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北师大版选修1生物技术实践《固定化乳糖酶的制备》评课稿实践背景本生物技术实践是北师大版选修1生物课程的一部分，旨在培养学生的实验操作能力和实践技能。此次实践课程主要介绍了固定化酶在工业生产中的应用，并以固定化乳糖酶的制备为例进行操作实践。固定化酶作为一种可重复利用的催化剂，在工业生产中广泛应用。与游离酶相比，固定化酶具有更好的稳定性和活性，可以在相应的微环境中发挥出更好的催化效果，从而提高生产效率。实践目的通过本次实践，学生将会学习到以下知识和技能：熟悉固定化酶的基本原理和应用；学习制备、固定化乳糖酶和初始酶活性检测方法；掌握基本的实验操作技能；培养实验数据记录和处理能力。实践内容实验原理将游离乳糖酶通过一定的技术手段固定在载体上，形成固定化乳糖酶，乳糖酶与载体之间的化学键可强度和持久性变得更高。其具有以下的优点：固定化酶具有更好的稳定性，可以在相应的微环境中发挥出更好的催化效果；固定化酶可以反复使用，降低了成本。本次实践主要包括以下步骤：溶液配制：使用混合物将乳糖酶与载体混合均匀；固定化乳糖酶制备：将混合物和硬化剂混合，制备固定化乳糖酶；固定化乳糖酶活性检测：酶的活性通过比色法测定，即比色试剂与产生的葡萄糖进行反应产生明显的色变。实验步骤溶液配制将5ml混合物加入碘化钾瓶中,通入惰性气体,再加0.3ml硼烷溶液勻匀，并平放30分钟。固定化乳糖酶制备将混合物注入管壳，并在管口处挤压硬化剂，静置炉中65℃育4h固定化乳糖酶活性检测取反应液1ml加入含SSG、酵母粉的管中，放在水浴中煮4min,取出冷却。测定固定化酶对乳糖的降解率，首先我们先将配好的色氨酸、氨溴酸、咖啡酸和酪氨酸溶液各50µL加入各自的孔中，加入10µL的乳糖后，用微量移液器将水加满至300µL的孔中，这里我们使用的是96孔板。然后我们加入25µL的酶液和25µL的对照组，对照组可以是添加了酶液后，马上加入热水（用于杀死酶活性）的样品。反应分别在30、60、90和120s时，加入30µL的Na2CO3停止反应。加入的Na2CO3可以中和样品和试剂中的酸性物质，同时保持反应液的pH值。最终将孔中的反应液移至清洗的底物腔中，可根据酶对底物的催化作用产生的光谱数值，进行酶活检测，计算企业的乳糖酶的固定比为9：1。实践总结通过本次实践，我们对固定化酶的基本原理和应用有了更深入的了解，掌握了制备、固定化乳糖酶和初始酶活性检测方法。同时，我们也更加熟练地掌握了实验操作技能，培养了实验数据记录和处理能力。固定化酶作为一种可重复利

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