，星期二

型别例数%IgG型骨髓瘤20531.73IgA型骨髓瘤9314.40IgM型骨髓瘤568.67IgD型骨髓瘤121.86重链病50.77轻链病21433.13半分子病10.157SIgM20.31BMG497.59双M蛋白病81.24上海新华医院,2005年出现异常血清蛋白结果需要免疫分型电泳进一步确认646例M蛋白类型分类第七十五页，共九十三页，编辑于2023年，星期二免疫分型:检测请求

在血清蛋白电泳的程序下:“ITRequest”第七十六页，共九十三页，编辑于2023年，星期二稀释液(380µL)LKMAGELP抗血清/ELPsolution(20µL)免疫分型:抗血清稀释杯+上机、分析第七十七页，共九十三页，编辑于2023年，星期二KLIgGIgAIgMELPIgGXIgAXIgMXIgkIglELPGAMklDILUENT抗血清参考稀释液第七十八页，共九十三页，编辑于2023年，星期二免疫分型:全自动化血清稀释样本与5种抗血清反应(IgG,IgA,IgM,κ,λ

)在液态环境中,抗原抗体反应非常迅速无需专门孵育未加入抗血清的标本,作为参照条带(ELP)毛细管电泳分析稀释液(380µL)LKMAGELP抗血清/ELP液(20µL)第七十九页，共九十三页，编辑于2023年，星期二对照曲线与反应曲线自动叠加单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的鉴定免疫减法与相应抗血清发生反应后,M蛋白峰