DB15T 3075-2023 规模化羊场圈舍空气中有害微生物含量的测定方法

发布发布内蒙古自治区市场监督管理局2023-07-302023-06-30DeterminationmethodofharmfulmicrobialcontentintheairoflargescalesheephouseICS65.020.30CCSICS65.020.30CCSB40内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准DB15/T3075—2023规模化羊场圈舍空气中有害微生物含量的测定方法DB15/T3075—2023DB15/T3075—2023II前 言本文按GB/T1.1—2020《准工导则 第部分标化件结和起规》起草。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。DB15/T3075—2023DB15/T3075—2023DB15/T3075—2023DB15/T3075—2023培养基制备培养基制备GB4789.3（VRBA）AA.1。GB4789.10Baird-Parker（第二法金黄Baird-Parker）AA.2。GB/T13091AA.3。GB/T18204.3AA.4。GB/T18204.3AA.5。采样4.2.1 14 规模羊场 largescalesheepfarm存栏基础母羊达到500只以上的标准化羊场。下列术语和定义适用于本文件。3 规模化羊场圈舍空气中有害微生物含量的测定方法范围（GB4789.2 GB4789.3 GB4789.10 GB/T13091 GB/T18204.3 公场卫生验法 第部空气生物22分别于8:00、14:00、20:00采样。圈舍对角线五点法采样，周边4点距墙面1.5m，采样点距地面1.5m。按照GB/T18204.3中的自然沉降法执行，采样点设置3个平行，静置5分钟。平板菌落计数按照GB4789.2规定的方法计数，每个采样点取3个平板的平均值计算。微生物含量微生物含量以cfu/m3为记，按照奥梅梁斯基公示计算。微生物含量（cfu/m3）=50000*N/ATA：平板面积，单位为cm2；T：平板暴露时间，单位为min；N为平均菌落数，单位为cfu。30%卵黄盐水50mL与经过除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL混合，保存于冰箱内。制法pH7.0±0.295mL，121℃15min5095mL50菌剂5mL摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不应超过48h。A.3 345℃～503。Baird-Parker成分附录A（）成分蛋白胨 7.0g酵母膏 3.0g乳糖 10.0g氯化钠 5.0g胆或3胆盐 1.5g中性红 0.03g结晶紫 0.002g琼脂 15.0g蒸馏水 1000mL制法将上述成分溶于蒸馏水中，充分搅拌，调节pH为7.4±0.1。煮沸2min，将培养基融化并恒温至胰蛋白胨10.0g牛肉膏5.0g酵母膏1.0g丙酮酸钠10.0g甘氨酸12.0g氯化锂（LiCl·6H2O）5.0g琼脂20.0g蒸馏水950mL44A.4.2 制法将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，调节pH为7.2～7.6，121℃、20min灭菌，冷至50℃～55℃倾注平板。成分1000mL蒸馏水其选择性，本培养基宜于当天制备，第二天使用。成分成分蛋白胨 10.0g牛肉膏5.0g葡萄糖5.0g硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠4.0g煌绿 0.025g或5.0g/L水液5.0mL柠檬铋铵 2.0g亚硫钠 6.0g琼脂 18.0g～20.0g蒸馏水 1000mL制法300mL20mL30mL20mL30mL600mL80pH7.5±0.2，50℃～55注：本培养基不需要高压灭菌，在制备过程中不宜过分加热，避免降低其选择性，贮于室温暗处，超过48h会降低蛋白胨10.0g氯化钠5.0g牛肉膏5.0g琼脂20.0g蛋白胨10.0g葡萄糖40.0g琼脂20.0g氯霉素