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文档简介
第十六章弯曲菌属与螺杆菌属第一页,共十九页,编辑于2023年,星期五第一节弯曲菌属是一类呈逗点状或s形的G-菌,广泛分布于动物界,其中有些可引起动物与人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染等疾病。对人致病有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯曲菌等,其中空肠弯曲菌是腹泻的常见病原菌。第二页,共十九页,编辑于2023年,星期五
该菌借助于鞭毛和外膜蛋白与空肠上皮细胞结合,侵入生长繁殖,产生肠毒素、细胞毒素和内毒素等物质,引起肠炎和肠道外感染。腹泻是空肠弯曲菌感染最常见的临床表现,转为粘液脓血样便,甚至血便。有发热腹痛、恶心不适等症状。可在1周内消退,20%患者症状可持续1-3周。第三页,共十九页,编辑于2023年,星期五微生物特性1.形态结构G-菌体弯曲呈逗点。无芽孢有鞭毛。运动活泼,呈投镖样为其特征。2.基因组及抗原成分基因组大小仅为大肠杆菌的35%;DNA的G+C为30-38mol%。按O抗原不同分为65个血清型。3.培养特征为微需氧菌,最佳气体环境通常为含5%氧气、10%二氧化碳及85%氮气。4.抵抗力不强,在室温下可迅速死亡。对热敏感,标本在4℃冰箱可保存3周。第四页,共十九页,编辑于2023年,星期五微生物检验
1.粪便直接镜检,G-呈弧形、呈投镖式运动。2.核酸检测粪便弯曲菌flaA基因,体外扩增空肠/大肠弯曲菌为1.3kb。3.分离培养粪便等标本可接种选择平板进行分离,置微氧环境培养。空肠/大肠弯曲生长温度为43℃,培养24h可观察为灰白湿润、扁平边缘不整的蔓延生长的菌落。第五页,共十九页,编辑于2023年,星期五鉴定要点1.为氧化酶阳性,G-菌体弯曲或呈S型。2.萘啶酸、头孢噻吩敏感试验:空肠弯曲菌对萘啶酸敏感、噻吩耐药;胎儿弯曲菌对萘啶酸耐药、对头孢噻吩敏感。第六页,共十九页,编辑于2023年,星期五3.马尿酸盐试验:有助于鉴定空肠弯曲菌空肠亚种,凡试验阳性、在42℃条件下生长,氧化酶阳性且与镜检形态相符者,即可报告为空肠弯曲菌空肠亚种。4.醋酸吲哚水解试验:空肠弯曲菌为阳性,胎儿弯曲菌为阴性。第七页,共十九页,编辑于2023年,星期五5.用抗体包被的乳胶颗粒,遇到相应的弯曲菌时便可出现反应。可用于鉴定空肠/大肠弯曲菌,具有高度敏感性和特异性。6.DNA探针:DNA-DNA杂交可以用于鉴别大肠弯曲菌与马尿酸水解阴性的空肠弯曲菌、区别空肠弯曲菌和其他的弯曲菌。第八页,共十九页,编辑于2023年,星期五第二节螺杆菌属
幽门螺杆菌与萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃疡和胃癌等疾病相关。HP感染非常普遍,平均世界人口的50%被感染。第九页,共十九页,编辑于2023年,星期五三、微生物特性
1.G-,细长弯曲呈螺形。一端或两端有多根带鞘鞭毛,运动活泼有动力。鞭毛在定居中起锚住作用。2.基因组较小,约1.67×106bp,DNAG+C百分含量为37mol%,较重要的基因有脲酶基因
urea、ureB、ureC,细胞毒素相关基因cagA,空泡毒素基因vacA。脲酶基因定位在DNA的
4.2kb区段内。第十页,共十九页,编辑于2023年,星期五3.HP菌株间具有共同抗原。与空肠弯曲菌菌体外膜蛋白无交叉免疫反应,但其鞭毛蛋白具有明显的交叉反应。第十一页,共十九页,编辑于2023年,星期五3.培养特性1.HP为微需氧菌,在5%O2、10%C02、
85%N2的中生长良好。最适温度为
37℃,25℃不生长,42℃少数生长,此与弯曲菌属不同。第十二页,共十九页,编辑于2023年,星期五2.HP对湿度(85%以上)要求较高,营养要求较高需含血液才能生长,常用血琼脂培养基,需经72h才长出菌落,故在培养基中添加多粘菌素B(250U/L)、万古霉素(6mg/L)、两性霉素(2mg/L)、TMP(5mg/L)等以抑制杂菌生长。3.HP的菌落形态为圆形孤立的小菌落,无色半透明呈露滴状。第十三页,共十九页,编辑于2023年,星期五4.理化性状HP生化反应不活跃,不能利用糖类。HP具有大量高活力的胞外脲酶,故脲酶活性的测定可作为HP的快速诊断方法。还能产生氧化酶、触酶、碱性磷酸酶、α-谷氨酰转肽酶、亮氨酸胺肽酶和DNA酶等。第十四页,共十九页,编辑于2023年,星期五四、微生物检验
1.分离培养宜用选择培养基,需新鲜配制,倾注平皿后应密封保存于一定湿度的容器一周内用完。注意将标本的粘膜面在培养基上反复涂擦接种。第十五页,共十九页,编辑于2023年,星期五2.培养在含有5%O2、10%C02、85%N2的微需氧和98%以上湿度的环境培养。3.鉴定根据形态和染色性,菌落特征;37℃
生长,43%、25%不生长;氧化酶和过氧化氢酶均阳性、脲酶强阳性;对萘啶酸耐药、头孢噻吩敏感;在1%甘油和1%胆盐中均不生长。第十六页,共十九页,编辑于2023年,星期五4.快速脲酶试验是—种简便实用、快速敏感、较为准确可靠的诊断方法。脲酶试剂由尿素、基质、酚红指示剂等组成,将小块的活组织块放人装有尿素培养基瓶内,如培养基由黄变为红色为阳性,提示该菌脲酶已将尿素分解。第十七页,共十九页,编辑于2023年,星期五5.抗体检测用血清学方法检测患者体内的抗HP抗体(IgG、IgM和IgA)系最常用的无创伤性诊断HP感染的方法。目前已有补体结合试验、胶乳凝集试验及酶联免疫吸附试验(ELISA)等,而以ELISA应用最为广泛,现有商品化的试剂盒,可用于检测患者血清中HP的菌体抗体或脲酶抗体。第十八页,共十九页,编辑于2023年,星期五6.13C或14C标记尿素呼吸试验
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