新教材生物选择性必修三第1章-第2节-第1课时-微生物的基本培养技术课件

第1课时

微生物的基本培养技术1.掌握培养基的作用及营养成分。2.区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法。3.掌握微生物的纯培养技术。学习目标1.生命观念：理解防止杂菌污染对成功获得培养物及确保

操作者本身安全的重要性。2.科学思维：掌握培养基的制备方法，通过体验，感受科

学研究的严谨性，养成良好的科学研究习惯，提高科学

素养。3.科学探究：尝试阐述酵母菌的纯培养思路及操作过程。素养要求内容索引一、培养基的配制二、无菌技术梳理网络要语必背随堂演练知识落实课时对点练三、微生物的纯培养培养基的配制01梳理教材知识

夯实基础1.概念：人们按照微生物对

的不同需求，配制出供其

的营养基质。2.种类

培养基↓加入凝固剂(如

)

培养基营养物质生长繁殖液体琼脂固体特别提醒(1)固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。(2)病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能利用人工培养基来培养。3.作用：用以

、分离、

、保存微生物或积累其

。4.成分(1)主要成分：

、碳源、

、

。(2)其他成分：还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及

的需求。(3)牛肉膏和蛋白胨：来源于动物，含有

、

和

等营养物质。(4)几种微生物培养时的特殊需求：培养乳酸杆菌时，需要添加

；培养霉菌时，需要将培养基调至

；培养细菌时，需要将培养基调至

性；培养厌氧微生物时，需要提供

的条件。培养鉴定代谢物水氮源无机盐O2糖维生素有机氮维生素酸性中性或弱碱无氧辨析易错易混练前清障(1)所有的培养基中都要加入琼脂(

)(2)培养不同微生物的培养基成分完全一样(

)(3)培养霉菌时需将培养基调至碱性(

)×××思考延伸拓展强化素养试从碳源和氮源的角度分析不同类型的微生物所需的培养基成分的特点。项目自养型微生物异养型微生物碳源

等无机物

等有机物氮源

等无机物

等有机物CO2、NaHCO3糖类NH3、硝酸盐尿素、蛋白质误区警示(1)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常用的无机氮源是铵盐和硝酸盐。(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源和能源。(3)某些微生物之所以需要补充生长因子，往往是由于缺乏合成作为生长因子的物质所需要的酶或合成能力有限。无菌技术02梳理教材知识

夯实基础1.消毒(1)概念：指使用较为

的物理、化学或

等方法杀死物体表面或内部

微生物。(2)适用对象：操作的

、操作者的

和手等。(3)常用方法：

消毒、

消毒等。温和生物一部分空间衣着煮沸巴氏2.灭菌(1)概念：指使用

的理化方法杀死物体内外

的微生物，包括____和孢子。(2)适用对象：用于微生物培养的器皿、

用具和

等。(3)常用方法：

灭菌、干热灭菌和

灭菌等。强烈所有芽孢接种培养基湿热灼烧辨析易错易混练前清障(1)获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染(

)(2)灭菌相比消毒对微生物的杀灭更彻底(

)(3)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用干热灭菌法进行灭菌(

)√√×思考延伸拓展强化素养消毒和灭菌的原理都是使微生物的

变性，借此杀死微生物。无菌技术既要考虑效果，又要考虑操作对象的承受能力，例如，活体生物材料、操作者的双手等只能

，而不能

。蛋白质消毒灭菌关键点拨无菌操作中的5个注意事项(1)用体积分数为70%的酒精消毒效果最好，原因是浓度过高，菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜，酒精不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。(2)接种室、接种箱和超净工作台在使用前，可以用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物。在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。(3)芽孢是某些细菌生长到一定阶段，在细胞内形成的休眠体。孢子是某些微生物的繁殖体。(4)一般情况下，在实验操作过程中，对能灭菌的对象进行灭菌处理，如培养皿及用到的各种器具；对无法灭菌的对象则进行消毒处理，如实验操作者的衣着和双手等。(5)与煮沸消毒法相比，巴氏消毒法的优点是在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少。(6)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免污染环境以及操作者自身被微生物感染。微生物的纯培养03梳理教材知识

夯实基础1.概念：将接种于培养基内，在合适条件下形成的含有特定种类微生物的群体称为

。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为

，获得纯培养物的过程就是

。2.微生物的纯培养步骤(以酵母菌的纯培养为例)(1)微生物的纯培养包括

、

、

、分离和培养等步骤。(2)菌落的概念：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成

的、有一定形态结构的子细胞群体。(3)接种方法：最常用的接种方法是

和

。培养物纯培养物纯培养配制培养基灭菌接种肉眼可见平板划线法稀释涂布平板法(4)平板划线法①原理：通过接种环在固体培养基表面

的操作，将聚集的菌种逐步

到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单个菌落。连续划线稀释分散②操作火焰接种环烧红火焰旁火焰试管口一条缝隙最后一次的划线一末二(5)方法步骤湿热干热平板划线法28方法指导倒平板(1)拔出锥形瓶的棉塞(如图a所示)。(2)将瓶口迅速通过火焰(如图b所示)。(3)用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基(10～

20mL)倒入培养皿，立即盖上皿盖(如图c所示)。(4)等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置(如图d所示)。辨析易错易混练前清障(1)倒平板后，待平板冷凝之后需将其倒置(

)(2)若皿盖和皿底之间溅上培养基，这个培养基不可再用(

)(3)平板划线法接种时，每一次划线前都要挑取菌种(

)(4)酵母菌的纯培养接种方法只有平板划线法(

)(5)培养微生物的温度因菌种不同而稍有差异(

)√√××√思考延伸拓展强化素养1.平板划线法接种菌种时，哪些操作可防止杂菌污染？提示

(1)接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧。(2)划线操作在酒精灯火焰旁进行。(3)接种环蘸取菌液时，要将试管口通过火焰。(4)划线时将培养皿的皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划线，划线后及时盖上皿盖。2.在作第二次划线以及其后的操作时，要从上一次划线的末端开始划线的原因是划线末端含有的细菌数目较

，每次从上一次划线的末端开始划线能够使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐

，最终分散成____

的细菌。3.平板冷凝后，要将平板倒置的原因是平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成

。少减少单个污染归纳总结平板划线操作中三种灼烧的目的不同项目目的蘸取菌液前灼烧避免接种环上可能存在的微生物污染菌种每次划线前灼烧杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端划线操作结束后灼烧及时杀死接种环上残留的菌种，避免菌种污染环境和感染操作者梳理网络要语必背041.培养基用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。2.培养基中含有水、无机盐、碳源、氮源等营养物质，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。3.实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌等。4.消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分微生物，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。5.平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种和分离的常用方法。随堂演练知识落实051.关于微生物的营养，下列说法正确的是A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的无机物仅提供无机盐D.无机氮源也可能提供能量√123456解析

对一些微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源，A错误；CO2是光能自养型细菌的碳源，但不能提供能量，B错误；除水以外的无机物种类繁多、功能多样，如CO2可作自养型微生物的碳源，C错误；硝化细菌所利用的氮源是无机氮源——氨，同时氨的氧化过程也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源，D正确。1234562.(2020·山西临汾一中月考)将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量的蔗糖和琼脂，用蒸馏水定容后灭菌，得到M培养基。下列有关叙述不正确的是A.若在M培养基中加入青霉素，可用于真菌的筛选B.培养细菌时，需要将培养基调至酸性C.M培养基中马铃薯浸出液可为微生物提供无机盐D.倒平板时，应将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙√123456解析青霉素能抑制细菌的繁殖，但对真菌不起作用，因此若M培养基中加入青霉素，可用于真菌的筛选，A正确；培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性，B错误。3.下列选项中不含有微生物的是A.洗干净的脸上

B.洗完澡后的皮肤C.刷完牙后的口腔

D.灼烧之后的接种环解析用清水洗脸、洗澡、刷牙只是起清洁作用，达不到灭菌效果，只有灼烧过的接种环才是真正无菌的。√1234564.下列关于倒平板的叙述，错误的是A.右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞，为避免污染需在酒精灯

火焰附近进行B.倒平板整个过程应在火焰旁进行C.完全打开培养皿皿盖，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立

即盖上培养皿的皿盖D.为避免水滴滴入培养基，平板应倒过来放置√123456解析C项应是用拇指和食指将培养皿皿盖打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是完全打开，目的是防止杂菌污染。5.(2020·江苏苏州月考)微生物接种的方法很多，平板划线法是常用的一种。如图是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④。下列相关叙述错误的是A.划线操作时，将蘸有菌液的接种环插入培养基B.平板划线后培养微生物时要倒置培养C.不能将第④次的划线与第①次的划线相连D.在第②～④次划线前都要对接种环进行灭菌√123456划线时要避免最后一次的划线与第一次的划线相连，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，C正确；在第②～④次划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，D正确。123456解析

划线时不能将接种环插入培养基，而是在培养基表面划线，A错误；用平板培养基培养微生物时，为防止水蒸气凝集滴入培养基造成干扰或污染，应将平板倒置培养，B正确；6.如表是某种微生物培养基的配方，回答下列问题：123456牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水0.5g1g0.5g2g定容至200mL(1)此培养基的营养成分有四类，其中蛋白胨提供的营养物质是_______________。(2)微生物培养最基本的要求是无菌操作。液体培养基应选用的灭菌方法是_________(填“湿热灭菌”或“干热灭菌”)；与煮沸消毒法相比，巴氏消毒法的优点是____________________________________。氮源和维生素等湿热灭菌达到消毒目的的同时，营养物质损失较少(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_______。划线的某个平板培养后，第一次的划线上长满了菌，第二次划线的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_______________________________________________。123456接种环接种环灼烧后未冷却，划线未从第一次划线的末端开始课时对点练06A组基础对点练题组一培养基的配制1.下列有关培养基的叙述，正确的是A.培养基只能是天然物质B.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌C.固体培养基上可形成肉眼可见的菌落D.培养基只能培养细菌√123456789101112131415161718解析

培养基可以是天然物质，也可以是人工合成的物质，A错误；微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个菌落，肉眼不能观察到单个细菌，B错误、C正确；培养基能培养细菌，也能培养真菌，D错误。1234567891011121314151617182.(2019·北京期中)已知某种细菌以CO2为唯一碳源，下列相关叙述正确的是A.可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型B.无机盐是该细菌不可缺少的营养物质C.培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质D.培养该细菌的培养基中不需要添加氮源√123456789101112131415161718解析该细菌以CO2为唯一碳源，可推测该细菌的代谢类型为自养型，但不能确定是不是需氧型，A错误；微生物生长一般需要水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，B正确；CO2不能为微生物提供能量，C错误；氮源是微生物必需的营养物质，培养该细菌的培养基中需添加氮源，D错误。1234567891011121314151617183.(2020·四川成都月考)如表所示为某培养基的配方，下列叙述错误的是123456789101112131415161718成分NaNO3K2HPO4MgSO4·7H2O(CH2O)蒸馏水青霉素含量3g1g0.5g30g定容至1000mL0.1万单位A.根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基B.该培养基不能用于培养大肠杆菌C.根据培养基的配方可知，该培养基培养的微生物的同化作用类型是异

养型D.固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基√解析固体培养基和液体培养基的区别在于是否加入凝固剂(如琼脂)，题表所示的培养基配方中没有琼脂，因此属于液体培养基，A正确、D错误；加入青霉素会抑制细菌的生长繁殖，B正确；该培养基中的(CH2O)可作为有机碳源，因此其培养的微生物的同化作用类型是异养型，C正确。123456789101112131415161718成分NaNO3K2HPO4MgSO4·7H2O(CH2O)蒸馏水青霉素含量3g1g0.5g30g定容至1000mL0.1万单位题组二无菌技术4.下列对于灭菌和消毒的理解，不正确的是A.灭菌是指杀灭环境中一切微生物，包括芽孢和孢子B.消毒和灭菌的实质是相同的C.接种环用灼烧法灭菌D.常用的灭菌方法有干热灭菌、湿热灭菌、灼烧灭菌√1234567891011121314151617185.金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，实验中下列做法错误的是A.对接种环进行灼烧处理B.带菌培养基必须经湿热灭菌后才能倒掉C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉D.接种后双手必须经肥皂洗净，再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭√123456789101112131415161718解析带菌培养基必须经湿热灭菌后才能倒掉，简单的加热达不到灭菌效果，C项错误。6.防止外来杂菌的入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是A.实验室里可以用煮沸消毒法或巴氏消毒法进行消毒B.接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的不充分燃烧层灼烧

灭菌C.在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防

止被微生物感染D.玻璃器皿和金属用具等可以采用干热灭菌√123456789101112131415161718解析

灼烧灭菌应该在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，B错误。题组三微生物的纯培养7.下列有关平板划线操作的叙述错误的是A.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红B.接种环在平板上随机划线时不要划破培养基C.在蘸取菌液前后均要将盛有菌液的试管口通过火焰D.平板冷却后倒置，放入恒温培养箱中培养√1234567891011121314151617188.如图是平板划线示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是A.操作前不用进行任何处理B.划线操作必须在火焰上进行C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5次划线的前后都要对接种环灭菌√123456789101112131415161718解析

划线之前应对接种环灼烧灭菌；划线操作在酒精灯火焰旁进行；从第1次划线至第5次划线菌落密度越来越小，因划线所用菌种密度的不同，在第3、4、5次划线中都可能得到所需菌落。9.在平板划线法操作中，错误的是A.将接种环放在酒精灯火焰上灼烧，直到接种环烧红B.将烧红的接种环在酒精灯火焰旁边冷却C.接种环在平板上的划线位置是随机的D.在蘸取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰√123456789101112131415161718解析接种环灼烧及接种前后试管口要通过火焰，其目的是为了防止杂菌污染，将接种环先冷却再接种可以避免高温烫死菌种，因此A、B、D都是正确的；在平板上划线时，要划三至五条平行线，而不是随机划线，因此C选项错误。10.请回答下列与酵母菌的纯培养有关的问题：(1)制备培养基：培养基在接种前要进行_____灭菌。(2)接种和分离酵母菌：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落，这种方法称为__________。123456789101112131415161718湿热平板划线法(3)讨论分析：①纯化酵母菌时，_____(填“可以”或“不可以”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。②用该方法分离酵母菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是________________________________________。③大肠杆菌与酵母菌的最本质区别是_______________________________。123456789101112131415161718可以线条末端的细菌数量少，最终可得到单菌落大肠杆菌无以核膜为界限的细胞核B组综合强化练11.下列有关微生物培养与应用的叙述，正确的是A.同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，所有碳源都能提供能量B.接种前需对培养皿、接种环进行灭菌处理，对操作者的双手等进行消

毒处理C.培养不同的微生物，用同种成分的培养基即可D.微生物生长不可缺少的微量有机物有氨基酸、维生素和蛋白胨等√123456789101112131415161718解析同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，但自养微生物利用的无机碳源不提供能量，A错误；培养不同的微生物，所用培养基的成分往往也有所不同，C错误；微生物生长不可缺少的微量有机物主要包括氨基酸、维生素等，D错误。12345678910111213141516171812.高温灭菌的原理是A.每种微生物生长的最适温度是一定的B.微生物对于高温环境不适应C.高温破坏了微生物的蛋白质等生物大分子，影响其生命活动D.高温降低了环境中氧的浓度√解析高温的致死作用主要是使微生物的蛋白质等生物大分子物质发生不可逆转的变性。12345678910111213141516171813.下列常用的无菌操作中，错误的是A.无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌B.牛奶可用巴氏消毒法消毒C.实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D.玻璃器皿(如吸管、培养皿)可用酒精擦拭进行灭菌√123456789101112131415161718解析玻璃器皿应采用干热灭菌。14.(2019·湖北宜昌月考)下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述，正确的是A.倒好的培养基和培养皿要进行干热灭菌B.应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C.为防止微生物侵入培养基，要在酒精灯火焰旁进行操作D.倒好培养基后，立即将平板倒过来放置，不需要冷凝√123456789101112131415161718解析应该在倒平板之前将培养基进行湿热灭菌，将培养皿进行干热灭菌，A错误；倒平板时，用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿，立即盖上皿盖，B错误；倒好培养基后，等培养基冷却凝固后再将平板倒过来放置，D错误。12345678910111213141516171815.下列依次表示倒平板、接种的位置以及平板划线法接种的路径的示意图，其中错误的是123456789101112131415161718解析平板划线法除第一次划线外，以后的每一次划线都从上一次划线的末端开始。√16.将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上，加盖后，以不同的方式处理，并放置在不同温度的环境中，培养24小时后，所得结果如表：123456789101112131415161718编号abcdef处理方法接种大肠杆菌接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素X的圆纸片接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素Y的圆纸片接种大肠杆菌，表面全被醋覆盖接种大肠杆菌无接种菌温度40℃40℃40℃40℃0℃40℃观察结果全表面呈浑浊纸片周围呈现一片清晰区，其余表面呈浑浊全表面呈浑浊全表面清晰全表面清晰全表面清晰根据上述实验结果所作出的判断，错误的是A.编号a和f比较可知，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊B.根据编号b和c的观察结果，可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强C.将编号e和a的结果比较可知，0℃的环境不适合大肠杆菌生长D.若揭开编号f的盖子，24小时后培养基表面会出现浑浊√123456789101112131415161718解析

a、f的区别在于是否接种了大肠杆菌，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊，A正确；将含有抗生素的纸片覆盖在大肠杆菌的培养基上，可根据培养基表面的浑浊程度判定此种抗生素对大肠杆菌的杀菌能力，可知抗生素X的杀菌能力强于抗生素Y的杀菌能力，B错误；e、a形成对照，其变量是温度，由观察结果可知0℃的环境不适合大肠杆菌生长，C正确；f暴露在空气中后，会自然接种菌种，形成菌落，使培养基表面出现浑浊，D正确。12345678910111213141516171817.为了检测饮用水中是否含有某种微生物，配制的培养基的配方如下，请分析回答下列问题(注：伊红美蓝是由两种染色剂组成的细胞染料)：123456789101112131415161718蛋白胨牛肉膏乳糖蔗糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水10g5g5g5g2g0.4g0.065g1000mL将培养基pH调至7.2(1)该培养基所含碳源