第二章白细胞检验

第二章白细胞检验第1页，课件共168页，创作于2023年2月第一节白细胞生理概要

外周血常见白细胞的种类与功能白细胞的寿命和归宿返回上一页下一页第2页，课件共168页，创作于2023年2月学习目标1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组成、注意事项2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形态4.学会白细胞分类计数方法返回上一页下一页第3页，课件共168页，创作于2023年2月外周血常见白细胞的种类与功能

(一)外周血常见白细胞的种类1.白细胞的形态：无色有核，球形，直径7μm～25μm。

2.白细胞的种类（形态分类）：三类五种--------返回上一页下一页第4页，课件共168页，创作于2023年2月

中性粒细胞（N）粒细胞嗜酸粒细胞（E）嗜碱粒细胞（B）白细胞淋巴细胞（L）单核细胞（M）返回上一页下一页第5页，课件共168页，创作于2023年2月白细胞的发育起源于骨髓多能造血干细胞。返回上一页下一页第6页，课件共168页，创作于2023年2月白细胞的功能中性粒细胞：具有较强的运动能力和吞噬活性。胞内酶有复杂的杀菌系统。嗜酸粒细胞：可作变形运动，吞噬抗原抗体复合物，灭活组织胺减轻过敏反应。嗜碱粒细胞：与IgE具有较强的结合力，脱粒释放组胺导致速发性变态反应。淋巴细胞：参与体液免疫和细胞免疫。单核细胞：有强大的吞噬功能，传递抗原信息。返回上一页下一页第7页，课件共168页，创作于2023年2月白细胞的寿命

粒细胞：10～15天淋巴细胞：数天～20余年单核细胞：数月返回上一页下一页第8页，课件共168页，创作于2023年2月白细胞的归宿

衰老的粒细胞被单核-吞噬细胞系统清除，也有一部分从口腔、气管、消化道和泌尿生殖道排出。

B淋巴细胞经抗原刺激后分化为浆细胞，产生特异性抗体，参与体液免疫。T淋巴细胞经抗原致敏后，可产生多种免疫活性物质，参与细胞免疫。粒-单核系祖细胞在骨髓经分化成原始单核细胞后发育为成熟单核细胞，释放入血液。

返回上一页下一页第9页，课件共168页，创作于2023年2月返回上一页下一页第10页，课件共168页，创作于2023年2月学习目标

1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组成、注意事项。

2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法

3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形态。

4.学会白细胞分类计数方法。返回上一页下一页第11页，课件共168页，创作于2023年2月显微镜计数法【原理】

用白细胞计数稀释液，将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后，混匀充入计数池中，在显微镜下计数一定容积内的白细胞数，经换算即可求得每升血液中白细胞的总数。返回上一页下一页第12页，课件共168页，创作于2023年2月显微镜计数法【器材】1.显微镜（目镜10×；物镜10×）2.微量吸管（Hb吸管）传统的Hb吸管玻璃上有10µl和20µl（误差＜±1%）两个刻度。使用前应经严格校正。橡胶乳头提供负压

返回上一页下一页第13页，课件共168页，创作于2023年2月Hb吸管的消毒清洗

每次使用后，应经2ｇ/Ｌ过氧乙酸浸泡2ｈ消毒。然后依次用蒸馏水冲洗，→0.95Ｌ/Ｌ乙醇除脂脱水，→乙醚干燥后，才能再次使用。注意清洗的顺序不可颠倒。返回上一页下一页第14页，课件共168页，创作于2023年2月显微镜计数法3.计数池返回上一页下一页第15页，课件共168页，创作于2023年2月显微镜计数法

3.计数池各池刻划有9ｍｍ2面积的刻度，分为9个大方格，每格长、宽各1ｍｍ，面积1ｍｍ2，体积为0.1ｍｍ３，容量0.1μl。返回上一页下一页第16页，课件共168页，创作于2023年2月计数白细胞的四个大方格

四个角的大方格都用单线划分为16个中方格，为计数密度小的（白）细胞用。容量：0.1μl/大方格返回上一页下一页第17页，课件共168页，创作于2023年2月计数红细胞的五个中方格中央的一个大方格，用双线划分为25个中方格，每个中方格又被单线划分为16个小方格，共有400个小方格，供计数密度大的（红）细胞用。容量：0.1μl/大方格

0.004μl/中方格返回上一页下一页第18页，课件共168页，创作于2023年2月

４.盖玻片

特制的计数池专用盖片，要求玻璃表面平整光滑，有一定重量，不被细胞悬液所抬浮，厚度应为0.4ｍｍ～0.7ｍｍ。盖玻片两面的平整度是：0.002ｍｍ以内，大小:24mm×20mm×0.6mm。返回上一页下一页第19页，课件共168页，创作于2023年2月显微镜计数法【试剂】

白细胞稀释液

冰乙酸2.0ｍｌ

10g／Ｌ亚甲蓝（或结晶紫）数滴

蒸馏水加至100ｍｌ

返回上一页下一页第20页，课件共168页，创作于2023年2月稀释液中各组分的作用蒸馏水—

低渗溶解红细胞，乙酸—

可加速红细胞溶解，同时乙酸能固定核蛋白，使白细胞核显现，便于辨认。染料—

使核略着色，且易与红细胞稀释液区别。

返回上一页下一页第21页，课件共168页，创作于2023年2月显微镜计数法【操作】

１．取小试管１支，加入白细胞稀释液0.38ｍｌ。２．用微量吸管准确吸取外周血20ul。３．擦去管尖外部余血，立即将吸管插入盛有稀释液的试管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液漱洗吸管２次～３次，注意每次不能冲浑稀释液，最后用手振摇试管混匀。返回上一页下一页第22页，课件共168页，创作于2023年2月操作

４.充液将计数板和盖玻片擦净，盖片盖在计数池上，用毛细滴管或玻璃棒取已混匀的细胞悬液1滴，充入计数池与盖玻片间的缝隙中，静置2min～3min，待白细胞下沉。返回上一页下一页第23页，课件共168页，创作于2023年2月镜下白细胞形态

似成熟蚕卵，中央核深染，胞质色淡。

返回上一页下一页第24页，课件共168页，创作于2023年2月显微镜计数法5.计数方法用低倍镜依次计数四角的四个大格内的白细胞数。对于压线的白细胞，应采取数上不数下；数左不数右（左、上计入，右、下弃去）的原则，保证计数域的一致性，使计数准确。返回上一页下一页第25页，课件共168页，创作于2023年2月让我们共同计数下列大格的细胞返回上一页下一页第26页，课件共168页，创作于2023年2月让我们再试一次：返回上一页下一页第27页，课件共168页，创作于2023年2月显微镜计数法

【计算

】

四个大格白细胞数

白细胞数／Ｌ＝————————

×10×20×1064

式中：÷４得每个大格（即0.1µl）内白细胞平均数

×10因一大格容积为0.1µl，换算为1µl

×20血液稀释倍数。

×106将1µl换算为1Ｌ。返回上一页下一页第28页，课件共168页，创作于2023年2月稀释倍数的确认稀释倍数＝（溶质＋溶剂）/溶质注意：体积单位需一致后方能运算。返回上一页下一页第29页，课件共168页，创作于2023年2月请您练习求以下操作的稀释倍数：稀释液（ml）＋血液（µl）稀释倍数

0.38200.48200.39102.0010202540201返回上一页下一页第30页，课件共168页，创作于2023年2月请您练习按常规取血稀释后数得4个大格共有白细胞280个，求白细胞计数结果？解：WBC＝280/4×10×20×106＝14×109/L返回上一页下一页第31页，课件共168页，创作于2023年2月请您练习

取血40ul加入稀释液0.36ml，镜下计数了8个大格共有白细胞320个，求其白细胞计数结果？答案：稀释倍数＝（360＋40）／40WBC＝320／8×10×10×106

＝10＝4×109/L返回上一页下一页第32页，课件共168页，创作于2023年2月白细胞计数计数误差1.技术误差:由于操作不正确和仪器不精确造成的误差。

2.固有误差:因每次白细胞分布不可能完全相同所造成的偏差属固有误差，也称计数域误差。

返回上一页下一页第33页，课件共168页，创作于2023年2月常见技术误差：

血液凝固稀释倍数不准充液不当识别错误器材不符合要求返回上一页下一页第34页，课件共168页，创作于2023年2月固有误差(计数域误差)

根据统计学研究，白细胞在计数池内的随机分布符合泊森分布。从计算公式中可以看出计数范围越大，计数的细胞越多，计数域误差越小。返回上一页下一页第35页，课件共168页，创作于2023年2月注意事项

1、稀释液要过滤使用，试管、计数板等均须清洁。

2、计数池内细胞分布要均匀。总数在参考范围内，每个大方格间白细胞数不得相差8个以上，两次重复计数误差不得超过10%，否则要重新充液计数。

3、遇白细胞数太低者、白细胞数太高者稀释倍数应灵活掌握。

4、当外周血出现大量有核红细胞时应予以校正除去。返回上一页下一页第36页，课件共168页，创作于2023年2月总结1.白细胞的种类按形态分类包括：三类五种

2.显微镜法计数原理：

用稀乙酸溶液将血液稀释并破坏红细胞后，混匀充入计数池中，在镜下计数一定容积中的白细胞数，经换算求得每升血液中的白细胞总数。返回上一页下一页第37页，课件共168页，创作于2023年2月总结3.计数池的结构：分为9个大方格，每个大方格长、宽各1ｍｍ，面积ｌｍｍ2，体积为0.1ｍｍ３，容量0.1µl。

4.稀释液中各组分的作用为：蒸馏水低渗溶解红细胞；乙酸加速红细胞溶解同时固定核蛋白，使白细胞核显现，便于辨认；染料使核略着色，且易与红细胞稀释液区别。返回上一页下一页第38页，课件共168页，创作于2023年2月总结5.Hb吸管的清洗顺序是：蒸馏水冲洗→95%乙醇脱水除脂→乙醚干燥

6.镜下计数时要遵循一定顺序，对于压线的白细胞，应采取:数上不数下；数左不数右（左、上计入，右、下弃去）的原则计数。返回上一页下一页第39页，课件共168页，创作于2023年2月总结计算公式

四个大格白细胞数

白细胞数／Ｌ＝————————×10×20×106

4返回上一页下一页第40页，课件共168页，创作于2023年2月第三节白细胞分类计数一、外周血常见白细胞的形态二、白细胞分类计数返回上一页下一页第41页，课件共168页，创作于2023年2月学习目标1.叙述外周血常见白细胞的形态２.分析白细胞在血涂片上的分布，正确选择分类计数区域３.述说显微镜白细胞分类计数法返回上一页下一页第42页，课件共168页，创作于2023年2月一、外周血常见白细胞的形态经瑞特染色后外周血中常见各种成熟白细胞形态如下：细胞大小、形态细胞核形态、染色质结构细胞浆、特异性颗粒返回上一页下一页第43页，课件共168页，创作于2023年2月（一）中性粒细胞返回上一页下一页胞体呈圆形，直径10μｍ～15μｍ，约为红细胞的２倍。胞质量丰富染粉红色，含大量细小均匀的紫红色中性颗粒。细胞核染色质粗糙不匀，排列紧密成小块状．染深紫红色。根据核的形状分为中性杆状（带状）核粒细胞和中性分叶核（多节核）粒细胞两种。

第44页，课件共168页，创作于2023年2月（一）中性粒细胞

中性分叶核粒细胞的核分２叶～５叶或更多叶，以３叶～４叶为常见．叶间以核丝或核桥相连。分叶的大小、形状和排列各不相同。返回上一页下一页第45页，课件共168页，创作于2023年2月中性分叶核粒细胞的核返回上一页下一页第46页，课件共168页，创作于2023年2月杆状核和分叶核的划分标准

胞核完全分离或核间以丝状相连，或核叶重叠，使核的轮廓看不清，划分为分叶核粒细胞。胞核细长多样，弯曲盘绕，可呈C型、S型、V型或不规则型，划分为杆状核粒细胞。为不完全成熟细胞。返回上一页下一页第47页，课件共168页，创作于2023年2月杆状核粒细胞的核形返回上一页下一页第48页，课件共168页，创作于2023年2月（二）嗜酸粒细胞

圆形，直径13μm～15μm，略大于中性粒细胞。胞核常分两叶，似眼镜形。也可见３叶～４叶者。核染色质粗。染紫红色。胞质中充满粗大、均匀、整齐、紧密排列的橘红色嗜酸性颗粒。偶见少许淡蓝或无色胞质。嗜酸粒细胞较易碎，破碎后颗粒多散在胞核附近。返回上一页下一页第49页，课件共168页，创作于2023年2月（三）嗜碱粒细胞圆形，直径10μm～1２μm，较其他粒细胞小。胞核常被颗粒遮盖，核染色质粗着色较浅，分叶常不明显．形态不规则，清楚时可见２叶～４叶。胞质量较少，常呈淡红或淡紫红色，含少量粗大，但大小不均、排列不规则的紫黑色嗜碱性颗粒，常盖于核上。嗜碱性颗粒易溶于水，故染色时易被溶解消失，而呈淡红色空穴状。返回上一页下一页第50页，课件共168页，创作于2023年2月（四）单核细胞

呈不规则的圆或椭圆形，为外周血中最大的细胞．直径15μm～25μm。细胞核大呈不规则圆形、肾形、马蹄形，或不规则分叶有时折叠卷曲。染色质细致疏松如网状，染淡紫红色。胞质量丰富．染淡蓝、灰蓝色不等，常呈毛玻璃样半透明。胞质内含有大量细小灰尘样紫红色嗜天青颗粒。核凹陷处胞质染色较淡．偶见无颗粒胞质是伪足样伸出。返回上一页下一页第51页，课件共168页，创作于2023年2月

（五）淋巴细胞

按其个体可有大小之分。小淋巴细胞：呈圆形，直径6μm

～10μm。胞核圆形。偶见凹陷，染色质粗糙紧密，排列均匀，无空隙。常有隐约成块现象，核周常有染色质浓集，核膜明显，有时可见潜在核仁。胞质量极少，仅在核的一侧出现一线天蓝或深蓝色，有的甚至完全不见。胞质中一般无颗粒存在，偶见几颗大小不等的紫红色嗜天青颗粒。返回上一页下一页第52页，课件共168页，创作于2023年2月大淋巴细胞：

体积较大直径10μm～15μm，胞核染色质比小淋巴细胞疏松，胞质量丰富，呈透明的淡蓝色，常有少量大小不等的嗜天青颗粒。返回上一页下一页第53页，课件共168页，创作于2023年2月五种白细胞鉴别要点返回上一页下一页第54页，课件共168页，创作于2023年2月点评三种粒细胞主要依据胞质中颗粒形态和染色性质去相互鉴别；淋巴细胞与单核细胞则重点根据细胞核的特征去区别。返回上一页下一页第55页，课件共168页，创作于2023年2月嗜中性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞淋巴细胞单核细胞返回上一页下一页第56页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数

步骤

1．制备血涂片

2．血涂片染色

3．白细胞分类

4．计算百分率返回上一页下一页第57页，课件共168页，创作于2023年2月

白细胞总数与分类白细胞数的关系白细胞总数（×109/L）应分类白细胞个数＜450～1004～1010010～2020020～30300＞30400返回上一页下一页第58页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数法

由于各种白细胞大小不同在血片中分布不很均匀。一般体积较小的淋巴细胞在头、体部较多．而尾部和两侧以中性粒细胞和单核细胞较多特别是异常大的细胞常常在片尾末端出现。返回上一页下一页第59页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数

分类最好是在血膜体尾交界处．由血膜边缘向中央依次上下呈曲线向血膜中间移动，计数不同区域的白细胞，以免重复计数．缩小因细胞分布不匀的误差。返回上一页下一页第60页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数

3.白细胞分类记录方法（1）分类计数器法（2）完全记录法返回上一页下一页第61页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数

4.各类细胞所占百分率乘以白细胞总数/Ｌ．即得每升血液中各类白细胞的浓度数（习惯称绝对值）。某种白细胞数／Ｌ＝某种白细胞％×白细总数／Ｌ

返回上一页下一页第62页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数

5.血片中如有幼红细胞．也应逐个计数，不列入白细胞总数，而是报告分类计数100个白细胞的过程中见到的幼红细胞数，并应注明其所属阶段。返回上一页下一页第63页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数

6.如发现幼稚或异常白细胞应分类鉴定，包括在白细胞分类百分率中。此外还应注意血涂片中有无异常红、白细胞及血小板的大体数量分布情况及寄生虫等。返回上一页下一页第64页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数

注意事项

1.在血涂片选择适宜的分类部位进行细胞分类。

2.移动血涂片的顺序一定要有规律。

3.分类时不能人为地抛弃个别细胞，不能确认者应单独记录比例并用文字描述其形态特征。返回上一页下一页第65页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数

注意事项

4.法线幼稚白细胞应包括在%内，若细胞形态异常也应加以说明。

5.发现有核红细胞（幼红细胞）不计入白细胞%内，而报告“计数×××个白细胞时发现幼红细胞××个，同时要对白细胞计数结果进行校正。返回上一页下一页第66页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数

注意事项

6.如患者WBC少，一张血涂片上分类计数不足100个细胞时可在两张涂片上连续完成。实在有困难时可按“××/50个白细胞”报告（但本法误差大）。返回上一页下一页第67页，课件共168页，创作于2023年2月二、白细胞分类计数

镜检中，对细胞形态力求掌握最根本点，如核形、核染质结构、胞质色泽、颗粒等反复对比。由于染色条件不可能使每一张涂片完全一致，因此细胞大小，染色深浅，色调等变化不是绝对不变的，要学会“具体问题，具体分析”，抓主要矛盾。在注意细胞比例关系变化的同时，更要注意细胞形态有无异常改变。发现特殊变化要及时报告。返回上一页下一页第68页，课件共168页，创作于2023年2月作业1.瑞特染色白细胞核不着色或仅呈极浅蓝色是何原因？怎样校正？2.下列细胞组应重点从哪方面区分：（1）中性粒细胞------嗜酸粒细胞（2）中性粒细胞------单核细胞（3）单核细胞------大淋巴细胞返回上一页下一页第69页，课件共168页，创作于2023年2月返回上一页下一页第70页，课件共168页，创作于2023年2月学习目标1.白细胞总数和各类白细胞分数的参考区间2.白细胞总数和各类白细胞分数的生理变化和病理变化3.中性粒细胞核象变化的意义4.白细胞变化与疾病预后的关系返回上一页下一页第71页，课件共168页，创作于2023年2月第四节中性粒细胞常见的形态变化一、核象变化二、毒性变化三、退行性变化返回上一页下一页第72页，课件共168页，创作于2023年2月一、中性粒细胞核象变化外周血中中性粒细胞核象---指粒细胞的成熟程度，核象变化反映疾病的病情发展和预后。中性粒细胞的核象变化分为核象左移与核象右移两种。左、右移的区分线在杆状与分叶核之间。返回上一页下一页第73页，课件共168页，创作于2023年2月一、中性粒细胞核象变化返回上一页下一页第74页，课件共168页，创作于2023年2月一、中性粒细胞核象变化

１.中性粒细胞核象左移外周血中杆状核粒细胞增多和杆状核阶段以前的幼稚细胞出现称为核象左移。返回上一页下一页第75页，课件共168页，创作于2023年2月一、中性粒细胞核象变化

(1)再生性左移--核象左移伴有白细胞总数增多者。表示机体迫切需要．骨髓能释放大量粒细胞至外周血。常见于急性化脓性感染、急性中毒、急性大出血等。返回上一页下一页第76页，课件共168页，创作于2023年2月一、核象变化

(2)退行性左移或变质性左移--核象左移，但白细胞总数不增加或降低者。表示骨髓释放功能受抑制。常见于严重感染，机体抵抗力低下时，加伤寒、败血症等。返回上一页下一页第77页，课件共168页，创作于2023年2月一、核象变化

核象左移根据其程度可分为：

（1）轻度核象左移：仅见于杆状核粒细胞增多，＞6％

(２)中度核象左移：杆状核粒细胞＞10％，伴少数晚幼粒、中幼粒细胞。

(３)重度核象左移（类白血病反应）：杆状核粒细胞＞25％，出现更幼稚的粒细胞并常伴有明显的中毒颗粒、空泡变性、核变性等质的改变。

返回上一页下一页第78页，课件共168页，创作于2023年2月一、核象变化

２．中性粒细胞核象右移核右移--外周血中中性分叶核粒细胞增多，同时分5叶核以上的细胞＞3％时（正常时多为3叶核）。这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现，核象右移常伴白细胞总数的减少。主要见于营养性巨幼细胞性贫血，恶性贫血和用抗代谢药物，炎症恢复期可出现一过性右移。在疾病进行期，突然出现右移，提示预后不良。返回上一页下一页第79页，课件共168页，创作于2023年2月二、毒性变化

在重症传染病、各种化脓性感染、恶性肿瘤、中毒、大面积烧伤、放射性治疗等病理情况下，中性粒细胞可发生毒性变化。具体表现为中毒颗粒、细胞大小不均、空泡、杜氏小体、核棘突。返回上一页下一页第80页，课件共168页，创作于2023年2月二、毒性变化1.细胞大小不等：指中性粒细胞体积大小悬殊的情况而言。常见于炎症。其发生机理可能是在内毒素的作用下，骨髓内幼稚中性粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。返回上一页下一页第81页，课件共168页，创作于2023年2月二、毒性变化

２.中毒颗粒瑞特染色后，中性粒细胞胞质内出现深紫蓝色或紫黑色的粗大而分布不均匀的颗粒．有时也较小或稀疏散在于中性颗粒中。常见于严重的化脓性感染及大面积烧伤等。返回上一页下一页第82页，课件共168页，创作于2023年2月二、毒性变化3.空泡细胞受损后胞质发生脂肪变性，染色后脂质溶解后的结果。可出现在核上或胞质中。

返回上一页下一页第83页，课件共168页，创作于2023年2月二、毒性变化

4.杜氏小体细胞严重毒性变时胞质中保留的局部嗜碱性区域。返回上一页下一页第84页，课件共168页，创作于2023年2月二、毒性变化

5.核变性包括核固缩、核溶解、核破碎等。核固缩指细胞核固缩为均匀而深紫色的块状；核溶解则可见细胞核膨胀，着色浅淡，伴核破碎的则核的轮廓不清。临床意义同空泡变性等。返回上一页下一页第85页，课件共168页，创作于2023年2月二、中性粒细胞毒性变化

6.核棘突中性粒细胞核有各种形态的芽状突起，称为核棘突。正常人白细胞如大量出现此种现象，则预示有严重中毒或感染存在，如转移癌、晚期结核病、严重放射线损伤等。返回上一页下一页第86页，课件共168页，创作于2023年2月

与代表性染色体的核鼓锤状突出物区别。

鼓锤状突出物为一直径约1.5μm的圆形物突出，并有细丝与核相连接，形同鼓锤。返回上一页下一页第87页，课件共168页，创作于2023年2月三、退行性变化

表现为胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰；核固缩、核肿胀和核溶解、染色质模糊、疏松。如胞质破裂后消失，只剩失去结构的肿胀的胞核，则成裸核或蓝状细胞。返回上一页下一页第88页，课件共168页，创作于2023年2月一、参考区间二、生理变化三、病理变化四、白细胞变化和疾病预后的关系返回上一页下一页第89页，课件共168页，创作于2023年2月课前复习1.作白细胞分类计数应注意哪些问题？答案：1.选择好分类的部位2.移动血涂片的顺序一定要有规律，3.分类时不能人为地抛弃个别细胞，4.发现幼稚白细胞应包括在%内，5.细胞形态异常也应加以说明。6.发现有核红细胞（幼红细胞）不计入白细胞%内，同时要对白细胞计数结果进行校正。返回上一页下一页第90页，课件共168页，创作于2023年2月课前复习2.瑞特染色后见部分分叶核粒细胞胞质中颗粒呈紫黑色，问此类细胞有可能是哪几种细胞！答案：（1）嗜碱粒细胞（2）中性粒细胞染色偏碱（3）嗜酸粒细胞颗粒染色偏碱返回上一页下一页第91页，课件共168页，创作于2023年2月一、参考值（参考区间）

白细胞计数：成人：4×109/L～10×109/L；

儿童：5×109/L～12×109/L

初生儿：15×109/L～20×109/L。返回上一页下一页第92页，课件共168页，创作于2023年2月白细胞分类计数的参考值

百分率（%）浓度数（×109/L）中性杆状核粒细胞1～50.04～0.5

中性分叶核粒细胞50～702～7

嗜酸性粒细胞0.5～50.05～0.5

嗜碱性粒细胞0～10～0.1

淋巴细胞20～400.8～4

单核细胞3～80.12～0.8返回上一页下一页第93页，课件共168页，创作于2023年2月绝对值的计算方法某种细胞绝对值＝白细胞总数×该种细胞%

例：某患者WBC为4×109/L；D.C中Nc为60%，求该患者中性粒细胞浓度数（绝对值）？解：绝对值＝4×109×60%

＝2.4×109/L返回上一页下一页第94页，课件共168页，创作于2023年2月二、生理变化

年龄日间变化运动、疼痛和情绪影响妊娠与分娩返回上一页下一页第95页，课件共168页，创作于2023年2月二、生理变化年龄因素形成中性粒细胞和淋巴细胞变化曲线的二次交叉。

返回上一页下一页第96页，课件共168页，创作于2023年2月二、生理变化日间变化

活动进食后较高下午高于上午运动、疼痛和情绪影响

当剧烈运动、剧痛和情绪激动时，可引起白细胞显著增加。妊娠与分娩

妊娠期白细胞常轻度增加。产后2周左右恢复正常、此后如再次升高，就有产后感染的可能。返回上一页下一页第97页，课件共168页，创作于2023年2月三、病理性变化（一）中性粒细胞与白细胞总数的增多与减少

1．中性粒细胞增多

2．中性粒细胞减少（二）嗜酸性粒细胞增多与减少（三）嗜碱性粒细胞增多（四）淋巴细胞增多与减少（五）单核细胞增多

返回上一页下一页第98页，课件共168页，创作于2023年2月三、病理性变化中性粒细胞病理增多急性感染急性中毒急性大出血严重的组织损伤白血病及恶性肿瘤

返回上一页下一页第99页，课件共168页，创作于2023年2月三、病理性变化中性粒细胞增多的病理变化

急性细菌性感染和化脓性炎症

金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌感染等、其白细胞总数的增高视感染范围，严重程度及机体反应性如何而有所不同。

常见疾病有肺炎、丹毒、猩红热、败血症、白喉、兰尾炎等。返回上一页下一页第100页，课件共168页，创作于2023年2月三、病理性变化中性粒细胞增多的病理变化急性中毒急性药物及农药中毒如安眠药、有机磷等中毒；代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒、尿毒症及汞、铅中毒等。返回上一页下一页第101页，课件共168页，创作于2023年2月三、病理性变化中性粒细胞增多的病理变化急性大出血内脏（肝、脾等）破裂或宫外孕破裂所致大出血、大量血细胞破坏、此时白细胞可迅速增高，达20×109／Ｌ，且出现于血红蛋白降低之前。返回上一页下一页第102页，课件共168页，创作于2023年2月三、病理性变化中性粒细胞增多的病理变化严重的组织损伤

如严重烧伤、较大手术后、心肌梗死等均可见白细胞增多，并可借此来区别心肌梗死与心绞痛。返回上一页下一页第103页，课件共168页，创作于2023年2月三、病理性变化中性粒细胞增多的病理变化

白血病及恶性肿瘤常见于急性、慢性粒细胞性白血病。

返回上一页下一页第104页，课件共168页，创作于2023年2月中性粒细胞减少的病理变化传染病理化损伤血液病脾功能亢进自身免疫性疾病返回上一页下一页第105页，课件共168页，创作于2023年2月中性粒细胞减少的病理变化

传染病某些革兰阴性杆菌如伤寒、副伤寒感染和某些病毒感染如流感。乙肝、麻疹等，无并发症时均可见白细胞减少。返回上一页下一页第106页，课件共168页，创作于2023年2月中性粒细胞减少的病理变化

某些理化损伤长期接触电离辐射如Ｘ线、镭照射等；或应用、接触某些化学药物、抗癌药物、有毒物质，如晚期或严重的苯、铅、砷、汞等中毒。

返回上一页下一页第107页，课件共168页，创作于2023年2月中性粒细胞减少的病理变化

某些血液病如再生障碍性贫血、非白血性白血病、粒细胞缺乏症，白细胞可＜1×10９／Ｌ。分类时呈淋巴细胞相对增多。返回上一页下一页第108页，课件共168页，创作于2023年2月中性粒细胞减少的病理变化

脾功能亢进肿大的脾脏中单核—巨噬细胞系统吞噬破坏过多的白细胞及分泌过多的脾素灭活了促进粒细胞生成的某些因子。返回上一页下一页第109页，课件共168页，创作于2023年2月中性粒细胞减少的病理变化

自身免疫性疾病：

如系统性红斑狼疮等因自身免疫性抗核抗体导致粒细胞破坏增多。返回上一页下一页第110页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞增多与减少1.嗜酸性粒细胞增多2.嗜酸性粒细胞减少返回上一页下一页第111页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞增多与减少１.嗜酸粒细胞增多过敏性疾病寄生虫病皮肤病传染病肿瘤血液病返回上一页下一页第112页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞增多与减少

２.嗜酸粒细胞减少由于嗜酸粒细胞在白细胞中所占百分率较低，故其减少意义不大，在长期应用肾上腺皮质激素时由于它抑制组胺合成可间接导致嗜酸粒细胞减少。急性传染病的早期亦常见减少。返回上一页下一页第113页，课件共168页，创作于2023年2月嗜碱粒细胞增多

１.慢性粒细胞性白血病：嗜碱粒细胞增多可达10％以上。

２.嗜碱粒细胞性白血病：此病罕见嗜碱粒细胞增多,多为稚型

３.其他：如淋巴网细胞瘤，脾切除术后和某些转移癌等可见嗜碱粒细胞增多。返回上一页下一页第114页，课件共168页，创作于2023年2月淋巴细胞增多与减少１.淋巴细胞增多２.淋巴细胞减少返回上一页下一页第115页，课件共168页，创作于2023年2月淋巴细胞增多与减少

１.淋巴细胞增多（＞40％）

（1）相对增多：即每升血液中淋巴细胞浓度数不增加，因中性粒细胞显著减少使淋巴细胞分类计数百分率相对增高。如再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等返回上一页下一页第116页，课件共168页，创作于2023年2月淋巴细胞增多与减少

１.淋巴细胞增多（＞40％）

（２）绝对增多是指淋巴细胞浓度数和分数数都增多，可见于：

①某些传染病②某些传染病的恢复期和肾移植术后发生排异反应时。③急、慢性淋巴细胞性白血病、白血病性淋巴肉瘤时淋巴细胞均增高。返回上一页下一页第117页，课件共168页，创作于2023年2月淋巴细胞增多与减少

２.淋巴细胞减少（＜20％）多见于传染病的急性期、长期接触放射线、细胞免疫缺陷病等。此外，各种引起中性粒细胞增多的原因均可导致淋巴细胞相对减少。返回上一页下一页第118页，课件共168页，创作于2023年2月单核细胞增多

１.某些感染如结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎及某些急性感染的恢复期。

２.某些寄生虫病如疟疾、黑热病等。

３.某些血液病单核细胞性白血病、恶性组织细胞病及骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）等单核细胞均可增高。返回上一页下一页第119页，课件共168页，创作于2023年2月四、白细胞变化和疾病预后的关系

预后良好征兆病情较重征兆病情险恶的征兆感染已被清除征兆

返回上一页下一页第120页，课件共168页，创作于2023年2月预后良好征兆白细胞总数正常或稍高中性粒细胞略有增高核象轻度左移表示感染程度较轻，机体抵抗力强，预后良好。

返回上一页下一页第121页，课件共168页，创作于2023年2月病情较重征兆中性粒细胞＞10×109/L

核象出现中度左移及毒性变化嗜酸性粒细胞消失表示病情较重返回上一页下一页第122页，课件共168页，创作于2023年2月病情险恶的征兆白细胞总数与中性粒细胞比值明显增高分别＞20×109/L及＞80%；感染严重时白细胞不增高反而降低；中性粒细胞有严重核象左移；嗜酸性粒细胞消失表示病情险恶的征兆。返回上一页下一页第123页，课件共168页，创作于2023年2月感染已被清除征兆

单核细胞逐渐增多；嗜酸性粒细胞重新出现或上升；中性粒细胞核象左移减轻；中性粒细胞毒性变化消失表示感染已被清除。返回上一页下一页第124页，课件共168页，创作于2023年2月总结返回上一页下一页第125页，课件共168页，创作于2023年2月目标形成检测

返回上一页下一页第126页，课件共168页，创作于2023年2月请您练习

某患者WBC为8×109/L；DC中Nc为80%，Lc为10%。求中性粒细胞和淋巴细胞浓度数？答案：

Nc＝6.4×109/LLc＝0.8×109/L返回上一页下一页第127页，课件共168页，创作于2023年2月病例讨论

患者、男、45岁、全身酸痛乏力咳嗽二天、体温37.8℃。血常规检验：白细胞12×109/L、中性粒细胞80%、中性粒细胞杆状核15%、嗜酸粒细胞0%、见中毒颗粒、其它未见异常问：有患上呼吸道感染的可能，病情是初期？病情比较严重？为什么？返回上一页下一页第128页，课件共168页，创作于2023年2月请您练习某患者WBC为6×109/L，D.CNc90%问该患者中性粒细胞是否正常？解：Nc＝6×109/L×90%

＝5.4×109/L答：检查结果正常返回上一页下一页第129页，课件共168页，创作于2023年2月请您练习出生后Nc和Lc变化曲线的两次交叉发生在什么时候？答案：笫一次交叉：出生后的第6～9日；第二次交叉：4岁～5岁。返回上一页下一页第130页，课件共168页，创作于2023年2月请您练习中性粒细胞有哪些病理变化？返回上一页下一页答案：（1）数量增加和减少（2）核象左移和右移（3）形态毒性变和退行性变第131页，课件共168页，创作于2023年2月重庆药剂学校临床检验教研室须建制作多媒体教学中心张晓辉返回上一页下一页第132页，课件共168页，创作于2023年2月学习目标1.解释嗜酸粒细胞直接计数的原理2.分析稀释液成分与计数结果的关系3.阐述嗜酸粒细胞直接计数的临床意义4.进行嗜酸粒细胞直接计数返回上一页下一页第133页，课件共168页，创作于2023年2月复习前课嗜酸粒细胞的参考值是多少？哪些情况会升高？返回上一页下一页答案：参考值：0.5%～5%；（0.05～0.5）×109/L增多：（1）过敏性疾病（2）寄生虫病（3）某些皮肤病（如湿疹）（4）某些传染病及传染病恢复期（5）某些恶性肿瘤和血液病（如Ec白血病）第134页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数

为什么要直接计数（目的意义）?返回上一页下一页测定每升血液中嗜酸粒细胞浓度数，虽然可从白细胞浓度数和嗜酸粒细胞%的乘积得知，但由于嗜酸粒细胞所占百分率低，加之在血片上细胞分布不十分均匀．误差很大，所以，在临床上需要准确了解嗜酸粒细胞的变化时，多采用直接计数法。第135页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数【原理】用嗜酸粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数破坏其红细胞和部分其他白细胞，将嗜酸粒细胞颗粒染色，充入计数池内，计数一定体积内嗜酸粒细胞，经换算得出每升血液中嗜酸粒细胞数。返回上一页下一页第136页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数【稀释液】１.乙醇-伊红稀释液

0.95Ｌ／Ｌ乙醇30.0ｍl

甘油10.0ｍl

碳酸钾1.0ｇ

柠檬酸钠

0.5ｇ

20g/Ｌ伊红10.0ml

蒸馏水加至100.0ｍl返回上一页下一页第137页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数试剂成分的作用1.乙醇为嗜酸粒细胞保护剂．其浓度以30％～35％较为合适。2.甘油可防止乙醇挥发。3.碳酸钾可促进红细胞和中性粒细胞等溶解并增加嗜酸粒细胞对染料的着色力。4.枸椽酸三钠可防止血液凝固。5.伊红可使嗜酸性颗粒染橘红色。返回上一页下一页第138页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数乙醇-伊红稀释液的特点优点：试剂稳定，视野清晰、无沉渣。在室温下可保持６个月。缺点：稀释液内含甘油，比较粘稠，细胞不易摇匀和下沉。返回上一页下一页第139页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数2.Hinkelman氏液伊红0.2g

95％苯酚0.5ml

40％甲醛0.5ml

蒸馏水加至100ml返回上一页下一页第140页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数【操作】１.取稀释液0.38ml于小试管内，吸血20µl，立即轻轻混合均匀待红细胞溶解。２．充分混匀充入双侧计数池内。静置2min～5min。３．低倍镜下计数10个大方格（两侧计数池的中央和四角的大方格）内嗜酸粒细胞数。返回上一页下一页第141页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数４.计算嗜酸粒细胞数／Ｌ＝10个大方格内嗜酸粒细胞数×20×106

注意：稀释倍数与计数域发生改变后应按实际操作换算成每升血液中的细胞数。返回上一页下一页第142页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数【注意事项】１.本试验应在30min内计数完毕。否则嗜酸粒细胞逐渐破坏，使结果偏低。２．血液加入稀释液中，要及时混匀，以免细胞聚集，但又不宜过分振摇,以免嗜酸粒细胞破碎。返回上一页下一页第143页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数【注意事项】３.住院患者作用酸粒细胞直接计数应固定时间，以免受日间生理变化的影响。４.注意与未破坏的中性粒细胞区别，中性粒细胞颗粒一般不受色或受色极浅，且其颗粒较小。５．若出现嗜酸粒细胞被破坏，可适当增加乙醇的剂量。

返回上一页下一页第144页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数临床意义

1.参考区间：

0.05×109／Ｌ～0.5×109／Ｌ（50／μl～500／μl）。返回上一页下一页第145页，课件共168页，创作于2023年2月嗜酸粒细胞直接计数２．临床应用（１）观察急性传染病的预后。（2）观察大手术和烧伤病人的预后。（３）肾上腺皮质功能和脑垂体前叶功能测定(减数试验)。

返回上一页下一页第146页，课件共168页，创作于2023年2月减数试验原理注射肾上腺素（间接刺激）垂体前叶释放促肾上腺皮质激素（ACTH）肾上腺皮质嗜酸粒细胞减少注射ACTH（直接刺激）返回上一页下一页第147页，课件共168页，创作于2023年2月减数试验结果判断

１．在正常情况下，注射ACTH

（促肾上腺皮质激素）或肾上腺素后，嗜酸粒细胞比注射前应减少50％以上。

２．肾上腺皮质功能正常，但垂体前叶功能不良时，注射ACTH直接刺激后，嗜酸粒细胞下降50％以上，而注射肾上腺素，间接刺激后则不下降。

３．垂体功能亢进时，注射ACTH和肾上腺素，都可使嗜酸粒细胞降低80％～100％。

４．垂体前叶功能正常，肾上腺皮质功能不良时，则注射ACTH和肾上腺素后，嗜酸粒细胞下降均不到50％。

返回上一页下一页第148页，课件共168页，创作于2023年2月减数试验结果判断——————————————————

注射促肾上腺皮质激素ACTH注射肾上腺素（Adrendin）（直接刺激）（间接刺激）—————————————————————————————1.正常下降＞50%下降＞50%2.垂体功能亢进下降80%～100%下降80%～100%3.垂体功能正常下降＜50%下降＜50%肾上腺皮质功能不良4.垂体功能不良下降＞50%不下降肾上腺皮质功能正常返回上一页下一页第149页，课件共168页，创作于2023年2月减数试验原理示意图返回上一页下一页第150页，课件共168页，创作于2023年2月总结

嗜酸粒细胞直接计数的目的是准确了解嗜酸粒细胞的变化，以观察急性传染病、烧伤和手术的预后，特别是了解肾上腺皮质功能和脑垂体前叶功能。返回上一页下一页第151页，课件共168页，创作于2023年