高级生物化学问答题

信号肽特点：10-4010-15个高度疏水氨基酸组成的肽段；N端至少含一个带正电荷基团（如Ly、Ar；C端有被酶识别位点，其上游常有疏水性强的53多为为Ala。首先是信号肽识别蛋白结合的核蛋白选择性的连接到内质网膜上的SRP信号识别蛋白转移进行下一轮循环。位于分泌蛋白前体的端2）号肽酶切除信号肽的转运机制：信号肽运作的机制相当复杂，有关组分包括信号肽识别颗粒及其受体、信号序列受体（SS、核糖体受体和信号肽酶复合物。信号肽发挥作用时，首先SRP（即信号肽与SSRSRP及其受体结合、核糖体及其受体的结合引导进入内质网腔内后，在信号肽酶复合物的作用下，已完成使命的信号肽被切除。工酶？初级同工酶产生的原因是由于酶蛋白的编码基因不同因相同，但基因转录产物mRNA或翻译产物加工过程不同。1）在遗传学和分类学上，同工酶提供了一种精良的判别遗传标志的工具；育和系统发育的关系。3）专一性、酶的变构性等性质的差异，从而解释它们代谢功能的差异。4）分化的分子标记。法鉴定。生物膜主要有哪些生物学功能？任举一例说明膜结构与功能的密切关系。1）区域化或房室化2）物质的跨膜运输3）能量转换（氧化磷酸化）4）细胞识别研究蛋白质一级结构有哪些意义？（N—C端）从而决定其高级结构，从而决定其功能。一级结构的种属差异与分子进化（细胞色素C）一级结构的变异与分子病（镰刀状红细胞）DNA的变性、复性和杂交？DNA的杂交在生物化学和分子生物学研究中的应用？试举例说明。DNA变性是指在一系列物理化学因素作用下DNA遭到破坏，DNA双螺旋结构部分解体，或全部解离成两条单链DNA，叫变性。引起变性的外界条件消除后（如加热变性后再缓慢降温双螺旋，成为复性。不同来源的DNA分子放在一起热变性，然后慢慢冷却，让其复性，若这些异源DNADNA与互补的RNA以发生杂交。核酸的杂交在分子生物学和生物化学中应用广泛，如将已知基因的DNA制成具有同位素标记的DNA片段---DNA探针，用其去检测未知DNA分子。蛋白质特定构象形成的原因是什么？环境因素对蛋白质构象形成有无影响？为什么？蛋白质特定构象形成的驱动力有R-天然构象的形成过程是一个自发的过程。试比较光合磷酸化和氧化磷酸化能量转化机制的异同。线粒体内膜、叶绿体类囊体膜和细菌的质膜是能量转换的主要场所，光合磷酸化的能量是来自光能的激发，是储存能量，氧化磷酸化能量是来自底物的分解，释放能量。激素受体有哪两大类？试比较其信号转导机制。一性受体结合，结合后激活膜上的腺苷酸环化酶系统，在mg+存在的情况下腺苷酸环化酶ATP转化为cAMP，cAMP蛋白激酶PKA，促使细胞内多种蛋白质发生磷酸化反应，从而引起靶细胞各种生理生化反应。入细胞。在进入细胞之后，先于细胞内的胞浆受体结合，形成激素胞浆受体结合物而进入核内受体复合物从而激发DNAmRNA,诱导蛋白质的合成，引起相应的生物效应。分子筛层析和SDS-各自特点和适用范围。分离物质的分子大小（直径），洗脱时，大分子物质由于直径大于凝胶网孔而不能进入凝胶内部聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理是当SDS与蛋白质结合后，蛋白质分子即带乃至消除了，与此同时蛋白质在SDS，所以各种SDS-就反映了分子量的大小。可用于测PH值和蛋白质的亚基数(Gly-的混合物先在PH5.6缓冲系统中进行电泳(I)，再转90。在PH7.2(II)该试验电泳图谱，并简述理由。什么是抗体？试以IgG的结构为例，分析抗体的重要功能，并简要说明抗体的多样性。抗体分子的多样性和独特的生物学功能都能从其分子结构上找出依据，以下以IgG简单说明：IgGY4条重链的N-末端和相邻轻链协作形成一个抗原结合位点，所以IgG22个抗原分子结合并交叉连接从而使抗原沉淀。IgG每条链在N末端有一可变区，在C末端有一不变区，由于重轻链N结合不同抗原的不同专一性结合位点。抗体的结构域。轻链折叠形成24个结构域，一个可变区和三个不可变区。FabFcIgG释放出YFab片段，因为Fab只有一个抗原结合位点，所以不能与抗原交叉连接。释放出的Y型分子的柄部称为FcCFc有触发破坏抗原的作用。例如触发补体系统和诱导白细胞吞噬病原。什么是受体？有何特征和类别？简述一种分离提纯受体的方法、原理。受体是细胞内或细胞表面的一种天然分子，可以识别并特异地与有生物活性的化学信号分子（配体效应。绝大多数受体为蛋白质，极少数是非蛋白受体。受体与配体结合具有特异性、亲和性、饱和性受体分为细胞内受体（甾醇类激素）和细胞外受体（G具有酶活性的受体。分子克隆技术提取微量受体：从细胞中提取所有微量mRNA逆转录成cDNA，将其重组入cDNA，并表达成表面受体。有一种七肽具有神经传导抑制剂的作用AlaPheLysFDNB反应后经酸水解，释放出DNP—Ala。用胰蛋白酶处理产生组成为Ala3Phe1的四肽和组成为Ala2、Lys1的三肽。与胰凝乳蛋白酶作用则生成游离的Ala七肽的氨基酸序列。1）FDNBDNP—Ala：N末端是Ala-2）酶作用则生成游离的Ala-Phe–Ala3）Ala3Phe1Ala2、Lys1的三肽：Ala-Ala-Phe–Ala和Ala-Ala-Lys所以推除Ala-Ala-Lys-Ala-Ala-胰凝乳蛋白酶（糜蛋白酶）法：水解芳香族氨基酸的羧基侧肽键（色Trp、酪Tyr、苯丙Phe）胰蛋白酶法：水解赖氨酸、精氨酸Arg的羧基侧肽键 溴化脯法：水解蛋氨酸Met羧基侧的肽键画出肌红蛋白和血红蛋白的氧合曲线，并讨论各自氧合曲线与其功能相关性。什么是双信使信号转导系统，试述胞外信息通过该系统在胞内得以传递的机制。激素通过结合到细胞表面的膜受体上，激活G蛋白，G蛋白开启磷酯酶从而使磷酸酰肌醇PIP）分解为肌醇三磷酸IP）和二酰甘油D。DGPKCThrSer性，引起生理生化反应。IP3则作用于内质网膜受体，打开Ca+Ca+Ca+的释放改变CaM白的生物活性，从而完成激素的联级放大作用，在多种细胞内引起广泛的生理效应。Ca+的释放也活化了PKC，从而改变一系列酶的活性，引起生理生化反应。试述三种直接或间接的方法，以证明某种外源基因已在转基因生物中存在或表达。记和显色标记。对噬菌体而言，噬菌斑的形成则是其自我选择的结果。差别杂交或扣除杂交法分离克隆基因：扣除杂交就是用一般细胞的cDNA与特殊细胞的cDNA杂交先扣除一般共有的cDNA，再将剩余的特异的cDNA进行克隆。表达。细菌菌落或噬菌斑的原位杂交使菌体裂解，DNADNA结合到膜上——32P-cDNA放射性cDNA杂交的菌斑。2.什么是核酶和抗体酶？它们和酶有什么不同？核酶，把对RNA具有催化活性的RNA叫做核酶，化学本质为RNA，一般酶化学本质为蛋白质。之上还具有相应免疫学性质。C结构的种属差异和保守性，阐明其结构和功能的统一性。对比不同有机体中表现同一功能的蛋白质的氨基酸序列细胞色素C35个不变的AAC的生物功能所不可缺结合细胞色素C还原酶和氧化酶。细胞表面受体主要有哪些类型？各具有什么特点，作用机理有何区别离子通道性蛋白（配体闸门通道：配体结合 通道打开G-蛋白偶联型受体：配体结受体构象发生改--------G蛋白激活 靶酶激活具有酶活性的受体：配体结合 酶激活1.叙述血红蛋白的结构特征。这种结构和它的功能有什么关系？血红蛋白和氧的结合受哪些因素的影响？人体内的血红蛋白由四个亚基组成，分别为两个α亚基和两个β亚基，自动组装成α2β2形构的小分子，在其中心有一个亚铁离子。氧分子更容易寻找到血红蛋白的另一个亚基结合3.什么是遗传信息传递的中心法则？你认为用中心法则描述的遗传信息传递规律还有哪些问题有待补充？为什么说朊病毒的发现是对此法则的挑战？目前普骗认为遗传信息不能从蛋白质流向核酸，但是DNA是否可以不经过RNA直接作为指令蛋白质合成的模板，尚待实验证明。PrionPrPs，PrPsc可引起包括疯牛病在内的一系列致死性神经变性疾病（统称prion病。以α的对蛋白酶敏感的不具有感染能力的PrPCβ为主的对蛋白酶抵抗的具有感染能力的不溶性PrPScPrPsc与细胞PrPC,以PrPscPrPCPrPscPrPsc,PrPC成不溶性的PrPsc，脑组织形成淀粉样斑块直至死亡则。而PrPsc不含核酸，它是通过与PrPc相互作用，诱导其变构而转变成PrPsc，从而实现其增殖过程不涉及核酸复制，可见这与中心法则明显相左。2.试举一例，简要说明在生命活动的一些重要过程中是如何通过蛋白质(或酶)与核酸的相互作用而实现某一功能的。DNA双,DNA聚合酶以亲代DNA,复制出子代DNARNA合体，根据mRNA控制也是通过生物大分子的相互作用而实现的2～15％基因被表达。阐述核酸、蛋白质一级结构研究和大规模测序的必要性及其对生命科学发展的重要影响物学功能多样性的基础，而蛋白质和核酸独特的性质和功能则是其结构的反映因为生物的遗传信息储存于DNA的核苷酸序列中，生物界物种的多样性寓于DNA种核苷酸千变万化的不同排列之中DNA分子上四种核苷酸的排列顺序即DNAAA环境的影响，因此研究蛋白质一级结构与功能的关系具有十分重要的意义。4.分离纯化得到一种蛋白质，至少设计两条路线，来克隆出该蛋白质的基因或1）测出氨基酸的序列——合成cDNA探针——用So