刘中成重组体的筛选与鉴定

重组体克隆的筛选和鉴定转化子和重组子转化子：将导入外源DNA分子后能稳定存在的受体细胞称为转化子重组子：含有重组DNA分子的转化子成为重组子。如果重组子中含有外源目的基因则又称为阳性克隆子或期望克隆子在转化反应中，并非所有的细胞都转入重组DNA分子，即使所有的受体细胞都变为转化体，所获得的转化子仍是多种类型的DNA分子，因为在连接产物中既有裁体和一个或数个串联目的基因的连接，也有载体的自连，还有目的DNA分子的自连，更多的是未发生连接反应的载体和目的DNA片段。因协此裤在锄成吩千暑上丈万洁个阻转印化予子遵中琴，补真懒正延含珍有英期尘望钞的股重蛛组结D冲N棵A墓分砖子佛的充比走例阁很扯少跪，落为氧了针将槽含纹有遍外丝式源膜D恢N悲A资的哀宿越主罩细奴胞难和朗不始含问外贩源纪D断N孔A起宿调主云细昏胞杯分粘开齿，仔以埋及疏将斥含戴有授正猎确戒重共组钩子艺的贺宿絮主个细榨胞害和飞含磨有些其哥他哀外棉源卖D絮N陵A仁的孩宿捷主判细沉胞标分森开讲。守这虚就术需谁要难设数计姓出撕容柳易陈于营筛刺选烦重腿组匀子涉克久隆口的沸方缴案竹并湿加妨以杜验蠢证。阳贯性络克午隆姿的纯筛谜选拨与趋鉴宵定句可坝以妥从雄不禾同矩的器层卷次踏、同利导用侮不仁同费的败方坟法残进滨行牺。辆总弃的枝来蓝说韵，撒重咐组焰子滥的惊鉴庙定凤可沫以盏从直僵接循和克间茧接两凤个段方心面役分杆析除，小可贷以带从D属N好A及、塑R宁N织A杨和批蛋唱白杀质三艰个上不戚同本的胞水术平巾进沃行害鉴坏定扒。一陈、别抗姜药膊性冠标么记线及娱其姐插洽入吐失买活处选槽择厦法p水B达R序3阀2运2质陶粒照上策有冒两壁个妻抗醋菌饶素倘抗哀性钻基债因:T静e典tr和A貌m萌pr。T授e肌tr上蹈有宿插熔入宏位宅点B亮a盗m熊H悄I和S怕a音l洪I辰;A优m肥pr上蜜有饶插萍入碌位枝点P尤s酸t毙I。第惩一束节载迁体擦表降型涛选涉择字法1曲.原辆理起：p渣B赴R俘3踩2缺2（1）增四只环奖素结：（2）话氨尽苄猴青燥霉限素庙抗俗性扩基改因芽：2你.丹p耍B篮R轧3制2扩2抗钉菌索素伯标押记忍选吸择含内b吊l芳a墓基倘因身的捧菌颠体红产封生-内盏酰在胺遗酶恋，拌使莫氨轰苄宁青累霉珍素吐转吐变院为拌青获霉忘酮吵酸盼，自使透碘-青科霉污素杯指红示差液帐（I2-蜻K请I套-勒A染a蠢m捕p纪i僚c壳i货l幕l裤i松n）巴（缎蓝按灰亿色帮）褪旋色。抑翁制卷细件菌棕生钞长免，弊但只不据杀另死谨细忌菌做。杀嫩死舍生御长望的裂细肉菌鸭，烟但点不感杀杜死希停泻止抖生椅长甩的竹细互菌拣。（3）宇环那丝叮氨滴酸灾：3伸.选呀择到过押程符：如己果锣在T外e愁tr上臭插捡入死外天源D罩N套A，邪导珠致膨四厌环层素敢抗痕性围基腿因膜失扔活肉，咏可牙用四讲环持素捎加反环坛丝想氨慢酸平轻板套培宗养素基生选初择泥重肆组哭克鸽隆杜。T俩e蜘tr失丸活的怒菌些生慰长蔽被吃四贪环拉素碍抑席制天，记不串被猛环境丝箩氨及酸盆杀拉死债，漠保烘留棋下剂来偷；T吼e叛tr不纤失耕活的异菌目抗完四鲜环胆素膜，形能莫分投裂爷生候长例，董反馋而皂被签环大丝顿氨凑酸理杀呜死填。（1）来四弦环抱素稼抗叠性稳插纱入且失沿活无找环挺丝饮氨劲酸炒培习养临基（2）认氨统苄扑青饲霉涉素奴抗姿性桨插倍入群失允活漂选萌择液过扩程如举果A体m疤pr上翼插申入艳外剃源D桐N云A，训导惊致舟氨咸苄容青鬼霉搬素渡抗玩性鹿基卷因词失垦活室，瞎可钟用量碘-青坡霉茂素水指咬示心液尝选小择捞。二忍、-半腰乳雷糖孤苷席酶箱显抬色皱反杆应罢选细择训法-半丧乳举糖菜苷皇酶乳晌糖半税乳蒸糖葡煤萄故糖X刷g我a什l半挠乳盈糖5榆-溴-避4野-氯知靛省蓝++深蛛蓝来色1牛.原悟理染：载李体上像有董一田段-半驼乳废糖描苷槽酶银基贷因没（L赴a歇c潜Z）悠的片逮段板（喉氨领基胡端研）届，解其障上耽有求外名源D讯N诵A的技插吼入挣位遣点窗。受朋体另菌晌基祥因缘瑞组中岗有忍突聋变董的-半歼乳晴糖礼苷腥酶核基勒因反（片文段塌缺良失惯）疲。顿可厚以戴被I财P闷T游G诱较导去表办达番。纯载岗体宁和遇受草体施菌镰基植因开组拿可飞以互级补形馅成晶完伯整信有傲功丝式能纯的-半新乳树糖窗苷候酶缎。2掌.选粉择廊过件程-半崖乳榜糖射苷宣酶骨使X爸g味a仅l分牺解困成爸兰辜色控产蹦物萝。利枕用腔插危入旋的龟外缠源驻基脆因第的表膊达劝产仁物特父性瞎进哀行乱直居接京选律择字。傍（着只虫在经特辆定码条巾件孤下蚕）恒。转执化不进型来惠的爱外述源扬基边因捕产谷物埋能脏够没弥银补孩受纯体冻菌挽株许的增突许变院型瘦缺泽陷姓。一振、仔原不理咏：第衔二另节根疤据投插榴入瞧基准因悦的示表明型届选质择1丢.弥王补愁缺打陷h跃i叠s-h圾i脖s+受忆体轮菌序：外婆源舒基杀因老：在策不苏含箭组讨氨甩酸消的培丽养孙基竖中垦生效长小饼鼠燃的锅二彻氢员叶鱼酸紫还嗓原彼酶腊（D暂H射F培R）失对蒙三屋甲夸氧拴苄抹二他氨船嘧疫啶采(雷抑祥制培大僵肠用杆疑菌认生坛长预)刚有村抗皱性浙。D迈H酷F站R载挪体连单接转必化域受谁体家菌三钉甲隆氧伤苄莫二诱氨盗嘧婚啶玩培直养能基段平店板含D细H堆F揉R的倚克亩隆套才库能予生铸长例风：使羡被条转帝化魄的亮受让体部菌疏表朝现皆出祖外伙源垄基偶因大的曾表坚型械。2岸.增乏加剩新销性学状降东解利爹用骆有络插篮入块片奴段升的违重充组贞载求体酬的应分连子阁量御比盖野谎生稠型师载授体德分套子芦量刻大气。一枝、耽直江接扁电雀泳示检腹测乔法从衬转券化罪后印的森菌惨体敞克挑隆烈中饼分漆离碑质将粒模，帐电千泳盗、碌比笋较尺其架分姨子歌量辟。第靠三抬节D耍N策A电泛泳聪检忍测踏法分婚子忆量M句a浮r格k塌e框r载判体重撕组彼克例隆二际、新酶饺切卖电捕泳取筛财选铁法1另.原价理辣：根寨据冒已热知贺的姻外填源D裙N均A序深列饲的因限水制梨性钳酶霜切供图袜谱馆，季选饰择粗一材两贝种遍内夜切击酶箱切音割填质畏粒秒，愉电罪泳夜后鼠比聚较拾电销泳服结请果谋（D值N鸣A带牢数滥和骂长哗度功）钓。或竭用拣合王适射的览内楚切郑酶惰切地下宰插温入睁片通断逐，左再设用洗其巨它堡酶础切某这辉个凝片覆断自，扩电牢泳竭后崖比蹲较器结螺果雀是璃否淹符饺合匆预霸计艇的升结叮果站。酶蚊切亦前酶己切瓦后插洁入搜片密断载却体不车同攀克凑隆表的意酶灾切手结皂果筛舌选映过学程三吃、P砌C私R扩歇增顿检专测瘦法1挪.原免理P拍C者R能愉在呜模慨板扶序蛮列坑上仅扩冬增遍出毛预公期D钢N惨A片笨断际。2足.过蚊程（1）锁从恐重计组近克槽隆奇中耽提才取驾质柴粒疾（它或D哭N搏A）烟。（2）辆用刃外且源D朝N征A插锯入挥片魔断牢引魂物捆作P佣C叨R。（3）抛电矮泳P拨C桌R产摸物死。（4）殿检聪查刘是鼻否妄有P箩C摇R产昂物姓。（5）P失C险R产碎物捉的寄长孩度观是等否晌与筑外批源鲜基利因泰一夏致帐。1肢.核椒酸杂改交第轨四希节核弄酸拾杂弓交怒检斯测磨法一员、窃原饲理拖：重牢组摊克捆隆奥与鲁探牲针趣杂湾交英。3臭.识偏别聚标报记3榆2P或1晴2辣5I。（1）升放涛射拾性缎同恒位术素2容.检戒测畜用那的倦探贱针与元外办源D取N在A插扯入旁片触断跨互岩补柱的筹序拼列仆。（2）鼻非怀放性射缎性吊标救记荧广光敞素二古、穴核赖酸冈杂蓝交设检粮测而方秧法用D遵N捐A（便或R系N胸A）垒探卫针绝检柔测D扬N蹦A样是品茄。1疏.剧S秘o周u斧t世h柏e辰r壮n竞b蔑l傅o鸟t夸t等i考n逃g从愧宿卵主岗细黎胞渣中站提植取D细N湾A（天或寨质迷粒恭载揭体马）狡，炒再吐用脆探乐针路杂冲交负。只茎有贤带估有春插锹入锅片慈断谨的钟重费组胸载烛体孝才秀能朗与链探编针户杂这交删，差在薄底脊片乞上激曝而光殃显园示勉。S推o琴u五t微h竖e性r裙n互b砌l光o艰t筛写选迷结端果（1）摧原说位购杂躲交算筛阁选特愿点肠：对概应岁的趋菌拥斑误或热噬赠菌半斑寻位雕置捉不材变晋，网可唤以继直惑接扛找剩出绍阳啄性炼菌宽落婚。2唯.厉N杰o缸r勺t羊h先e悉r绝n饲b之l摄o究t贱t终i秋n谁g用D洗N陷A（喝或R温N包A）果探旨针壳检艘测R团N议A样膛品乎。主旅要斧检摊测架插南入你片技断轧是斑否葛被画转惜录殿。从跑宿捷主梅细筝胞绩中米提翅取R性N弓A，员再百用触探薄针甩杂征交恨。利篮用直抗因体馒作猜为“探搂针”来锣检猴测滋转逮入半受她体似菌开并渴且燥表铲达之出晕相煎应捕的县蛋想白猴质缺的岩外骆源夏基驾因巷。根鸦据意第灾一放抗周体重（帽一胀抗您）铃和徐第肿二禁抗棕体革（紧二窄抗患）扛的阀性肃质四可弯分佛为羞几桨种戒作乌用套方彩式对：一径、不放讽射夏性迁抗顽体碑检元测值法第歇五磨节免铃疫中化溪学天检好测怖法1拢.抗懂体厌与标产格物永的萍结部合瘦方提式对竖表尖达馅产晒物灾的刷检待测谢。蛋盟白—鹊—蛋指白“杂顺交”待川测它基即因产网物临蛋肾白一铸抗二皇抗1摘2店5I标鸟记享的症二抗死结篮合庸蛋熔白固司相夫支炕持篮滤普膜待乏测走基恶因产铜物穗蛋魄白一纺抗1渡2某5I标谅记示的独二气抗固践相梢支傍持年滤响膜待测坦基龙因产锡物启蛋所白一烂抗固领相剑支欢持库滤勉膜固冶相领支标持器滤域膜待殖测盲基悬因产胡物幅蛋馅白一图抗二驳抗1萍2县5I标挡记手的献二片抗结轮合忌蛋违白1族2折5I标锐记篮的化二欣抗2晕.放冤射杀性哑抗薯体丛检镰测撤法辣过团程3食.双遥位帜点些检忠测距法质粮粒飞基号因A插桌入公基域因B表疫达质拥粒滩蛋蹦白A外研源辛蛋腿白B融球合两蛋呢白检竹测武融渐合蚊蛋键白翠。既驻检忙测谱外祝源析基咱因现产巴物烟又吼检零测目载荒体其基拆因忽产套物助。固语相束支持废滤耳膜抗A抗究体1当2蚂5I标壤记皇的抗B抗燃体质煎粒鸟蛋亭白A外啦源逗蛋榴白B质胁粒椒蛋输白A外缝源茧蛋刘白B固犹相露支持杆滤素膜抗A抗抽体发毒光山，援底烦片娃曝右光二义、锯免爷疫铅沉浮淀琴检柔测院法把奏非疯放质射醋性妥抗挡体扁加顶到眼平宵板焰培辉养块灰>恐当蝴插侮入辜基县因折的册表姨达辟产挥物昌被至细奥菌牺分违泌销到珍菌昏落屈周顽围恭时钓，悲就流会胁与抱抗之体极反初应律形满成“甲沉吉淀府圈疗”。1妨.原璃理抗匠原—哨—抗监体欢凝顽集归反祝应骂。检挥测杨分碎泌件型袋产签物垃。2枯.方贱法对熔于当不盗能厦被尿分蜂泌抹到园菌者体耍外农的风蛋拔白画质逼可睡先睛进椅行村原捡位队溶们菌济处泳理港（训溶幼菌单酶仪、爽原蛋噬粒菌恋体想诱卧发略）滚。三疏、侍酶搏联晨免够疫饺吸坟附孟测至定开（E狗L栏I胃S音A）En浑z芒y麦m硬e厦-li央n悬k绵e度dim绍m冲u踏n普oso帜r职b传a户n斥tas薪s挖a饱y1拿.原叫理闻：一称抗思（p译r铃i侨m真a券r胁y景a拌n买t笨i读b械o趴d姥y）:与敢目晶标念分蔬子格的铸特秤异义结磨合犹。二判抗访（s棚e效c饱o矩n光d安a渠r演y首a脊n搬t喘i敬b剪o饼d牲y）茂：与倾一住抗不的春特铃异忧性景结挖合出。酶负连迅（e众n箱z左y搅m浇e游-粉l苏i燃n陡k拦e）：二领抗跟上亩携美带欺一在种春酶能手催主化议一股种俭反停应煤将顾无孝色醒的布底转物战转检变曲为奶有梁色镜的踩物栗质命（叮或艇发善光弃）巾，找再泳通笼过叨比脆色沃测蚂定堡有孔色尝物倡质适的葬含喉量路（恒或均光线强笼度弃）凳，界从批而猴推优测铃目进标冻分仪子影的库含床量礼。待津测响基刚因产怒物区蛋造白一婶抗二车抗酶待历测挎基洪因产顿物唉蛋委白一歼抗二锦抗无居色尤的刃底继物有富色赴的揪产港物比禽色停观乒察酶1慕9在利特饭殊严的叛分晃光绕光傲度威仪鸡（酶弱标丑仪）议上摄比芝色柴，化打充印框出施结饥果廉。（5）攀比共色四迅、滋免博疫浑印携迹设（w梢e蹦s释t取e头r本n园b常l想o甜t抄t舒i年n强g）裕法1首.原亡理矩：在润蛋拘白尾质料凝馆胶菊电径泳膊以棚后叹，搅用转唇膜运和临免长疫的药方幻玉法萄检贵测寨胶皮上虾的永蛋川白弯质策泳养带括。（1）S福D贪S聚袜丙卧烯佩酰练胺将凝碗胶破电纸泳是音蛋蒙白献质么的职变突性乖剂滤，声使凝煮疼沸紫变贝性摊的认蛋估白站质维翅持邮线令性掌状尺态，丸并逢与饼蛋贱白肆质这结青合抖，善使辆蛋疤白苦质带超上哪负属电裕荷。①S招D复S就:（S吼D侵S贺-灶P韵A余G桶E）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