培养基模拟灌装无菌生产工艺验证方案

姓日部门名署名期草拟人质量管理部草拟人生产技术部草拟人针剂车间审查人针剂车间审查人生产技术部审查人质检中心审查人 质量管理部同意人 质量负责人散发部门：培育基模拟灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺考证小组一、概括2010版2010版GMP及其附录要求进行设计，是专用于小容量注射剂非最后灭菌产品生产使用。某某产品因没法进行F°N8分钟湿热灭菌，以达到 SALW10-6，但处方能够经过微生物滞留过滤器过滤，

故采仑无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一， 保证产品无菌是该工艺最大的难点，减少无菌工艺药品污染风险的两项重要举措为：①人员的培训②无菌工艺考证。按SFDA化学药品注射剂基本技术要求：培育基灌装考证是对设备、环境以及人员操作的一种系统验证，是判断无菌保证水平的重点手段。 故在正式生产前一定按 某某产品生产工艺进行培育基模拟灌装验证。1本次考证重点生产工艺流程图安甑的冲洗称量配料工用具冲洗和灭菌将培育基裸露于设备、 容器密封系统的表面和重点环境条件中，并模拟实质生产达成工艺操作。对装有培育基的密闭容器进行培育以检查微生物的生长并评论结果，将培育基裸露于设备、 容器密封系统的表面和重点环境条件中，并模拟实质生产达成工艺操作。对装有培育基的密闭容器进行培育以检查微生物的生长并评论结果， 确立实质生产中产品污染的可能性。关于失败的考证进行菌种剖析并检查，确认并解决可能造成失败的原由后，从头进行考证。考证次数按2010版GMP附录1要求因该生产线为新建厂区设备，为培育基模拟灌装试验的初次考证，故需进行连续三个批次的考证活动。 ■" '二、考证目的经过该工艺考证活动证明新设计厂房采纳既定的无菌生产工艺能自保证产品的无菌要求；经过该工艺考证活动证明无菌操作有关人员资格，降低人员带入无菌的风险;经过该工艺考证活动保证生产切合现行GMP法例要求。经过该工艺考证活动证明无菌操作有关人员资格，降低人员带入无菌的风险;经过该工艺考证活动保证生产切合现行GMP法例要求。三、考证范围和实行时间1本考证方案合用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前 某某品种小容量注射剂无菌生

.产工2计划考证明行时间为2013年3月〜4月连续三个批次。四、考证小组和职责1考证小组依据考证的内容和考证管理文件要求， 成立考证小组，考证小构成员见下表， 小组人员应在最后考证报告中署名确认。在考证明行前，方案草拟人应付全部有关参加人员进行考证方案的培训， 做好培训记录，并将记录附于考证报告后。姓名职务职责生产技术部经理考证小组组长，负责考证文件的审查和工作整体安排和实行，组织检查和办理考证过程中出现的异样状况技术管理员 负责考证文件的草拟，供给考证过程中有关技术支持，参加考证异常状况检查工作车间主任安排车间岗位人员配合考证工作的实行，对考证过程的异样状况进行辅 车间技术副主任负责考证文件的草拟，供给考证过程中有关技术支持，参加考证异常状; ' 配料岗位人员 负责配料操作和除菌过滤以及灭菌操作并记录洗瓶岗位人员 负责洗瓶和安甑灭菌操作并记录灌封岗位人员负责灌封操作并记录灯检岗位人员 负责灯检操作和产品7天和14天的察看与统计维修员负责考证过程中设备的维修工作，参加考证模拟维修活动QC负责考证有关查验工作和查验数据采集统计工作，参加考证过程异QC经理常状况检查工作，负责考证结束后培育基的灭活办理工作负责考证文件的审查，协调考证有关查验工作，参加考证异样状况检查办理QAQA负责考证文件的审查和文件的归档，协调各部门有关工作详细安排GMP要求，负责有关保证考证活动按方案履行，保证考证活动切合QAQA取样工作负责考证文件的草拟，组织考证方案有关培训，参加考证异样状况检查工作质量负责人各部I［职责负责考证文件的同意，考证证书的签发质量管理部辅助考证活动的履行参加考证异样状况的检查和办理参加考证文件的草拟工作负责考证过程的取样负责生产监察，保证全部数据的真切性和完好性负责考证文件的审批和归档质检中心辅助考证活动的履行，供给必需的取样工具参加考证异样状况的检查和办理负责有关查验工作，供给有关查验数据负责最后培育基的办理生产技术部负责考证活动的履行负责考证数据的采集和有关文件的草拟负责组织考证过程中异样状况的检查和办理生产车间负责考证有关操作活动参加异样状况的检查和办理参加考证文件的草拟和审查工程部辅助考证活动保证其顺利达成维修人员参加考证活动的实行物料管理部辅助供给考证活动过程中所需物料五、风险评估剖析表经过风险评估，确认本次考证活动需要考证的项目可严风险风险描绘性性能重测风险控制举措考证项目指数性环境达不到相关生产要求中高高高成立厂房洁净消毒规程，定期环境监测并趋向剖析培育基灌装全程对环境进行动向监测人员造成污染中高高高人员培训并换衣查核上岗，每批对进入无菌区人员取样监控全部有关人员，模拟生产实际活动后取样，对最多同意人数进行挑战灭菌后的衣服，用具等发生二次污染低高高高考证灭菌后储藏方式和有效期，操作人员培训查核上岗，生产过程中进行严格监控，生产结束后与产品接触表面取样有关考证操作与正常生产一致，生产结束后对重点表面取样，储藏方式和有效期在有关洁净灭菌考证中完成灭菌成效未达到低高中中全部灭菌装载和参数须经过考证，按经考证的操作方式灭菌在设备考证中达成配液/灌封超出规准时限要求低中低中工艺规程中明确规准时限依据工艺规定工序最大时间挑战进行考证灌封设备故障并维修中中低中人员培训，使用前经过试机，并按期设备保护养护模拟维修操作进行挑战验证过滤系统有效性和污染低高高高过滤后对除菌过滤器进行起泡点测试，使用行进行清洁和灭菌办理在无菌过滤系统工艺考证中达成，并取过滤后的药液进行无菌检查取样工具，记录等传入污染中低高高全部有关工具，记录等进入无菌区随厂房消毒，暂时需要的经酒精消毒和紫外加消毒从传达窗进入在消毒成效考证中达成洁净工具和清洁消毒剂使用带来的污染低高高高洁净工具需灭菌，洁净消毒剂需除菌过滤后进入无菌区在无菌过滤成效和设备验证中达成灌封所用安甑造成污染低高高高工艺规程规定安瓿的灭菌参数和暂存时间在洗烘线考证中达成灭菌成效和单向流保护，动向监测灌封前地区，对灭菌后的

缩污证考$3安瓶进行取样B曲品

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寸Hl苦15Eo__-，一匚二43关于中拟中控，倒瓶，倒义况进行挑战考证液，破产品裸露过长中一带来的风险挑战工艺规程中同意的最低 J慢速度进行灌高低~~严格控制同意的灌封六、考证项目的合格标准与详细活动保证已达成以下考证和确认工作WFI和PW系统考证HVAC系统的考证压缩空气系统的考证过滤系统的考证无菌区人员换衣确认灭菌系统灭菌成效和储藏期确认洗烘灌联动线确认无菌区洁净消毒方法考证恒温恒湿箱确认配制罐确实认无菌剖析方法学考证保证以下文件已有草案或奏效某某品种的生产工艺规程某某品种的批生产记录TOC\o"1-5"\h\z配料岗位 SOP工用具办理岗位 SOP洗烘瓶岗位 SOP灌封岗位 SOPSOP95%SOP95%，产品同意污染概率不考证可接受标准依据《药品生产考证指南 2003版》有关规定：无菌性的可置信限度为得大于0.1%（即无菌分装药品的无菌保证水平SAL不得低于10-3）。其合格标准见下表模拟灌装数目/得大于0.1%（即无菌分装药品的无菌保证水平SAL不得低于10-3）。其合格标准见下表模拟灌装数目/瓶污染控制数目/瓶299647436295N7752|〜4742 ^0〜6294 <1，7751W3W2依据《药品生产质量管理规范2010版》附录无菌药品第47条有关规定：培育基灌装的数目应该起码等于产品的批量。足以保证评论的有效性。批量较小的产品，装试验的目标是零污染，应该依据以下要求：（一） 灌装数目少于5000支时，不得检出污染品。（二） 灌装数目在5000至10000支时：有1支污染，需检查，可考虑重复试验；有 2支污染，（三） 灌装数目超出10000支时：养基灌装容器的数目应该培育基模拟灌需检查后，进行再考证。有1支污染，需检查；有2支污染，需检查后，进行再考证。（四）发生任何微生物污染时，均应该进行检查。综合上述标准，本次考证数目 定在5000~6294瓶之间，灌装量为2ml，且其污染数不得超出 1瓶。4考证活动前其余准备工作金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、黑曲API鉴识菌种试纸，经灭菌的具塞三角瓶 1023〜28°C和30〜35°C的培育地区以及便于察看和运输的中转经确认合格的胰酶酪胨大豆肉汤培育基（TSB）250gX金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、黑曲API鉴识菌种试纸，经灭菌的具塞三角瓶 1023〜28°C和30〜35°C的培育地区以及便于察看和运输的中转5工用具灭菌和准备干净服和设备提早一天进行灭菌， 按有关干净服和设备提早一天进行灭菌， 按有关SOP要求储藏，将将无菌操作区提早一天按洁净SOP要求进行洁净消毒，需要使用的消毒剂提早一天进行无菌过滤准备，按生产工艺流程提早一天领取TSB和有关包材寄存在车间内。配料配料前取该岗位所需注射用水进行内毒素检查，保证内毒素查验合格后，取胰酶酪胨大豆肉汤培育基（TSB）360g按《配料岗位操作SOP》加入已洁净灭菌的配料罐中，慢慢加入60C以上注射用水12L，搅拌10分钟使溶成均匀溶液（注：此处按实质生产工艺操作，将此中的原辅料换成TSB）。QA用灭菌的具塞三角瓶在配料间取样50ml，在瓶身注明取样地点、取样数目、取样时间和样品名称后送质检中心测定溶液中微生物负载。其合格标准应W除菌过滤用经提早一天灭菌（能否使用行进行完好性测试按新工艺规程定） 的um聚醚砜除菌过滤器，过滤上述培育基溶液。QA取50mlX2瓶过滤完的培育基，在瓶身注明取样地点、取样数目、取样时间和样品名称后送质检中心进行 14 天培育的无菌性检查（如有菌生长需对样品进行菌种判定），其余量分装于已洁净灭菌的中转储藏罐中。 滤芯在过滤完后进行气泡点测试， 以确认滤芯的完好性。 另取经除菌过滤的培育基180ml分装于 18支10ml的试管中，送质检中心进行培育基的微生物生长实验。培育基无菌性检查方法：此中一只三角瓶样品在 23〜28°C培育14天；另一支三角瓶在30〜35°C培育14天。可接受标准：两只三角瓶中的培育基在 14天内应无任何微生物生长。培育基的微生物生长试验：方法：质检中心QC人员将QA所取的18支样品，在2支10ml试管中接种枯草芽孢杆菌，接种量V100cfu/管，另取一支作为空白比较；在 2支10ml试管中接种白色念珠菌，接种量V 100cfu/管，另取一支作为空白比较。其余每 2支接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉、生孢梭菌，接种量V绿假单胞菌、哧枯草芽孢杆菌、、生比较管应接受标生长则判倨内培育100cfu/管，分别另取4支作为空白比较。接种后盖塞、封口并分别在 30〜35C（金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、哧枯草芽孢杆菌、、生比较管应接受标生长则判倨内培育IS比能生长遍切合绿驰黑曲矗所接种的屐物天生长，且空白8洗烘瓶生产操作人员将提早一天领取的安甑 8000只，按《洗烘瓶岗位操作 SOP》和有关工艺要求实时进行清洗灭菌。若洗烘瓶或灌封过程中消耗过大，应实时增补冲洗安甑保证灭菌合格安甑超出 6294瓶。9灌装加塞：将经地道烘箱灭菌合格的安甑送入灌装线， 开启灌装机，在与实质生产环境同样的条件下，将过滤后的培育基溶液灌入安甑内，并封口，调理装量为 2ml/瓶，用干净区无菌空气取代惰性气体。无菌灌装时限5~6小时（由生产工艺规程定）。全过程，设备慢速运转（灌装速度 120支/分钟）。控制灌装模式，设置灌装前中后三个阶段，每个阶段约灌装 2000支，其余时间设备正常运转（不走瓶），每灌封一盘实时记录好灌封时间和盘号放在装中间产品的盘内。灌封完的样品实时传出无菌区。最差灌装条件的模拟：设备模拟维修：在灌封正常运转过程中，停灌 30分钟，进行设备模拟维修，保持现有人员在操作间内，维修结束按相应的洁净 SOP消毒后后标志设备再次运转后一盘样品（约230支），并在记录上做好备注。模拟现场人员最大控制数在灌装正常运转过程中，模拟现场最多人员同意数，如 7人，标志该过程中生产出的一盘样品（约230支），并在记录上做好备注。模拟灌装针/管调整、改换在灌装正常运转过程中，进行紧迫停机，模拟调整、改换灌装针 /管2支或以上，标志改换针 /管后灌装的一盘样品（约 230支），并在记录上做好备注。模拟空瓶倒瓶、破瓶在灌装正常运转过程中，模拟倒瓶，破瓶状况，停灌办理，办理结束后持续灌装，标志今后灌装的一盘样品（约230支），并在记录上做好备注。 模拟药液瓶破瓶 在灌装正常运转过程中， 模拟有药液瓶破裂，停灌办理，办理结束后持续灌装，标志今后灌装的一盘样品（约230支），并在记录上做好备注。模拟中控抽样办理的过程在灌装正常运转过程中， 模拟三次抽样测定可见异物、含氧量和装量的过程，抽样过程中进行灌封， 标记对应的三盘，并在记录中做好备注。灌装过程的中间控制接触碟和沉降菌的取样应做好空白比较。人员表面微生物取样： 对进入灌装地区的全部人员走开无菌区行进行许多于5个地点的用接触碟进行表面微生物取样，可选用样部位包含：手套、眼镜、手臂、额头、口罩和前胸以及取样人员以为可能污染的地区。合格标准为每个进入 A级区操作人员每人均匀数V1cfu/碟（①55mm），且每个碟子不得超出1cfu；B级区人员为W5cfu/碟（中55mm）。沉降菌的动向监测：对灌装全过程中应付灌装 A级地区进行全程动向沉降菌监测，每过 2h改换取样碟，取样地点设为灌装针头处，出瓶口，和封口处以及取样人员以为可能污染的地区。A级区经时间折算后均匀值V 1cfu/4 小时/皿（中90mm），且每皿不得超出 1cfu/4 小时。对灌装地区悬浮粒子的全程动向监测：设备上自带监控系统一定知足所监控悬浮粒子数（N取样部位选定为尽可能凑近灌um）<3520/立方米。灌封过程中选定灌装针头处，取样部位选定为尽可能凑近灌um）<3520/立方米。灌封过程中选定灌装针头处，1立方米，要求其折算后均匀装处， 合格标准为所监控悬浮粒子数（N对灌装地区的动向浮游菌取样：出瓶口，和封口处以及取样人员认为可能污染的地区进行浮游菌取样，每个部位取样值V 1cfu/立方米。操作达成后对重点设备表面取样：有关操作程序结束后，对重点设备表面进行取样，以清除设A级区的过滤器、呼吸器等，A级区的过滤器、呼吸器等，1cfu。3支已灭菌的安瓿瓶搁置在装有23〜28°C和30~35°C环境内各翻转三次保证培育基与包材内污染，取样部位包含：灌装针头，出瓶后转盘，暂存药液的储罐，要求平均数V1cfu/碟（中55mm），且每个碟子不得超出对安甑的取样：在考证过程的前、中、后期分别取足量已灭菌的无菌培育基的三角瓶内，并做好标志，先后在培育七天，要求无菌生长。全部进入无菌区人员均应登记出入时间。10灯检检查将已灌封完成的产品传入灯检地区，壁充足接触， 剔除破瓶，将其余产品按原灌装盘号分别装盘送培育地区，每盘内放入原灌封物料标签和灯检合格数目。11培育将灯检完的产品先搁置在23〜28C环境内培育7天，时期在第三天将全部产品翻转一次，在第七天察看污染数；后来转入30~35C环境中内培育7天，在第七天培育结束后统计污染数。接受标准：依据实质观察数，依据本文件 和项目要求，5000~6294之间，污染总数应< 1支，若超出1支，除非有明确证明是破瓶所致，不然该考证失败。发现被污染的样品应进行菌种剖析。培育基阳性比较试验因培育基灌装过程中，全部样品无菌过滤后进行了时限储藏和高温灌封操作， 为保证这些操作不影响培基的促生长性，故从灯检完产品tl以—天已经出现显然微生物生长的西林瓶，各组各取支进行样样娜楠较白分为珠菌3组tsWK!基的促生长性，故从灯检完产品tl以—天已经出现显然微生物生长的西林瓶，各组各取支进行样样娜楠较白分为珠菌3组tsWK!现显然的111瓶进行镜检、API等已确立是增添的菌。此中一组西一七、可能的误差或漏项的办理评论无菌模拟灌装试验结果的主要指标之一是微生物污染水平，假如试验结果证明其污染水平超出规定的合格限度，则应立刻停止生产， 检查并记录污染产生的原由。 在检查结束并采纳相应的举措后应重复进行培育基无菌模拟灌装试验。原由检查起码应包含以下项：a、 生产环境微生物监测数据；b、 生产环境悬浮粒子监测数据；c、 人员和设备污染的监测数据；d、 生产环境浮游菌监测数据；e、 操作间的空气流向、压差；、操作人员的操作方法、培训状况；g、 模拟灌装试验过程中的异样状况；h、 无菌室生产工具及其余用品的储藏状况；、鉴识污染微生物的种、属，以找寻污染源的线索；、无菌室的洁净、洁净堆规程的培训及履行状况；k、无菌生产用设备的控制系统和监测系统的校订；、生产后过滤器的完好性检测结果；m、有关产品、有关生产过程存在的问题等。原由检查结束后，应依据检查所确立的或可能发生的原由拟订纠正或改良方案并予以实行。当改良方案实行以后应重复模拟灌装试验。八、再考证周期1当空气净化系统、灌封和过滤设备、 除菌过滤和灌封工艺以及灌封操作人员重要更改后，应该重复进行培育基模拟灌装无菌生产工艺考证。2当空气净化系统连续停机超出1个月，从头开启生产前未出现异样状况时也需每半年起码进行一个批次培育基模拟灌装无菌生产工艺考证。九、附件《培训记录》，《表面微生物监测记录》，《悬浮粒子监测记录》，《沉降菌监测记录》，《浮游菌监测记录》，《菌种鉴识记录》，~《细菌内毒素检测记录》 ;~《确认有关考证和确认工作》，《确认有关文件》，《培育基信息确认表》，《TSB培育基过滤前微生物限度检查》，《TSB培育基无菌性检查记录》 ，《培育基微生物生长试验》，《安甑瓶无菌检查记录》 ，《人员出入无菌区登记台账》，《培育基灌封试验产品培育过程温湿度记录》，《模拟灌封样品培育最后结果记录》 ，《培育基微生物阳性比较培育结果》和《TSB（小容量注射剂多少规格）批生产记录》。附件1确认有关考证和确认工作项目考证报告文件号考证有效期至检查结论WFI系统考证切合□不切合口PW系统考证切合□不切合口HVAC系统考证切合□不切合口压缩空气系统考证切合□不切合口过滤系统考证切合□不切合口灭菌设备确认切合□不切合口灭菌储藏和效期考证切合□不切合口洗瓶机确认切合□不切合口地道烘箱确认切合□不切合口灌装机确认切合□不切合口无菌区洁净消毒考证怛温怛湿箱确认切合□不切合口切合□不切合口配制罐确认切合□不切合口无菌剖析方法学考证切合□不切合口备注确认人/日期复核人/日期附件2确认有关文件文件名称检查结论文件名称检查结论工艺规程切合□不切合口配料岗位SOP切合□不切合口批生产记录切合□不切合口灌封岗位SOP切合□不切合口工用具办理岗位SOP切合□不切合口洗烘瓶岗位SOP切合□不切合口配制罐洁净、操作和保护养护SOP切合□不切合口灭菌柜洁净、操作和保护养护SOP切合□不切合口洗瓶机洁净、操作和保护养护SOP切合□不切合口地道烘箱洁净、操作和保护养护SOP切合□不切合口备注确认人/日期复核人/日期号供给商 上海中科昆中生物科技开发有限企业,加1L蒸馏水，加热溶解；分装，121°C高压灭菌15min。若本品方有育A培育,加1L蒸馏水，加热溶解；分装，121°C高压灭菌15min。若本品方有育A培育L基过滤前微生物限度检查条灌证批号试验方法 将法中人/日期：复核人/日期:ml的TSB先在23〜28C培育48h,再在 30〜35C培育48h,统计菌落数。培育时间24h48h72h96h菌落数(cfu/ml)结论口合格（W结论口合格（W1cfu/ml口不合格确认人/日期:复核人确认人/日期:附件5' TSB培育基无菌性检查记录培育基灌封考证批号 培育日期 培育天数 1. 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 1423~28C培育3035C培育 备注（打"-”表示不、长菌，打“+表”示长菌）结论□合格（培育14天后均无任何微生物生长） 口不合格H晶二【_A/口甘口 ―Q主方A/口甘口 H用K八/1—1为。:攵/|久八/1—1/VJ:.I ■

附件6培育基微生物生长试验培育!试验菌种」枯草:菌白色:金黄，球菌铜绿，菌黑曲;生孢备注结论;口不，确认'基灌封考证批号□ 、舌C 六白/rN人心称困种］信息培育条II试管1 h芽孢杆V管2 空白结论念珠菌色葡萄假单胞霉梭菌“+”表示阳性，口合格（全部丰合格 “-”表示阴性美种管出现显然的所接种的微生物的生长，空白管