胶质瘤患者CSF中分子标记物检测方法与意义课件整理-002

胶质瘤患者CSF中分子标记物检测方法与意义首都医科大学附属北京天坛医院蒋海辉分子标记物获取途径肿瘤标本1、最珍贵,最可靠的临床样本2、获取难度大,需手术获得;血清标本:1、标本易获得2、检测阳性率较低,因血脑屏障的存在很大大分子物质在外周血液难以检出;3、血清杂质多,其他血液细胞存在干扰;分子标记物获取途径脑脊液标本:CSF是最理想的标本1、容易获得,通过腰穿即可;2、颅内肿瘤细胞分泌的物质存在于CSF中3、CSF中无杂质(cell-free),杂质蛋白含量仅为020.8mg/ml,远远低于血清中蛋白含量,maskingeffect极小;4、脑肿瘤分泌相关蛋白为血液中的10001500倍;分子标记物临床意义Diagnostic:分子标记物可为胶质瘤的个体化诊断理论依据,如1p/19q、IDHPrognostic:分子标记物可以协助判断胶质瘤患者预后,如1p/19q、IDHTherapeutic:部分分子标记物可以为患者个体化治疗提供理论依据,甚至设计靶向药物,如MGMT、VEGF、EGFRVIIl.实例:micro-RNAbe21,2IdentificationofmicrornasinthecerebrospinalfluidasbiomarkerforthediagnosisofgliomaUweSchlegel,AbdelouahidHematologyandOncology,Resisr-tlniversifyofMeurelawy,Rufrr-UnmvervityofBochur,Gerrruaryo.K.,U.S.·方法:收集胶质瘤患者CSF样本10份(实验组),神经功能紊乱患者CsF样木10份、PCNSL患者CSF样本23份、脑转移瘤患者CSF样本7份(对照组)·micro-RNA检测方法:RNA提取、反转录、qRT-PCR实例:micro-RNA筛选指标:通过检测患者CsF中micro-RNA表达量筛选出胶质瘤特∽异性指标Table1.miRNAexpressioninCSFsamplesfrompatientswithglioma,comparedwithcontrolpatientsPatientswithgliomapatientsmR133481∞503671007结果:胶质瘤患者CSF样本mR162628082286912612中miR-15b、miR-21表达量miR-19b30.12o.8033.01明显低于对照组28.30miR-106b330.91miR-133.734.5028.2429.08实例:micro-RNA反向验证:通过检测CSF中miR-15b、miR-21表达量来诊断胶质瘤结果:胶质瘤患者CSF中miR-15b、miR-21的相对表达量(Relatiexpressionlevels)均显著低于Control组GliomaControPCNSLMetastasesGliomaControlPCNSLMetastase实例:micro-RNA反向验证:针对miR-15b指标ROC分析结果R-15b指标曲线下面积AUC=096;mR-15b指标REL=04作为cut-ofcNsL/marae2PcNSUT值,其敏感性为90%,miR-2特异性为94.9%联合miR-15b、miR-21两指标,诊断准确性更优实例:micro-RNA文章NEWF|ND|NGS·miR-15b富含于胶质瘤患者CSF中,是神经功能紊乱患者组的25倍,PCNSL组的5倍,转移瘤组的17倍,为此,它可作为可靠的胶质瘤诊断指标miR-15b通过调节细胞周期,参与胶质瘤的发生过程。它可能是一个抑癌基因,在细胞周期G1期作用于CyclinE1(CCNE1miR-21同样高表达于胶质瘤患者CSF中,它是一个肿瘤基因,可以抑制肿瘤细朐凋亡;它可以靶向作用于一些抑癌基因,如PTEN、PDCD4等:它可以直接下调TMP3,增加肿瘤细胞侵袭性实例:ProteinscurareRey(2019)37:367-380Dol10.10ms10l43-0144539REVIEWProteomicanalysisofcerebrospinalfluidtowardtheidentificationofbiomarkersforgliomasJing-so