奈瑟菌属教学课件

1奈瑟菌属2熟悉奈瑟菌属的生物特点

了解奈瑟菌属的临床意义掌握脑膜炎奈瑟菌的鉴定方法依据

学习目标奈瑟菌属是一群专性需氧革兰阴性球菌，奈瑟菌属中对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，引起流行性脑脊髓膜炎和性病淋病。奈瑟菌属奈瑟菌电镜下形态一、生物学特性脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌1.形态与染色G－双球菌G－双球菌革兰染色美兰染色奈瑟菌属脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌2.培养特性营养要求高营养要求高，初次培养需供给5～10%CO2及湿润的环境才能生长。最适生长温度35～

37℃，<30℃/>40℃均不能生长 培养时间过长，本菌可产生自溶酶最适生长温度35～37℃。<30℃/>37℃均不能生长巧克力平板血平板卵黄双抗平板（EPV）血清肉汤MNYC平板T-M平板（国外常用）巧克力平板血平板卵黄双抗平板（EPV）血清肉汤奈瑟菌属巧克力平板上的脑膜炎奈瑟菌MNYC上的淋病奈瑟菌2.培养特性奈瑟菌菌落奈瑟菌属脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌3.生化反应（1）氧化酶和触酶试验++

氧化酶试验（平板法）触酶试验（试管法）奈瑟菌属脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌3.生化反应（2）糖分解试验①葡萄糖②麦芽糖③乳糖④蔗糖指示剂：酚红①

②

③

④

①

②

③

④

脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌葡萄糖+、麦芽糖+、蔗糖-、乳糖-，其他糖-，蛋白质-。葡萄糖+、麦芽糖-、蔗糖-、乳糖-，其他糖-。奈瑟菌属脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌4.抗原结构与分类根据荚膜多糖抗原分为13个血清群。较重要的是A、B、C、W-135和Y群。我国流行的菌株以A群为主。抗原：菌毛、外膜蛋白、LPS、H·8蛋白分解酶、主要铁调节蛋白等。分型：表型分类法、A/S分类法（自学为主）弱。对温度极为敏感，对青霉素敏感。5.抵抗力弱。对温度极为敏感，对各种消毒剂敏感。奈瑟菌属二、临床意义

1.致病性脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌致病物质内毒素、荚膜、菌毛菌毛、外膜蛋白、内毒素、IgA1蛋白酶传染源携带者、病人携带者、病人传播途径呼吸道传播性接触传播、产道流行季节冬春季节无明显季节性2.所致疾病流行性脑脊髓膜炎（流脑）淋病新生儿急性眼结膜炎奈瑟菌属单纯淋病（男）单纯淋病（女）

2.所致疾病新生儿淋球菌性结膜炎淋球菌性眼结膜炎（脓漏眼）奈瑟菌属

三、微生物学检验奈瑟菌属（1）标本采集根据临床症状和体征不同采集不同标本，如血液、瘀斑渗出液、脑脊液、鼻咽分泌物。1.脑膜炎奈瑟菌微生物学检验①用药前采集②无菌生理盐水冲洗采菌部位，禁用消毒药③采集分泌物时应避免碰到粘膜，以免正常菌群污染④床边接种，立即培养，培养基应预温，送检时注意保温注意事项奈瑟菌属

（2）直接涂片，染色镜检：脑脊液离心沉淀涂片，或刺破瘀斑血或组织液印片，革兰染色镜检，发现中性粒细胞内、外革兰阴性双球菌，呈肾形成双排列，可做出“查见革兰阴性球菌”的初步报告

（3）增菌培养：血液或脑脊液先在葡萄肉汤增菌，24h培养后每日观察增菌液变化。如无变化，培养至第7d。如发生混浊生长现象可转种巧克力平板进行分离培养奈瑟菌属

（4）分离培养：其他标本直接分离于血琼脂平板、巧克力平板或EPV平板，置5%～10%CO2环境中，经35℃～37℃培养18h～24h后观察菌落特征（5）鉴定：①推测性鉴定：主要根据选择性和非选择性培养基上菌落特征、结合涂片中的菌体形态，氧化酶+、触酶+

奈瑟菌属脑膜炎奈瑟菌A群单价血清凝集试验左侧为阳性反应，右侧生理盐水对照②确定性鉴定：通过糖发酵试验和菌群凝集试验，再参考普通琼脂上不生长，血琼脂平板放置22℃不生长等特点作出确定性鉴定。奈瑟菌属青霉素S、利福平S、磺胺R青利磺（6）药敏试验结果报告☞应重视脑脊液和瘀点穿刺物的直接涂片染色镜检，这是最快速确证脑膜炎奈瑟菌感染的简便方法。奈瑟菌属三、微生物学检验奈瑟菌属（1）标本采集：采集脓性分泌物、尿道拭子、宫颈口分泌物、结膜分泌物、血液2.淋病奈瑟菌微生物学检验①用药前采集②无菌生理盐水冲洗采菌部位，禁用消毒药③采集分泌物时应避免碰到粘膜，以免正常菌群污染④床边接种，立即培养，培养基应预温，送检时注意保温注意事项奈瑟菌属

（2）直接涂片，染色镜检：将脓性分泌物直接涂片、革兰染色镜检，如在中性粒细胞内发现革兰阴性双球菌时，结合临床症状可以做出初步诊断

（3）分离培养：标本应及时接种在预温的巧克力平板或Thayer-Martin（T-M）培养基，置于5%～10%CO2环境中，经35℃培养36～48h后，取小而透明似水滴状、无色素易乳化菌落进一步鉴定奈瑟菌属

（4）分离培养：其他标本直接分离于血琼脂平板、巧克力平板或EPV平板，置5%～10%CO2环境中，经35℃～37℃培养18h～24h后观察菌落特征（5）鉴定①推测性鉴定：分离平板上的菌落特征、结合涂片中的G-菌双球菌，氧化酶+奈瑟菌属②确定性鉴定：糖发酵试验并参考生长试验结果（营养琼脂37℃，血琼脂22℃均不生长）；直接荧光抗体染色阳性或下列任何一项免疫学试验阳性淋球菌荧光抗体染色阳性免疫学试验

①SPA协同凝集试验：直接用商品试剂盒②ELISA：检测淋病奈瑟菌抗原，4h即可获得结果奈瑟菌属（6）药敏试验大观霉素S，青霉素R结果报告

☞免疫学等非培养方法只能作为初步诊断方法，最后确证还是需要培养和分离出淋病奈瑟菌，并进行生化等确认鉴定。奈瑟菌属

奈瑟菌属鉴别要点：主要依据细菌染色形态、氧化酶试验和触酶试验，和对各种糖的生化反应进行鉴别。