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文档简介

一、简答题（15460分而革兰氏菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色复染，就使革兰氏菌呈红色。操作中应注意的问题：革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度，如脱色过度则阳性菌可被误染为菌而脱色不够时菌可被误染为阳性菌。此外，菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间过长，或已及部分菌自行溶解了，都常呈反应。（天然培养基：适合配制用的各种基本培养基及大生产中的半组合培养基（semi-definedmedium）（二）液体培养基：在中主要作各种生理、代谢研究和获得大量菌体之用；在生产实践上，绝大多数发酵培养基都采用液体培养基。（三）二、论述题（20240分答：1样品的稀释25mL225mL无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)1：10的样品1mL1：101mL，沿管壁缓慢9ml稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面)，振1：100的样品匀液。按6.4.1.2操作程序，10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，1mL无菌吸管或吸头。2个～3个适宜稀释度的样品匀液(液15mL～20mL46℃的平板计数琼脂培养基(的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(4mL)6.4.2.1条件进行30CFU～300CFU30CFU300的可记录为多不可计。每检样25ml样品+225ml稀释液，均质10倍系列稀释选择2个～3个适宜1mL15mL～20mL平板计数琼脂培养基，混匀计算菌落总数报告36℃±1℃48h±2h培养计算各平2，代表一个平板菌落数。答（一）微生物样 微生物样 应具有代表性，否则检验结45℃下不超过15min2℃～518h。30min，同时超净工作台也30min需用肥皂或液洗手，然后在缓冲间更换工作服、帽子、、鞋，用75%再次擦拭双手或戴上手套，方可进入操作。菌落总数测定时，要根据样品状况选择2～3个适宜稀释度的样品匀液进行充分摇匀，同时应更换吸管或微量移液枪吸头。平板计数琼脂应在46℃水浴锅15mL～20mL较为适宜，平板过厚影响观察，太薄易于干裂。倾注时，培基底部沉淀物，应将底部弃去，以免与菌落而影响计数宜超过15min，以防止细菌有所或繁殖；还有就是细菌容易吸附在玻璃平皿上，造成片状菌落。有些食品，如肉制品中的微小颗粒易与细菌菌落发生，4℃环境中放置，以便计数时作对照养时间较长，用于倾注的孟加拉红培养基量应稍多，约为20mL，以保证培养时长，有助于计数，但其对光敏感，易分解成一种黄色的对细胞作用的物质，所以孟加拉红培养基应用不透光的容器装好或袋子包好，在4℃冰箱中。已 将霉菌培养物灭菌外，还要对培养箱、培养室进

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