河北医大中药药理学实验指导04基本实验项目-21党参对小鼠记忆获得性障碍的改善作用跳台法

党参对小鼠记忆获得性障碍的改善作用（跳台法）【目的】学习记忆获得性障碍模型的制作方法，掌握用跳台法观察中药的益智作用。【原理】小鼠跳台仪底面可以通电，底面上放置1个绝缘的跳台。当小鼠在一次训练中受到电击时，跳上跳台可逃避电击，从而获得记忆。记忆障碍模型组动物在uI练前注射胆碱受体阻断剂——樟柳碱或东食若碱造成记忆障碍，在一定时间内学习记忆能力下降，跳下潜伏期缩短，跳下次数增加。通过记忆障碍模型动物可观察补益药复方党参对小鼠记忆障碍的改善作用。智力低下多见于虚证，是由于气血亏损，心脾两虚导致肾精不足,髓海不充所致。许多具有补益作用的中药及其复方制剂常有益智、增强记忆和填髓补脑等功效。【器材】小鼠跳台仪：为一个60cmx12cmx18cm的被动回避反射箱，箱内用不透明的黑色塑料板分隔成5间，箱底铺以铜栅，铜丝直径为2mm直径为2mm，间隔为5mmo每间左后方放置一个高和直径均为405cm的橡皮垫，作为跳台。可调变压器、秒表5只、1ml注射器3支。【药品】党参10g/ml、东苴若碱lmg/ml、脑复康10mg/ml。【动物】小白鼠。【方法】用小鼠6只，雄性，体重为15±2g,按体重随机分为3组，每组2只。分别为给药组、模型组和对照组。首先将可调变压器与跳台仪相连，用变压器控制电流强度。训练前lOmin，模型组、给药组小鼠分别腹腔注射东苴若碱2mg/kg，对照组腹腔注射等量的生理盐水。训练时，同时将5只小鼠分别放入小室内，适应3min,然后通以36V电流。小鼠双足同时接触铜栅为触电，视为错误反应。训练5min并记录触电次数。2h后重新测试，观察小鼠记忆情况。测试时，先把小鼠放在跳台上，记录并比较5min内跳下次数，作为记忆指标。统计、分析并比较3或5min内跳下次数及跳下潜伏期(将小鼠放到台上开始计时，到第一次双足触电时间)作为记忆指标，比较各组间差异。【结果】按表记录。党参对东苴若碱所致小鼠记忆获得障碍的改善作用(□士SD)组别5min内错误次数潜伏期(s)对照组模型组给药组【注意】(1)实验室应保持安静，光线不宜过强，室温应控制在20~25℃;实验前动物应在实验室适应2~3d。(2)实验用动物应预先经过挑选，两前肢间皮肤电阻在150~300k。之间为宜，实验时各组间动物应交叉进行，以减少时辰的影响。(3)实验过程中要及时清理动物大小便，实验完成后跳台仪底部要彻底清洗，擦干；铜栅上如污垢沉积会影响触电效果。此方法简便易行，不需要复杂的技术设备，同时可以观察5只小鼠的反应，适用于初筛。缺点是动物个体差异比较大。【附】记忆损伤模型的制备：中枢抑制药、M受体阻断剂、脑蛋白合成抑制剂以及缺氧均可制作各类型学习记忆缺损的动物模型。例如：用戊巴比妥钠15~30mg/kg，训练前30min腹腔给药，或20~40%的乙醇0.1ml/10g训练前30min灌胃，均可制作小鼠记忆获得性障碍模型；脑蛋白质合成抑制剂环乙酰亚胺120mg/kg训练后腹腔给药，或致缺氧剂亚硝酸钠120mg/kg训练后皮下给药，均可造成记忆巩固障碍；上述乙醇于测试前30min灌胃给药可造成小鼠记忆再现障碍，这些方法均可用于益智药物的筛选。【思考题】.