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第七章外源基因的表达及其优化策略第一节影响外源基因表达的因素第二节外源基因在原核细胞中的表达第三节外源基因在真核细胞中的表达第一节影响外源基因表达的因素基因表达:从DNA分子有序地将其所承载的遗传信息通过密码子和反密码子系统转变由特定氨基酸顺序构成的多肽或蛋白质分子过程,从而决定生物有机体遗传表型。第一节影响外源基因表达的因素基因表达是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有加工过程。基因工程中基因高效表达研究是指外源基因在某种细胞中的表达活动,即剪切下外源基因片段,拼接到另一个基因表达体系中,使其能获得原生物活性又可高产的表达产物。第一节影响外源基因表达的因素DMMMMRAHlication基因表达遗传信息从DNA到蛋白质的传递过程中心法则(centraRNAdogma)。Protein第一节影响外源基因表达的因素克隆基因的表达外源基因在宿主细胞中表达导入宿主细胞在宿主细胞中表达出蛋白质宿主细胞原核细胞或真核细胞第一节影响外源基因表达的因素影响外源基因表达的因素主要有:阅读框架顺式作用元件翻译过程表达体系第一节影响外源基因表达的因素、阅读框架对转化基因的影响什么是阅读框架(openreadingframe,ORF)?二、顺式作用元件对基因表达的影响1对基因转录起始的调控1)启动子2)增强子3沉默子第一节影响外源基因表达的因素顺式作用元件对基因表达的影响2对基因转录终止的调控1)终止子2)衰减子3对DNA结构的影响1)核基质结合区:一段与核基质特异结合的DNA序列。2)绝缘子:对一侧有作用,对另一侧没有。3)基因座控制区:通过改变染色质结构导致基因转录第一节影响外源基因表达的因素三、翻译过程对表达的影响1翻译起始对基因表达的影响2密码子偏爱性对基因表达的影响3翻译终止对基因表达的影响四、表达系统对表达产物的影响第二节外源基因在原核细胞中的表达外源基因表达系统由基因表达载体和相应的受体细胞两部分组成。宿主细胞分为两大类第一类为原核细胞大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、链霉菌等;第二类为真核细胞酵母、丝状真菌、哺乳动物细胞等。目前使用最广泛的宿主菌

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