基因工程的基本操作工具

☆选修3现代生物科技专题我国是世界上最大的棉花生产国和消费国，棉花种植面积约占世界的15％。据统计，1992年至1996年，因防治棉铃虫等虫害造成农药中毒的有24万余人。其中仅1992年棉农中毒人数就高达7万多人，直接经济损失达100多亿元。于是我国的棉农一气之下改种了抗虫棉。能杀死棉铃虫的基因来自一种叫做“苏云金芽孢杆菌”的细菌。这种细菌产生的蛋白质叫做晶体蛋白，蛋白本身没有毒性，但由于棉铃虫的胃呈碱性，一旦棉铃虫吃了它，就会在胃中分成两个蛋白，其中一个与胃肠膜特定结合在一起形成穿孔，把棉铃虫毒死。而人和动物的胃则呈酸性，吃后分解成氨基酸，变成了营养物质。一、基因工程诞生的理论基础1．基因拼接(1)DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。(2)双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构。碱基互补配对原则2．外卧源厘基稀因帜在跟受同体灯内属表设达(纸1局)基袄因恭是膜控境制视生坑物芒性充状床的冻独昨立送遗挨传狗单貌位谨。(易2蜓)遗减传缝信钢息龙的掘传烂递拒都高遵征循奔中遗心涝法灶则冠阐陷述齿的蝇信滥息盘流视动裙方束向扩。(驻3校)生踩物稿界熄共逃用映一苹套侮遗部传炎密毛码幻玉。分挤子便手剖术缎刀-双-细-鼓-触-粥-限旅制剖性岁核摘酸毛内挤切斗酶(限方制均酶)A宗.来罢源:主形要献从原和核点生批物中偷分版离某纯湿化B区.作渠用:识宗别擦双副链D话N篮A分稻子批的遭某距种特酿定肠核乘苷严酸质序斯列,并级且扒使燥每少一嫩条恼链缺中特恳定还部察位的按两抛个赠核公苷扔酸祖之否间态的磷唱酸黎二稠酯准键断汁开.二英、必基匠因班工得程踢的竖操妹作仿工章具D锣.切暖割缝后膊产偷生攻的D珍N蒙A片归段僵末揉端割的榴形店式C阶.识间别唉序坝列虫的返组牌成:大诊多涨数绢由拣六蒸个核齐苷循酸陆组昌成限制制灯酶介所些识挖别夺的施序认列岩有凯什崖么杜特的点限货制龟酶善所拆识糠别胀的蜻序傲列栏，破无芒论仓是6个曾碱谢基租还逗是4个包碱腥基追，点都贱可螺以肉找见到尤一祸条中扛心要轴赛线，球中图轴咏线舱两持侧熔的拍双凑链D多N舍A上粉的叫碱穿基客是反挖向棵对岩称绞重法复赞排饼列的摧。分定组劈燕讨唱论患：限使制暴酶苹切艘割淹后柿有颈两灭种迷不拒同迁的够结带果济，赌一彩种壮产骆生客黏新性锄末唱端订，忙一兼种文产泼生魄平桐末哈端咳。钱那斑么碗恢遣复晌它盆们返的展连急接增时脊，蚁也拥有睡两协种罚酶月。黏滨性狗末价端平阔末遗端2．D践N贞A连浆接召酶(朝1摄)常浪用窗的D寒N革A连谷接症酶(匙2冷)伙D物N纺A连盾接菊酶票与D杏N张A聚贤合碍酶映的轨比祥较DNA连接酶DNA聚合酶作用实质都是催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键是否需模板不需要需要连接DNA链双链单链DNA连接酶DNA聚合酶作用过程在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键将单个脱氧核苷酸加到已存在的核酸片段的3′端的羟基上，形成磷酸二酯键作用结果将存在的DNA片段连接成重组DNA分子合成新的DNA分子3狼.基似因枪进浓入耗受偷体世细哨胞昼的绑载顽体载愉体读必收须庄具和备堂的划条晌件如撒果构载匆体济对袭受叮体聪细势胞雪有嘉害摆将犁怎山样悠？目霞的触基取因闪是资否冤进息入宅受应体炎细队胞池，姐没查有准标亦记爽基搏因呜我溪们茄能桌否其鉴算定别？假兔如素目卷的缓基桑因硬导卵入诱受毕体仅细岔胞跃后汤不毒能鹅复唤制战将鲁怎咱样原？作槽为蝴载算体间没炸有也切家割备位矮点堂将畏怎胡样脾？作使为熔载重体效的蓄必翅要默条燃件1、圾能馅够冬在膜宿汤主微细苹胞氧中穴复将制范并候稳耀定掉地什保心存裕；2、女具追有保多厅个避限钉制均酶丑切墙点润，妄以显便蹈与尸外膛源形基处因景连脾接赏；3、室具辫有箱某但些晚标挖记况基怎因智，字便号于叫进成行领筛摄选冻。歇（济如趟抗待菌衔素若的吧抗证性辆基崖因偏、钞产奸物抖具恢有际颜狐色冬反阅应筑的察基事因混等倦）4、北对卵受森体惜细数胞庙无雪害三侍、寒基絮因蛮工想程专操亚作设的颂基拜本滑程券序1．目脚的揪基纤因平的嗓获睬取角途博径(融1飘)直武接悟分偷离影：扩从纲自慈然缺界倚已杀有碗的幸物掀种臂中秧分苍离沃，寄如绒从惠基帮因辨文纪库维中缠获辟取磁。(折2周)人治工汇合撒成滔目毛的她基犬因常菠用蚊的邮方丑法抱有枕：①吊已严知妥核辨苷幅酸惰序炭列涛的款较默小虑基组因晃，遇直位接喉利随用D维N绳A合秋成替仪白用僚化音学肺方蒜法闻合请成猫，惕不穷需籍要胁模宜板屈。②礼以R豆N晒A为尺模述板刑，悉在押逆患转戏录糕酶坟作栋用研下务人击工菠合目成棉。(渠3辣)剂P评C爪R技校术更与D阅N樱A复改制买的豆比挎较PCR技术DNA复制相同点原理DNA双链复制(碱基互补配对)原料四种游离的脱氧核苷酸条件模板、ATP、酶等PCR技术DNA复制不同点解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化场所体外复制主要在细胞核内酶热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)细胞内含有的DNA聚合酶结果在短时间内形成大量的DNA片段形成整个DNA分子2挠.基轨因亲表尤达传载努体烧的仔构匆建(迫1握)基咐因葱表色达申载夸体同的赖组坝成察：纲启僚动仔子靠、球目肉的绳基医因凤、疾终兄止据子轰以趟及肿标剪记魄基暖因耽等压。(逼2略)基升因态表贫达再载修体排的展构详建蚀方葛法导疯入听的售目永的商基店因脸的落表暖达哀需肉要刑调歌控萝序种列厉，乓因震此宣在过插阳入愤目友的德基赤因狂的杆部抵位薪之浴前珍需朽有草启优动颤子洪，便之储后匆需搅有准终叹止污子附。3．将捞目款的激基吩因吧导蚊入瞒受尤体俩细担胞生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射技术Ca2＋处理法受体细胞体细胞受精卵原核细胞转化过程将目的基因插入到Ti质粒的T－DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA→表达将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子4萌.目轨的沈基策因屈的钟检牛测柔与笋鉴冬定(帜1狗)分愤子怪水蝇平导检晒测①朝导双入塔检宝测飞：D浑N苍A分梦子乳杂猎交僻技止术叙，旦即圈使只用径放惊射积性沃同光位将素吊标叉记使的疯含独目炉的肃基震因幻玉的D责N瓜A片久段魂作靠探倒针迫检尸测刷。(返2磁)个麦体昼生共物裂学混水刮平星鉴究定指：交对锋转否基容因长生鄙物粮进椒行狠抗波虫旨或躁抗遣病炎的排接悟种愈实坦验必。(物2乘0屠1耗0年彩北夕京煮海规淀括区茅抽沈查)下姜图辞是裳含榴某疫目活的衬基亩因鼓的D耻N优A片衰段承，雄据垒图波回佳答暮下袄列辫问愿题妥。(须1龟)根币据括图兔示防可戚知淹，抢若疼用E跃c付o功R牺Ⅰ和S乏m醉a则Ⅰ限扑制猫酶散切或割保，茅则国此D饶N舅A片敢段榴可西有_犬_践_锹_扇_个溪限器制虾酶岁切贫割艘位馋点之，洞切航割顽后剥共伏有_换_口_泊_种_篮_浑_塔_个煎切嗽割猎末舅端歪。(室2恩)估E减c伸o炉R棚Ⅰ限萌制嚼酶赠切刮割苹后雕形态成睡的妄末豆端搅是味末季端兄，挠在偷图截中唐用论笔哄标罚出娱切方割枕部晕位望。(秀3拆)如伟果绣要甜将型用E仰c的o舌R蕉Ⅰ限技制聪酶波切代割叶形读成战的浙目否的盼基匪因狐片沾段喷导趣入汉受胀体欢细沸胞高，免一伤般辛需益要_智_鱼_乌_谅_作闸载胞体火。然其剧应声具移备触的组特旗点丽有迫：_猪_乐_聚_剖_、_架_户_、_棒_暗_。(录4蛛)引E蛾·伍c艘o顽l路i宿D流N取A连杠接旧酶群连项接骄目踪蝶的膀基规因话和赛载咽体坑时什连济接誉的扩是凶图饺中_顷_送_莫_片(填见字粥母)部奸位头的言化蛮学混键外。【答灯案】(贤1谅)芒326帜(不覆计尝算捧原耀有增的)(联2裕)黏骡性(西3网)质析粒晴至该少鼠有坏一勤个忽切自割您位级点岁能戒自陶我还复姥制光含贷标尖记侮基处因(虫4查)摘X(描2歪0斑0愿9年橡江往苏乖高鞭考治题)苏示云酸金附杆贩菌(半B艺t取)能棉产仗生买具重有集杀损虫有能饰力恰的蔬毒惭素少蛋东白丈。绵下放图逃是会转B旷t毒纺素企蛋纳白驾基损因张植夕物无的全培驻育勇过抬程荡示堂意捞图(浸a岔m都pr为略抗朱氨班苄衫青据霉恶素跪基赤因)，远据截图索回膀答或下穗列侍问醋题唱。(洲1猴)将退图什中侨①德的D纺N伍A用H杏i把n轮dⅢ、B蕉a鼻m您HⅠ完膜全那酶芬切耀后嚷，堪反达应照管没中仇有_门_克_爷_皆_竹_盐_翼_种D乏N畜A片宫段鞠。(具2绪)图侦中饱②轻表讨示H知i泊n些dⅢ与B塌a丙m风HⅠ酶材切觉、D吊N侨A连贸接述酶际连虫接巷的剃过况程按，捆此鞋过浇程锦可涛获涝得_课_锯_会_剂_失_仔_需_种爸重培组衡质湖粒雄；丝式如穿果怨换棕用B绕s东tⅠ与B达a饥m天HⅠ酶婚切牌，余目腾的左基款因费与项质寇粒闻连言接追后启可第获践得_柔_尸_酒_胖_委_既_档_种嗓重朗组辜质贝粒态。(吴3造)目筹的撞基崖因就插驶入拿质欲粒们后肿，黄不饲能拿影欺响凝质纱粒乖的_督_练_辱_银_妈_稠_蜂_。(柳4庄)图熔中践③伯的T昆i质宰粒枕调蚂控暮合搏成也的v器i通r蛋蒙白没，羽可芒以锈协肿助夺带老有震目科的经基元因骡的T－D粥N痰A导冤入写植屈物浓细篇胞优，减并父防霸止爸植的物积细详胞蒸中_脉_承_对T－D盾N伟A的占降璃解项。(伪5睛)已束知偶转旧基蛋因传植厦物弃中刑毒烟素挣蛋栏白扩只侵结呜合或某迹些顿昆牧虫度肠还上偷皮钉细获胞排表络面初的胶特汤异蠢受捏体塔，凡使沾细姿胞泰膜畅穿湿孔理，勺肠站细析胞匆裂挡解紫，究昆澡虫宴死息亡脏。别而闯该虎毒区素匠蛋渠白糕对至人店类阴的蓬风优险乐相扛对目较绣小荐，符原燃因教是懒人掉类蔽肠固上暗皮滚细舰胞_滋_罩_坡_湖_森_隆_振_。(捕6忧)生骂产极上尤常鼓将宏上离述平转哑基灯因菊作汤物擦与绘非烤转针基厉因话作民物已混剪合询播蜻种刚，凝其闻目返的竿是盛降铁低终害趟虫蓝种冶群剩中辉的_拜_勇_传_基户因缎频章率否的塔增怒长才速呜率斗。【解提析】本孟题赛重福点歇考速查躁转甘基选因诉技肝术标的甘相晃关网知否识愉，插需例特骂别骑注崖意榴基剧因惑工丝式程住的串步爷骤越、D惑N智A的苦复略制恢、船基扒因嚼工葡程截的乞操朋作逼工劈燕具牧等渗知邪识报。篮本润题厦需滨特肉别笛注专意坡图佛示扑过楼程喷，帜从撇中睛获纤取雕有序效爸信净息面，柔然挡后卵结事合谦课拖本败知奴识寇即肃可书正东确倘解制答枝。【答畅案】(夕1争)毯4(教2利)屿21(反3坑)复介制(养4皇)旗D膏N遭A水临解骡酶(酷5笔)表内面睬无室相辛应的的辛特扁异麦性硬受肥体(己6妙)抗活性1．(棉2扭0广0躺9年撒浙括江扑高意考矛题)下牛列流关驱于法基恢因肤工赞程违的首叙运述菊，蠢错劣误提的杏是()A．哄目疾的特基竞因宫和价受授体裤细耐胞益均事可户来探自析动毕、演植庄物辽或妥微扣生孤物B．晃限秆制特性鼓核卷酸册内遍切然酶苍和D举N馆A连侮接潜酶卷是葵两谁类咽常破用校的递工证具颠酶C．忙人忧胰敲岛短素歉原扬基粒因姿在娇大陷肠日杆票菌册中黄表慕达床的螺胰临岛叨素妈原铲无央生健物粉活予性D．疾载吓体血上资的禁抗励性辨基首因复有荷利祸于双筛除选妙含傻重扫组D妈N筛A的密细牵胞骨和匪促蒙进得目咸的滤基席因蛋的盛表浩达【解惧析】基森因柳工货程毙中伴目唱的请基盐因混来勾源阻于琴自督然焦界烈中抓的闷含边有燥目曾的求性循状钳的羞一欺切构生杂物德，渠可钻以适是联动我物裳、伯植屑物雷，云也你可队以驰是嫂真登菌袭、低细印菌政，性还果可骄以攀是主人夜等衰；室在稿基缓因猎工傍程锹中举获爽取猾目划的骄基首因狠以撤及绕将磁目转的佣基魂因馒和颂载肤体颠结辟合肺构捷成意基随因乘表污达秩载饰体乳必倒须采使灵用循同至一约种松限疫制逃酶扎进崭行师切麻割桐，适以摄获绍得走相痕同串的厚黏川性伍末赢端嫩，轰再轨在D侧N疮A连粥接梅酶霸的煌作难用猪下货，饺将触目俩的扁基秤因锹和顶载牵体放连津接尾，挡构久成务基述因亡表魂达调载役体致；人治的夸胰主岛逼素溜原腐基骄因双可喉以棕在前大越肠灾杆怜菌写体堵内众得候以乔表愉达物，傲但刻是孟由自于魔大仓肠苏杆补菌基是厅原秃核哪生子物昨，红没杆有早内筒质嗽网荣、时高瓶尔治基幸体喷等盛细半胞递器恐的希加微工烂，纱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