高考生物二轮复习优编增分练：非选择题特训13基因工程的应用

PAGEPAGE6特训13基因工程的应用1．(2018·广东四校联考)如图所示的质粒中，Tetr为四环素抗性基因，LacZ′基因的表达产物能使白色的大肠杆菌菌落变成蓝色。现用EcoRⅠ切割目的基因及质粒载体并进行连接，将得到的重组质粒转化大肠杆菌，以对目的基因进行保存和扩增。请回答下列问题：(1)将目的基因和质粒载体连接需使用的工具酶是________________。为将载体导入大肠杆菌，常用Ca2＋处理使之处于________________。(2)LacZ′基因在基因工程中起__________基因的作用。为筛选导入重组质粒的大肠杆菌，应在培养基中加入________，筛选________(填“蓝色”或“白色”)菌落。(3)若需要将这个质粒改造成基因工程表达载体，还需要插入________和________部分。将改造后的表达载体和目的基因经EcoRⅠ酶切连接，并成功导入受体细胞后，发现仍有部分细胞不能表达出目的蛋白，最可能的原因是____________________________________。为了避免上述情况发生，最好用________________切割目的基因和表达载体。(4)我国对农业转基因生物实施标识制度，比如由转基因大豆加工制成的大豆油，标注为“本产品加工原料中含有转基因大豆，但本产品已不再含有转基因成分”，其相关的生物学依据是________________________________________________________________________。答案(1)DNA连接酶感受态(2)标记四环素白色(3)启动子终止子目的基因与质粒载体反向连接两种限制酶(4)大豆油属于脂肪，不含目的基因编码的蛋白质解析(1)将目的基因和质粒载体连接需要使用的工具酶是DNA连接酶；为将载体导入大肠杆菌，常用Ca2＋处理使之处于感受态。(2)LacZ′基因在基因工程中起标记基因的作用；为筛选导入重组质粒的大肠杆菌，应在培养基中加入四环素；由于构建重组表达载体过程中LacZ′基因已经被破坏，因此应该筛选白色菌落。(3)基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、标记基因、终止子、复制原点等；将改造后的表达载体和目的基因经EcoRⅠ酶切连接，并成功导入受体细胞后，发现仍有部分细胞不能表达出目的蛋白，最可能的原因是目的基因与质粒载体反向连接，为了避免上述情况发生，最好用两种限制酶切割目的基因和表达载体。(4)我国对农业转基因生物实施标识制度，比如由转基因大豆加工制成的大豆油，标注为“本产品加工原料中含有转基因大豆，但本产品已不再含有转基因成分”，其相关的生物学依据是大豆油属于脂肪，不含目的基因编码的蛋白质。2．(2018·东北五校联考)透明质酸酶临床常用作药物渗透剂，目前市场上出售的透明质酸酶主要从动物组织中提取，成本高且提纯困难，科研人员尝试将透明质酸酶基因转入大肠杆菌，使其高效表达。部分过程如图所示，请回答下列问题：(1)步骤①代表的是基因工程操作程序中的________________________，由图可知，此步骤中，选择用限制酶______________去切割DNA分子中的____________键。(2)基因工程一般选择大肠杆菌作为受体，这是因为大肠杆菌具有________________________________________________________________________的特点。(3)透明质酸酶基因进入大肠杆菌，并且____________________的过程，称为转化。转化时，首先需要用________处理大肠杆菌，使其处于感受态。(4)透明质酸酶基因导入受体细胞后，需通过_______________技术检测其是否成功转录。答案(1)基因表达载体的构建NcoⅠ和XhoⅠ磷酸二酯(2)繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少(3)维持稳定和表达Ca2＋(4)RNA－DNA分子杂交解析(1)步骤①代表将目的基因即透明质酸酶基因和作为载体的质粒连接，完成基因表达载体的构建；据图可知，要用限制酶NcoⅠ和XhoⅠ去切割DNA，断开磷酸二酯键，便于目的基因和质粒连接。(2)基因工程中一般选择大肠杆菌作为载体的原因是大肠杆菌属于单细胞生物，繁殖速度快，容易培养，遗传物质相对较少，容易对遗传物质进行改造。(3)透明质酸酶基因导入大肠杆菌，并且能维持稳定，在大肠杆菌细胞内能表达，控制合成透明质酸酶，这个过程称作转化；转化时，需要用Ca2＋(氯化钙)处理大肠杆菌，使其处于感受态，即能吸收周围环境中DNA分子的状态。(4)透明质酸酶基因导入大肠杆菌后，需要通过RNA－DNA分子杂交技术来检测目的基因是否转录出了mRNA。3．(2018·广州毕业班测试)现有重组质粒甲(共含2686个碱基对，不含T－DNA)和乙，为避免基因反接，研究人员用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割重组质粒甲、乙，再利用所得片段构建了重组质粒丙(如图所示)，然后采用农杆菌转化法将丙导入胡萝卜愈伤组织细胞。培养后得到转VP1基因胡萝卜植株。请回答下列问题：贮存在一个受体菌克隆子群体中；基因组文库含有某种生物的全部基因，基因中含有启动子和内含子，只有部分基因可以在物种间交流。，针对大一的学生上大学之后存在一段的迷茫期，他们之所以迷茫，是因为他们没有奋斗的目标，是因为没有班主任在每天的早自习对他们进行了教育，以往他们的学习目标性都十分的明确，小学目的就是升入一个比较好的高中，上初中是为了上比较好的高中，上高中为了去一个比较好的大学。可真的到大学了，他们究竟应该怎么办不知道了?他们缺少一定的奋斗目标，在这个特殊的心理时期，我给他们开了主题班团会，给他们专题讲授职业生活规划，帮他们一起确定自己在大学的奋斗目标。让他们觉得原来的那个爱唠叨的班主任还在，还是有人管他们的。我个人觉得，大一时期是大学四年非常重要的一个时期，也是基础，是需要认真对待的，所以在每天固定课室的早读、晚修我都非常重视，除找同学谈心外，更有重点的进行主题教育活动，使大家尽量避免懒散，养成良好的个人学习、生活、工作习惯。所以大一，我主要是从养成教育入手，有针对性的对大一新生进行养成教育、校情校貌教育、安全教育、心理教育、适应性教育、为人处世教育等。

(二)谈心工作

大学生心理问题一直都是辅导员工作的重中之重，大学生的整合程度相对来说较低，他们个人与班级并没有联系起来的纽带，对于大学生日常生活最重要之一的教室是一个流动是场所，就像一个临时停靠站一样，在这停两站，明天又在不同的地方上课。没有固定的教室就没有一个家，个人永远是个人，他们和集体之间没有联系，更不要说纽带了，由此可以看出，缺乏一定的社会整合使大学生感觉自己没有归属感，没有集体责任感，没有了学生人人向往的家，向往的那份信念，他们没有一个统一的思想。虽然他们现在有固定的课室，但也只是相对稳定而已。

为此我以寝室、班级、特殊学生等为单位在我的学生中进行了谈心工作，和学生们聊学习，聊生活，聊兴趣爱好，在大家发言中留意每一个学生的状况，一旦发现问题及时解决。在谈心过程中我也会和大家分享我的大学寝室生活，讲讲发生在我身边的故事，让每一名同学在寝室中首先找到自己的家，让他们觉得自己不再孤单。在开展班级团日活动、主题班会的过程中，又让同学以寝室为单位出节目，通过这一形式，让每一个寝室在班级这个集体中找到自己的归属。

(三)深入沟通

坚持“三个深入”和“两个沟通”的工作理念。三个深入”即经常深入到课堂、经常深入到寝室、经常深入到班级。“两个沟通”，即经常和学生沟通，经常和学生家长沟通。利用自己住校的便利条件，经常深入寝室，与学生进行沟通，及时发现学生在寝室生活中出现的问题，和各位班委一同解决。定期与学生家长进行电话沟通，将学生在校各方面情况向家长进行反馈，与家长一起把小孩教育好，使小孩在各方面得到很好的发展。

管理学家说：“高级管理者，引导人的思想。低级管理者，管理人的行为。”作为一名辅导员，十分注重学生思想政治教育工作。主要从以下三个方面开展工作。

(一)班委带头，学生跟进

作为一