用分光光度法测定桃罐头中果肉的维生素C含量

用分光光度法测定桃罐头中果肉的维生素C含量UsingSpectrophotometryInCannedPeachPulpofVitaminCContent李书亚付佳哈尔滨工业大学（威海）HarbinIndustrialUniversityatWeihai摘要：不同价钱品牌的水果罐头中果肉所富含的维生素C的量是不同的，通过分光光度计法测定不同品牌黄桃罐头的维生素C含量，从而有对比的选择维生素C含量更高的罐头食用。维生素C极不稳定，处理样品时要添加2%偏磷酸防止抗坏血酸氧化。Abstract:differentpricebrandinthecannedfruitpulpcontaintheamountofvitaminCisdifferent,throughthespectrophotometermethoddeterminationofdifferentbrandscanneddoodsvitaminCcontent,andthechoiceofcontrastvitaminCcontenthighercannedfood.VitaminChighlystable,processingofsamplestoadd2%metaphosphoricacidtopreventascorbicacidoxidation.关键词：不同品牌；黄桃罐头；维生素C；分光光度法；Keywords:differentbrand;Canneddoods,VitaminC;spectrophotometry.维生素C(VitaminC,AscorbicAcid)又叫L-抗坏血酸，是一种水溶性维生素。是人体正常生理代谢不可缺少的一类有机物［1］,VC缺乏会导致坏血病［2］。VC在人体内不能合成。目前VC的测定方法有荧光分析法［3］、碘量法［4］、2,4-二硝基苯肼法［5］、2，6-二氯酚靛酚法［6］、高效液相色谱法［7］、铁(II)-邻菲罗啉-BPR体系分光光度法［8］、电位滴定法［9］。食物中的维生素C被人体小肠上段吸收。一旦吸收，就分布到体内所有的水溶性结构中，正常成人体内的维生素C代谢活性池中约有1500mg维生素C,最高储存峰值为3000mg维生素C。正常情况下，维生素C绝大部分在体内经代谢分解成草酸或与硫酸结合生成抗坏血酸-2-硫酸由尿排出；另一部分可直接由尿排出体外。维生素C是烯醇式化合物，具有-C=C-基，在可见光区无吸收，在紫外区有吸收。分别对不同浓度的标准维生素C与试剂空白溶液在200〜400nm波长范围内进行扫描，通过吸收光谱曲线法确定维生素C水溶液的最大吸收波长。又根据维生素C对碱不稳定的特性，于最大吸收波长处测定样品溶液与碱处理液样品两者吸光度之差，通过查标准维生素C的校准曲线，即可得样品中维生素C的含量。在样品处理过程中，可添加偏磷酸来防止抗坏血酸(维生素C)的氧化。本实验选择2%偏磷酸作为分光光度法的溶剂。方法：试剂偏磷酸溶解并定容至100mL。次溶液应贮藏于棕色试剂瓶中，最好现配现用。2%(W/V)偏磷酸溶液和0.5MNaOH溶液。一般分析纯抗坏血酸纯度为99.5%以上，可不标定，如试剂发黄，则可弃之不用。哈尔滨工业大学(威海)海洋科学与技术学院实验室提供。器材紫外-可见分光光度计、电子天平、石英比色皿、组织捣碎机、高速离心机、10mL移液管、10mL比色管、100mL锥形瓶若干，大小不同烧杯若干，哈尔滨工业大学(威海)海洋科学与技术学院实验室提供。材料：欢乐家桃罐头，广东湛江市欢乐家食品有限公司提供；冠之林桃罐头，山东临沂市康发食品有限公司提供；康士利桃罐头，山东盛德泰食品有限公司提供。操作：绘制吸收光谱曲线以蒸馏水为参比，去标准抗坏血酸溶液6mL，在220〜320nm范围绘制维生素C的吸收光谱曲线，并确定最大吸收峰所对应的入射波长入max。绘制标准曲线吸取0.00、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20mL抗坏血酸标准溶液，置于10mL比色管中；用2%偏磷酸定容，摇匀。此标准系列抗坏血酸浓度分别为0.00、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20pg/mL。以蒸馏水为参比，在波长入max处，用1cm石英比色皿测定标准系列抗坏血酸溶液的吸光度。抗坏血酸吸光度为A,试剂空白吸光度A0。计算吸光度差值^A=A-A0.以吸光度差值△A对抗坏血酸浓度C绘制标准曲线。提取样品将桃罐头样品洗净，用砂布或吸水纸吸干表面水分。称取果肉100g，放入组织捣碎机中，加入100mL2%偏磷酸溶液，迅速捣成匀浆。称取31.5g浆状样品，用2%偏磷酸将样品移入100mL烧杯中，并稀释至100mL刻度。均匀倒入离心管中离心8min,7500rad/min。样品的测定准确移取澄清透明的0.4mL提取液，置于10mL比色管中，用2%偏磷酸稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为参比，在波长\max处，用1cm石英比色皿测定其吸光度，。每个样品做三次重复。得测碱处理样品的测定：分别吸取0.4mL澄清透明提取液，加入6滴0.5mol/L的NaOH溶液，置于10mL比色管中混匀，室温下静置40min后加入2%偏磷酸溶液稀释至刻度后摇匀，在波长入max处，用1cm石英比色皿测定其吸光度。每个样品做三次重复。八 200xC结果计算维生素C含量mg/100g= —；mxV式中：m 样品质量；200——稀释倍数；C 从标准曲线上查得抗坏血酸的含量，p g/mL；V -测试时吸取提取液体积，mL。吸光度值A吸光度差值AA抗坏血酸浓度C0.058000.0860.02810.1650.10720.2830.12540.3950.33760.5370.47980.6390.581100.7720.71412表1---标准系列抗坏血酸溶液在波长Amax处的吸收光度数Table1-standardseriesascorbicacidsolutioninwavelengthAMaxplaceabsorptionphotometricdatasheet抗坏血酸浓度C与吸光度值的关系的标准曲线y抗坏血酸浓度C与吸光度值的关系的标准曲线y=15.964x+0.6436表2--维生素C的浓度与吸光度值的关系标准曲线(MboZLJCJ霎曾蒐)Table2-vitaminCconcentrationandabsorbancevaluerelationshipstandardcurve未处理AA加碱A0A0△AVC含量pg/mL冠芝霖0.2570.2610.2600.2590.0690.0700.0680.0690.1903.677欢乐家0.2350.2410.2380.2380.1100.1130.1160.1130.1252.631康0.2620.2540.2630.2600.0330.0320.0320.0320.2284.276表3--实验结果数据的处理与计算（入max=245nm）Table3-experimentalresultsdataprocessingandcalculation（Amax=245nm）交流与讨论维生素c的主要作用是提高免疫力，预防癌症、心脏病、中风，保护牙齿和牙龈等。另外，坚持按时服用维生素c还可以使皮肤黑色素沉着减少，从而减少黑斑和雀斑，使皮肤白皙。富含维生素c的食物有花菜、青辣椒、橙子、葡萄汁、西红柿等，可以说，在所有的蔬菜、水果中，维生素c含量都不少。专家认为，每人每天维生素c的最佳用量应为200〜300毫克，最低不少于60毫克，半杯（大约一百毫升）新鲜橙汁便可满足这个最低量。而中国营养学会建议的膳食参考摄入量（RNI），成年人为100mg/日，可耐受最高摄入量（UL）为1000mg/日。如果人处在缺乏维生素C的临界状态，会出现嗜睡、疲乏，易发生感染，严重的话，可出现牙龈出血、受伤后伤口愈合延缓等情况。紧张工作和学习中的人 紧张会抑制免疫系统的功能，降低其效率，容易促进机体内潜伏病毒的重新复活。怀孕与哺乳期间的女性 这时候妇女机体内维生素C的水平比平常时候低，造成了抵抗感冒能力低下，而不少感冒药又对孕妇有副作用，因此往往感冒被视为怀孕期间最大的”麻烦”。体内缺铁的人 缺铁不仅仅是因为由于铁吸收的不够，更重要的是机体从食物中吸收铁能力的不足。人体缺铁时，维生素C可帮助人体从非肉类食物中吸收铁的能力上升10倍。经常抽烟的人 吸烟者对维生素C的消耗率比普通人群更高。研究显示，重度吸烟者比非吸烟者对维生素的需求量增加40%以上。以上这些人都是特别需要维生素C的人。通过测量与计算，诸多因素影响了罐头中果肉维生素C的含量。如温度，反应时间等。温度在45度以下维生素C含量随温度的升高而升高，在高于45度后维生素C含量基本无变化，所以在日常冲泡VC泡腾片时应尽量使用40°C〜55°C之间的温水进行冲泡。烹饪含有VC的蔬菜时应该尽量减少高温蒸煮煎炸时间。不要在低温下贮藏水果蔬菜，容易使得VC流失。这次实验要求我们将理论与实践结合，自己动手在设计实验并且撰写实验报告，可以说是进入大学以来难度最大的一次实验，但是由于有一定的准备，在实验过程中不慌不忙，虽然时间很紧张，但是在和搭档的密切配合下，依然在预定时间内完成了预定的计划。在实验中，我们初步学会了如何来合理选取一些变量来定性定量地测定水果罐头中的VC含量，并且通过自己和搭档来设计一些实验来对其进行测定。实验结束后，需要将我们的实验数据通过一些图表来将其展示在实验报告中，并且对其进行分析。这样的实验考验了我们的耐心和创新，对我们来说是一种全方位的提高。在看到自己努力完成下的实验论文后，我感到自己在这门实验课中收获了很多，也提高了很多，觉得意义非凡。[参考文献]王喜生.人体营养状况的评价方法[M].天津：天津科学出版社，1987,323-326.A.H.恩斯明格.食物与营养百科全书[M].北京:北京农业出版社,1986,73-148.孙振艳，赵中一.荧光分析法测定维生素C[J].化学分析计量,2006,4(4).王美荣.直接碘量法定量测定维生素C[J].阴山学刊,2006,4(3).林桂荣，郭泳，付亚文，等.新鲜果蔬维生素C测定方法研究[J].北方园艺,1995,2:7-