生物化学实验-北京师范大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年

生物化学实验_北京师范大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年纯化蛋白时不一定是越多的纯化步骤效果就越好。

参考答案:

正确

如果有一个蛋白A，其分子量为40KD。它在NativePAGE上产生两条条带，下面哪种说法有可能具有合理性

参考答案:

两条条带分别为单体和某个降解产物_两条条带分别为单体和二聚体_两条条带分别为二聚体和四聚体_两条条带分别为单体和四聚体

在超声破碎时，可以连续超声5分钟，这样可以快速完成细胞破碎。

参考答案:

错误

设计纯化实验时，尽量不要利用相似原理的纯化步骤进行多步纯化。

参考答案:

正确

如果蛋白可以利用亲和层析分离纯化，那么通常会首先考虑亲和层析。

参考答案:

正确

纯化流出曲线上，上样过程中出现的流出峰又称为

参考答案:

穿过峰

蛋白哪种性质可以用来设计层析实验对其进行纯化

参考答案:

分子大小_与特定抗体结合_等电点

蛋白的哪种特性可以用来粗纯化

参考答案:

等电点_热稳定性

在pH7.0的缓冲条件下，下面哪种等电点的蛋白可以用阴离子交换树脂分离纯化

参考答案:

4.0_5.0

下面哪种方法是常用浓缩蛋白的方法

参考答案:

蒸发浓缩_超滤_盐析_真空冷冻干燥

离子交换层析介质常常按如下方式进行保存

参考答案:

20%乙醇中4℃保存

小规模纯化过程中上样量是Amg。如果计划在大规模纯化过程中上样量扩大n倍，那么，层析柱的内径、高度以及层析流速该做如何调整？

参考答案:

高度不变_内径扩大n倍_流速扩大n倍

纯化过程中，收集流出样品的方式有哪些种？

参考答案:

按固定体积进行收集_按流出峰斜率变化进行收集_按流出峰紫外吸收值变化进行收集_按流出峰参数变化进行收集

待纯化样品无需过滤，离心后可以直接上样。

参考答案:

错误

一般来说，离子交换层析适合粗纯化阶段，适合大体积上样。

参考答案:

正确

在蛋白质纯化过程中，速度越快，分辨率越高。

参考答案:

错误

离子交换层析结束后，可以用0.5mol/L的NaOH进行层析介质再生。

参考答案:

正确

利用免疫小鼠获得血清，从而制备多克隆抗体，优点是

参考答案:

抗原用量少_腹水经简单处理就可用于蛋白质免疫印迹实验、ELISA等用途

特异性免疫应答过程有三个阶段，分别

参考答案:

效应阶段_识别阶段_激活阶段

抗原可以是如下什么分子

参考答案:

糖_大分子蛋白质_多肽_病毒

下列关于酶活力测定的描述中，错误的是

参考答案:

酶活力测定的最适温度通常是37摄氏度_1个酶活力国际单位是指在最适反应条件下，1分钟内能催化1mol底物转化为产物所需的酶量

抗体的两个最大的特点是

参考答案:

特异性_多样性

以下步骤中，连续法测活的正确顺序为何？①利用分光光度计连续测定吸光度的变化②将适量酶加入底物溶液中，快速混合③利用吸光度变化的动力学曲线计算酶活力④将酶与底物的混合液迅速转移入比色杯中，放入分光光度计

参考答案:

②④①③

乳酸脱氢酶催化的反应中，通过测定，得知在最适反应条件下，在0.1ml酶样品的作用下，每10分钟有0.3摩尔的丙酮酸分子被还原为乳酸，则1ml酶样品所含的酶活力国际单位（IU）数为

参考答案:

300，000

下面哪种层析方法不会稀释产物

参考答案:

离子交换层析_疏水层析_亲和层析

测活时，需要测定酶促反应的初速率，其目的是

参考答案:

准确反映酶的真实催化能力

下面哪种层析技术中蛋白是先被吸附到了介质上

参考答案:

亲和层析_疏水层析_离子交换层析

细胞破碎的正确方法包括

参考答案:

高压挤压_超声破碎

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白的迁移率与其分子量成线性关系。

参考答案:

错误

蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳必须使用SDS，如果没有SDS处理电泳结果毫无意义。

参考答案:

错误

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳不具有下列哪些作用

参考答案:

疏水效应

对不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳说法不正确的是

参考答案:

蛋白先进入分离胶再进入浓缩胶

抗体的生物学功能包括

参考答案:

特异结合相应抗原，介导多种生理和病理效应_激活补体系统_免疫调节，有正、负两方面_通过其Fc段与多种细胞表面的Fc受体结合，激发不同效应功能

抗原决定簇是指

参考答案:

肽片段_氨基酸_单糖残基_寡糖片段

再次抗原刺激与初次抗原刺激引起的免疫反应强度差不多。

参考答案:

错误

酶的反竞争性抑制剂具有下列哪种动力学效应

参考答案:

使Vmax'减小，Km'减小

以下测活方法中，最常用的是

参考答案:

分光光度法

抗原越纯，获得抗体的特异性越高。

参考答案:

正确

Westernblot实验不需要的步骤是哪个

参考答案:

脱色

分离纯化碱性磷酸酶等生物分子时，常用一套完整的由层析柱、梯度混合器、恒流泵、核酸蛋白检测仪与记录仪、自动部份收集器串联组成的蛋白纯化系统，实现生物分子分离纯化过程的半自动化及其时时监控。

参考答案:

正确

核酸蛋白检测仪又称紫外检测仪，是生物化学实验或液相色谱实验中常用的一种紫外检测仪，常用于检测蛋白核酸的分离纯化。

参考答案:

正确

使用酸度计pH时，由于pH电极泡一般是玻璃的，容易破裂，酸度计pH电极不要触碰到磁子，也不要触碰到容器如烧杯底部。

参考答案:

正确

将凝胶、NC膜、滤纸浸泡印迹缓冲液的作用不是

参考答案:

封闭NC膜上的吸附位点

Westernblot实验不需要

参考答案:

BamHI

关于溶液的配制，下列说法正确的是

参考答案:

配制溶液时，一般先调pH，然后定容。_称取微量药品时，一般用分析天平称量。_配制测活液母液时，pNPP在溶液中易分解，需要现用现加。

培养基灭菌的常用方法是

参考答案:

高压蒸汽灭菌

下面哪种试剂不是ELISA所必要

参考答案:

碱性磷酸酶

酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测抗体效价常用方法的种类有哪些

参考答案:

直接法_竞争法_间接法_双抗体夹心法

ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应，与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。

参考答案:

正确

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白样品的迁移率与下列哪个因素有关

参考答案:

分子大小

如果蛋白无法可溶表达，有时候可以加上一个标签使它以融合蛋白的形式表达可以得到可溶的表达产物。

参考答案:

正确

ELISA测定的对象可以是抗体也可以是抗原

参考答案:

正确

直接法是先将待测抗原吸附在固相载体上，这个过程称为包被。然后加入酶标抗体，最后加入底物显色。多用此法检测抗原。

参考答案:

正确

Westernblot转膜过程中，NC膜朝正极，胶朝负极，即将胶上的蛋白质印迹到NC膜上

参考答案:

正确

制作酒精棉球常用的酒精浓度为

参考答案:

75%

使用超净工作台进行无菌操作实验前，至少开启紫外灯照射杀菌

参考答案:

30min

Westernblot实验中常用硝酸纤维素膜（NC膜）、尼龙膜（ZB膜）及PVDF膜作为转膜的载体材料。

参考答案:

正确

在T7表达系统中，T7RNA聚合物本身的表达无需诱导。

参考答案:

错误

使用T7表达系统的原因是因为T7RNA聚合酶保真性好。

参考答案:

错误

使用IPTG诱导外源基因表达时，应该预先筛选IPTG浓度。

参考答案:

正确

从肝脏中直接提取的蛋白其来源属于天然来源。

参考答案:

正确

在用终止法测定酶活力时，以下哪些物质可用于配制终止液

参考答案:

酶抑制剂_蛋白变性剂_金属离子螯合剂

在利用酶促反应动力学方法研究抑制剂的作用机制时，所做出的双倒数图中，一组在横轴上交于一点的直线对应

参考答案:

非竞争性抑制剂

培养过夜的菌液扩大培养后，等OD600到达如下什么值时比较适合诱导

参考答案:

1.0_0.8

LB培养基成分包括什么

参考答案:

胰蛋白胨_NaCl_酵母提取物

已知反竞争性抑制剂的浓度[I]=2Ki，底物浓度[S]=5Km，则根据米氏方程计算出的反应速率v等于

参考答案:

5Vmax/16

如果蛋白在37°C下无法可溶表达，可以从采取如下步骤

参考答案:

低温表达_溶解包涵体

T7表达体系里面包括什么

参考答案:

T7启动子_lac启动子_T7RNA聚合酶

外源蛋白可以通过下列哪种途径表达

参考答案:

大肠杆菌_哺乳动物细胞_昆虫细胞_啤酒酵母

凝胶层析柱中有肉眼可见的小气泡，对分离效果影响不大。

参考答案:

错误

实际工作中，我们经常使用操作压来装柱和平衡。操作压是指层析柱内液面与出水口的高度差，或者是贮液器内液面与出水口的高度差。

参考答案:

正确

对于某一型号的凝胶，在一定的分子量范围内，各个组分的Kav与其分子量的对数成非线性关系。

参考答案:

错误

凝胶层析中，比凝胶孔径大的分子最先被洗脱出来。

参考答案:

正确

影响凝胶层析柱选择性的因素有

参考答案:

待分离样品的形状_柱长_层析介质

在实际工作中，我们通常使用Kav，也就是有效分配系数来代替Kd。计算Kav的话，需要测定出哪些参数

参考答案:

洗脱体积Ve_柱体积Vt_外水体积Vo

聚丙烯酰胺凝胶电泳过硫酸铵APS的作用是

参考答案:

催化剂

聚丙烯酰胺凝胶电泳四甲基乙二胺TEMED的作用是

参考答案:

加速剂

一个100KD的蛋白适合有T值为哪个的聚丙烯酰胺凝胶来分离。

参考答案:

5%

SDS处理后蛋白在胶上的迁移率主要受何种因素影响。

参考答案:

分子量

凝胶层析中某一溶质在凝胶内部和外部的分配系数，也就是Kd值，与下面哪个因素有关

参考答案:

凝胶颗粒孔隙的大小分布_被分离物质分子的大小

本次凝胶层析中使用的介质是SephacrylS-200HR，其分离范围是

参考答案:

5-250KDa

凝胶层析能够分离各组分的原理是

参考答案:

待分离组分的分子大小不同

下列对凝胶层析的称呼，错误的是

参考答案:

疏水层析

下面哪一物质是蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳所不需要的。

参考答案:

醋酸

通过NativePAGE我们可以判定蛋白为几聚体。

参考答案:

错误

能够与酶、底物形成三元复合物的抑制剂是

参考答案:

反竞争性抑制剂_别构抑制剂_非竞争性抑制剂

以下描述中，属于pH值的变化影响酶活力因素的是

参考答案:

pH的改变影响酶活性部位的构象_pH的改变影响与酶催化功能相关的基团的解离状态_pH过高或过低，可导致酶的变性

研究抑制剂对酶活力影响作用的实验中，正确的做法是

参考答案:

严格控制反应条件（温度、pH值等）_利用双倒数作图法判断可逆抑制剂的类型_重复实验，降低偶然误差

竞争性抑制剂的结构与底物具有相似性。

参考答案:

正确

非竞争性抑制剂可导致酶的永久性失活。

参考答案:

错误

增加测活时间可导致测定出的酶最适温度降低。

参考答案:

正确

在利用分光光度法测定酶活力时，吸光度的值总是由小变大。

参考答案:

错误

在测定