内镜清洗消毒风险因素与对策

内镜感染风险及科学消毒对策

戴彦榛中国医院协会医院感染管理专业委员会委员中华预防医学会消毒分会委员北京长江脉健之素消毒技术研究所所长

内镜感染风险：

NO.3病毒：HBV和HCV、HIV、H5N1、SARS

细菌：幽门螺杆菌、铜绿假单胞菌、分枝杆菌、葡萄球菌属、肠道细菌、真菌、沙门氏菌朊毒体（克-雅病病原体）

CJD内镜诊疗过程可能传播的病原体内镜感染风险：

NO.3膜内细菌比浮游菌抗药性强1000倍以上!65%以上的医院感染由细菌生物膜引起!细菌生物膜无处不在!内镜使用过程较易形成细菌生物膜内镜感染风险：

NO.3戊二醛耐药菌株：分枝杆菌(龟型分枝杆菌、人结核杆菌等);铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、幽门螺杆菌、大肠埃希杆菌、消毒剂耐药已成为医院感染重大风险!内镜常用消毒剂已形成众多耐药菌!氯消毒剂耐药菌株：克雷伯杆菌、分枝杆菌金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、表皮葡萄球菌、产碱假单胞菌,肠球菌、铜绿假单胞菌内镜感染风险：

NO.3有机物、酸碱性、表面活性剂等大部分消毒剂都会受其干扰!内镜消毒过程易受多种干扰因素干扰!金属离子、

化学药物、漂洗水质、高压气体、温度光线等。内镜消毒风险控制取决于：清洗消毒方法的科学性与程序的规范性；清洗剂与消毒剂的合理选择和科学应用。细菌生物膜风险内镜消毒第一大风险：4008783377膜内细比浮游菌抗药性强达1000倍以上!65%以上的医院感染由细菌生物膜引起!细菌生物膜细菌生物膜（bacterialbiofilm）：

吸附于接触表面的细菌及其分泌的聚合多糖基质（EPS）所构成集合体，是通过细菌繁殖和新细菌的加入形成微生物繁殖体，并被包裹在细胞外聚合多糖基质（EPS）中，表面形成一层保护膜，并牢固附着在物体表面，能一定程度的抵抗清洗剂和消毒剂的作用。在细菌生物膜集合体中，每个细菌个体有基因的交换传递、有整体基因的调控、有分工协作形成抗力、甚至有营养及代谢物质运输通道，因此，细菌生物膜是微生物一物复杂的生命存在与活动形式，是导致医院感染甚至是严重的医院感染的重要因素。细菌生物膜细菌生物膜的形成：

生物膜的形成依赖于载体，载体可以是惰性的,也可以是无生命的物质或活体组织。医疗器械上的细菌生物膜基本上是以细菌自身分泌的细胞外聚合物---聚合多糖基质(EPS)为载体,EPS以多层粘性物将每一个细菌包裹起来,给细菌生物膜提供结构支撑,使之不受水流,洗涤剂及消毒剂的影响。

电子显微镜扫描显示：内窥镜送气/水管道表面的细菌生物膜。电子显微镜扫描显示：被生物膜所覆盖的正常生长繁殖的细菌，它们能逃脱高水平消毒和灭菌。细菌生物膜一条崭新的内镜活检管道表面

4µm300次检查之后内镜活检管道内部表面(低倍镜下的图像)20µm4µm300次检查之后内镜活检管道内部表面(高倍镜下的图像)4µm600次检查之后内镜活检管道内部表面细菌生物膜

细菌生物膜的存在：

细菌生物膜可在多种物体表面形成，如活体组织、留置型医疗器械,内镜腔道,中心静脉道管,宫内避孕器,人工关节,心脏起博器等。医疗环境物体表面、工业用水、生活及饮用水管道、天然水系、人体隐形眼镜等都可能存在细菌生物膜。细菌生物膜的耐药：生物膜内的细菌比浮游状态的细菌的抗药性强达1000倍以上。其对消毒剂及抗生素的“渗透限制”能力极强。◆医疗器械如内镜腔道尤其是被刮伤的器械表面、内镜腔道等易形

成牢固的细菌生物膜。◆随着生物膜的成熟,一般清洗剂难以清除生物膜，膜内微生物对

杀菌剂及抗生素的抵抗力可以增加1000倍。◆膜内细菌不断生长繁殖，数量增至一定程度，可破膜而出，

从而引发感染。◆膜内细菌在经受杀菌剂部分死亡过程中,还可能存留内毒素于膜

中,并可能带入人体循环中(美国《软式胃肠内镜再处理的感染控

制标准》中描述)◆细菌生物膜的形成是医疗器械清洗消毒的巨大难题和风险。研究证明:65%以上的医院感染由细菌生物膜引起。细菌生物膜在器械消毒中的风险对策！细菌生物膜风险：4008783377科学选择医用清洗剂建立清洗预消毒过程避免活菌形成生物膜◆多种生物酶的联合作用形成高效有机物分解功能；◆无泡或低泡非离子表面活性剂的高效有机物清除功能；◆有效杀灭微生物的清洗预消毒功能；◆生物膜的聚合多糖基质EPS裂解功能；◆对内镜的缓蚀阻垢功能；◆无毒、无刺激、无腐蚀安全性能；◆溶剂体系稳定、无溶剂挥发的稳定性能；◆无腐蚀、无损伤的材质兼容性能。理想的内镜清洗剂应有功能医用清洗剂的技术创新HealthEssenceCleansingProductsofBiologicalEnzymeSeries理想的内镜清洗剂应建立的功能一、双效清洗功能的建立◆多种生物酶复合应用，高效分解有机物；◆高性能非离子表面活性体系，高效去除有机物。二、EPS裂解功能的建立：配伍EPS裂解剂(EPS:细菌生物膜载体--聚合多糖基质)，建立EPS裂解功能，快速裂解EPS，高效清除细菌生物膜，阻止细菌生物膜的形成。HealthEssenceCleansingProductsofBiologicalEnzymeSeries理想的内镜清洗剂应建立的功能三、清洗预消毒功能的建立：

复合溶菌酶的科学配伍，生物酶及表面活性杀菌剂的协同作用，使其在保持高效清洗功能之同时实现高效预消毒作用(3-5log)，避免细菌生物膜形成，并使后续消毒更加安全可靠。HealthEssenceCleansingProductsofBiologicalEnzymeSeries理想的内镜清洗剂应建立的功能四、高效渗透功能的建立：配伍高效渗透剂SF，能快速渗透剥离各种有机物，有效渗透清除附着于医疗器械内外壁等处的细菌生物膜，并能有效阻止细菌生物膜的形成。HealthEssenceCleansingProductsofBiologicalEnzymeSeries理想的内镜清洗剂应建立的功能四、缓蚀阻垢功能的建立：

本品配伍缓蚀剂及阻垢剂，避免内镜被腐蚀尤其是划伤或受损处产生腐蚀生锈或结垢，避免因此给细菌生物膜形成提供附着条件。HealthEssenceCleansingProductsofBiologicalEnzymeSeries理想的内镜清洗剂应建立的功能浙医一院肠镜损伤钳子管道与正常管道的比较

法国马赛加蒙德实验室—提供的实验结果图片五、浓缩无泡溶液：

无水配方，高含量浓缩制剂，1:400、1:800稀释使用；本品选用无泡及低泡型非离子表面活性剂，且极易清洗。HealthEssenceCleansingProductsofBiologicalEnzymeSeries理想的内镜清洗剂应建立的功能功能强化型消毒剂：◆高效消毒功能；◆抗有机物干扰功能，◆高效渗透消毒能力；◆EPS溶解或裂解功能；◆抗消毒剂耐药功能。

有效清除细菌生物膜的消毒办法消毒剂耐药风险内镜消毒第二大风险：4008783377医院感染常见耐药菌的消毒剂耐药性：鲍曼不动杆菌（Acimetobaumanii，ABA）：实验一：张金艳等报告,临床36株ABA中消毒剂耐药基因qacE△

检出率为83.13%，实验二：周月清等检测20株ABA中qacE△1(包括qacE△1-sul)基因携带率为90.0%；实验三：

临床27株ABA，21株检出qacE△1,检出率为77.77%。铜绿假单胞菌（Pa）：实验一：医院检测28株，qacE△1-sul1阳性85.7%。实验二：

35株Pa菌中qacE阳性率54.3%；实验二：检测35株多重耐药的Pa，qacE△1基因阳性率达94.13%。医院感染常见耐药菌的消毒剂耐药性：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）：实验一：4家医院131株MRSA中，qacA检出率55%,qacA/B检出率61.1%；实验二：38株MRSA有18株MRSA(34.2%)对碘伏有抗性；实验二：对51株MRSA进行新洁尔灭体外抑菌试验,MIC大于标准菌株的占71%。大肠埃希菌（Escherichiacoli）实验一：检测65株临床大肠埃希菌,38株检测到qacE-sull基因,阳性率58.46%。实验二：检测34株临床大肠埃希菌25株检测到qacE△1基因,阳性率73.52%。实验二：ESBL阳性大肠杆菌对碘类及季铵盐消毒剂抗力比ESBL阴性菌株更强。《中华医院感染学杂志》2006年第08期

金黄色葡萄球菌(SAU)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)医院获得性菌株qacA/B基因检出率社区获得性菌株qacA/B基因检出率医院获得性菌株qacA/B基因检出率社区获得性菌株qacA/B基因检出率52.2%18.8%58.8%0其中：23株医院获得性SAU中,MRSA占73.9%,其中：16株社区获得性感染SAU中,MRSA占43.8%;《中国消毒学杂志》2007年第05期临床分离的6株铜绿假单胞菌中,有5株检出qacE△1-SulⅠ基因阳性,携带率83%《中国抗生素杂志》2007年第12期9家医院临床分离311株铜绿假单胞菌，检出qacE△1-sulⅠ基因196株，检出率63.0%《中国卫生检验杂志》2007年第07期烧伤病房鲍曼不动杆菌耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sul1)阳性64株

84.21%.《检验医学》2007年第03期临床标本分离的大肠埃希菌95株,耐消毒剂qacE△1-sull基因的检出率为53%医院与社区获得性感染金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因的研究医院感染致病菌消毒耐药普遍存在！

菌株来源平均检出率被检测微生物耐消毒剂-磺胺qacE△1-sull基因检出率耐消毒剂

qacA/B基因检出率耐消毒剂qacE△1-sull基因检出率耐消毒剂qacA/B基因检出率临床分离菌株115株菌58.3%(67/115)20.0%(23/115)不动杆菌39株89.7%10.3%耐甲氧西林葡萄球菌(MRSA)25株12.0%(3/25)68.0%(17/25)环境中分离的53株菌17.0%(9/53)11.3%(6/53)不动杆菌15株33.3%（5/15）13.3%（2/15）耐甲氧西林葡萄球菌(MRSA)16株18.7%（3/16）18.7%（3/16）耐消毒剂基因qacE△1-sull、qacA/B检出率：医院感染致病菌消毒剂耐药性普遍存在！

1951年Lowbury观察到假单胞菌对季铵盐类化合物有耐受现象，提出了随着时间的推移，细菌对消毒剂的敏感性正在逐渐减低。

自六十年代开始，陆续发现许多菌株对消毒剂产生了抗性，包括：对季铵盐类、双胍类(如洗必泰)、酚类、醇类、碘类等的抗性。1988年Chapman也报道了细菌对包括季铵盐、氯已定、戊二醛以及酚类化合物在内的多种消毒剂产生耐药性。消毒剂耐药研究始于1951年◆各类消毒剂的常见耐药菌株：季铵盐类消毒剂铜绿假单胞菌产碱杆菌属肺炎克雷伯菌白色念珠菌葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌◆各类消毒剂的常见耐药菌株：洗必泰（胍）类消毒剂铜绿假单胞菌

奇异变形杆菌恶臭杆菌肠杆菌属产碱杆菌属灵杆菌及白色念珠菌肺炎克雷伯杆菌粪链球菌等80％以上绿脓杆菌◆各类消毒剂的常见耐药菌株：含氯类消毒剂金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、表皮葡萄球菌、产碱假单胞菌,肠球菌、克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌(4%-13%)、分枝杆菌◆各类消毒剂的常见耐药菌株：碘类消毒剂铜绿假单胞菌、洋葱假单胞菌、大肠埃希菌MRSA菌株(感染而导致菌血症)。◆各类消毒剂的常见耐药菌株：酚类消毒剂：革兰氏阴性菌全面耐药

(成为皮肤感染的潜在原因)。金属离子消毒剂：绿脓杆菌、肠球菌、金葡菌、假单胞菌。戊二醛耐药菌株：分枝杆菌(包括龟型分枝杆菌、人结核杆菌、牛结核杆菌等);铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、幽门螺杆菌恶臭杆菌大肠埃希菌

淘汰戊二醛的理由之一：◆分枝杆菌对戊二醛的普遍耐药！0.55%HE-OPA对抗酸性分枝杆菌具有较快的杀灭作用，特别是对耐戊二醛的龟分枝杆菌，在25℃下作用5min杀灭率可达5log以上。而2%戊二醛则很难将其杀灭，在25℃下作用20min杀灭率仅为1log。《中国消毒学杂志》2007年第24卷第5期许能锋等，两种醛类消毒剂杀灭龟分枝杆菌效果的比较及影响因素

淘汰戊二醛的理由：◆铜绿假单胞菌对戊二醛的普遍耐药！

王玉月等对临床标本中分离出的铜绿假单胞菌190株作了五种消毒剂(戊二醛、氯己定、苯扎溴铵、含氯消毒剂、氯氧三嗪）的消毒抗性检测。结果表明:铜绿假单胞菌对戊二醛的抗性最强,MIC50为32μg/ml。《中华医院感染学学杂志》200818(12):1717-1719

淘汰戊二醛的理由：◆幽门螺杆菌对戊二醛的普遍耐药！

台湾Hung－ChunaChiu等(2009)在临床幽门螺杆菌株中鉴定出与戊二醛抗性相关的Imp／OstA蛋白,

Imp／OstAmsbA的表达水平与临床分离菌株经戊二醛处理后产生的对戊二醛的抗性相关,并对低水溶性药物的抗药性发挥协同作用。BMCMicrobiology，2009、9（136）：136幽门螺杆菌(Hp)的危害:幽门螺杆菌与慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌的发生有着密切的关系。1994年世界卫生组织国际癌症研究中心已将Hp列为胃癌5级致病因中第一因子。国外研究显示:Hp感染能明显增强胃黏膜上皮细胞凋亡和增殖的诱导。幽门螺杆菌有鞭毛，在胃内可穿过黏膜层移向胃黏膜;因其有黏附素能紧贴上皮细胞长期定居于胃窦黏膜小凹处及其邻近上皮表面不易除去。由于其具有尿素酶能分解尿素产生NH3，既能保持细菌周围的中性环境，又可损伤上皮细胞的细胞膜，加上其空泡素(vagA)蛋白使上皮细胞受损，其细胞毒素相关基因(cagA)蛋白能引起强烈的发热反应，其菌体胞壁还能作为抗原产生免疫反应。这些因素的长期存在导致了胃黏膜的慢性反应［2］。同时已有报道，肝硬化Hp阳性患者通过根治Hp治疗后血氨水平明显下降，而Hp阴性患者做根治Hp后血氨水平无明显下降，提示胃内Hp尿素酶产生氨是肝硬化患者高血氨的重要来源。

由此可见，Hp是胃镜室院内感染的头号敌人。◆消毒耐药基本概念：◆

某种细菌出现对消毒剂的常用浓度不再敏感的菌株；

◆

出现在能杀灭或抑制绝大部分该种细菌的消毒剂浓度下不能被杀灭或抑制

的菌株；◆不只是细菌会产生耐药性,真菌、支原体等微生物也存在消毒剂耐药性问题；◆

定量概念：即指细菌与消毒剂多次接触后,

使该类消毒剂的最小抑菌浓度（MIC）或最小杀菌浓度（MBC）升高的现象。检测方法：

◆

将分离菌株与标准菌株的MIC或MBC进行对比来判定有无耐药性，

但测定MIC值时受营养肉汤影响较大,当MBC值较低时,不能用消毒剂加营养肉汤的

方法测定其

MIC值。国外主要是通过检测某些特定耐药基因来判断耐药性。

◆目前国内多采用PCR检测法检测消毒剂耐药基因qac基因序列。

分子生物学方法必将成为消毒剂耐药性检测的常用方法,并将形成相应标准。消毒剂耐药性产生的主要机制：“亚致死量”

在消毒过程中多种原因导致不能彻底杀灭微生物，使微生物长期接触“亚致死量”刺激，

长期在“选择性压力”的作用下，逐步产生消毒剂耐药性，或在临床上

逐渐出现高抗微生物群。

“亚致死量”产生的主要原因：

◆消毒剂的不规范应用：非足够浓度、非足够时间、非充分的其它条件。

◆

消毒剂的不合理应用：消毒水平等级与消毒对象的污染程度、污染微

生物种类、危险等级等不相配。

◆

长期使用某种消毒剂：即使有足够的浓度与时间也会逐渐产生耐药。◆中低效消毒剂的应用：低效消毒剂、抑菌剂、防腐剂的不合理应用。◆消毒剂性能的不稳定：不具备充分的化学稳定、物理稳定性、有效活

性稳定性等；

◆

消毒剂抗干扰能力弱：易受有机物、pH值、表面活性剂等因素干扰；◆抗生素耐药机制的传递：抗生素耐药性与消毒剂耐药作用相辅相成。

qac基因

是指位于金黄色葡萄球菌不同质粒上消毒剂抗性决定因子。qac基因家族目前已发现的有qacA、qacB、qacC、qacG、qacH、qacF、qacJ、qacE和qacE△1-sull共10种,表达多种化合物外排泵。qacA/BqacA为多重耐药基因，从多重耐药的携带内酰胺酶和金属离子耐药基因质粒pSK5中分离得到,在金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌中发现携带qacA基因，在细菌的染色体上也发现qacA基因的存在。qacA依赖质子泵动力把菌体吸收的药物排到体外,对30多种结构不同的有机化合物包括单价阳离子化合物(如季胺类化合物和染料)和二价阳离子化合物(如联脒和丙脒腙)耐药。qacB

从医院临床分离的金葡菌中分离出携带qacB基因的质粒pSK156,这是最早分离到的已知编码外排泵蛋白的质粒。80年代时又在金属离子高度耐药的质粒pSK23中也发现qacB存在。qacB与qacA不同的是,qacB仅对单价阳离子化合物耐药,对少数的二价阳离子化合物呈低度耐药。qacE和qacE△1-sullqacE、qacE△1-sull从质粒R751上的Ⅰ类整合子中分离得到，质粒R751最先从肺炎克雷伯菌中分离出来。qacE、qacE△1-sull有高度同源性，其耐药都是质子泵介导的，

对季铵盐类消毒剂(如苯扎溴铵、苯扎氯铵和溴化米芬)、双胍类化合物(如氯己定)、腙类化合物和染料耐药。◆消毒剂耐药机制：一、细菌的天然耐药性一--生化结构形成的耐药性：

固有型,即先天的由染色体控制的细菌特征。

某些菌株因其具有特殊的表层结构,对消毒剂起到屏蔽作用,从而产生天然耐药，这种耐药性均不可传递。

如消毒剂敏感菌株和耐药菌株的“外膜脂多糖”及“外膜蛋白”都存在明显的差异。

铜绿假胞菌对苯扎溴铵的敏感菌株与耐药菌株的菌壁脂类含量不同；

细菌芽胞的多层厚膜更是对消毒剂抵抗强大的结构；耐药菌株生物被膜的形成也是消毒剂耐药性的一种机制，生物被膜阻碍消毒剂的有效扩散,并与消毒剂产生交互作用,影响消毒剂与细菌的接触,而表现出耐药性。◆消毒剂耐药机制：

二、耐药性获得的遗传学途径：

获得型,即由于细菌基因突变或从另一细菌获得遗传物质而引起遗传特性的改变

细菌可因基因突变或通过获得R质粒、转座子而产生消毒剂耐药性，R质粒介导的耐药性的获得为主要途径，即菌株之间可以通过抗药性R质粒互相传递,使敏感菌株变为抗药菌株。R质粒：获得抗药性质粒(ResistancePlasmid)或抗药因子(Rfactor)，是细菌染色体外的一团DNA，带有抗药性基因。可以是抗一种药物的，也可以是抗多种药物的R因子。R质粒在细菌间的传递：

R质粒可以在细菌之间传递，使原来不带有R质粒的细菌，成为带有R质粒的细菌，从而获得对抗生素或消毒剂的抗药性。◆消毒剂耐药机制：二、耐药性获得的遗传学途径：

耐药性获得的酶学途径：

是基因途径的延续,即细菌的耐药基因可使细菌产生某些酶,使消毒剂降解而表现出耐药性,与产酶细菌对抗生素的酶降解有相似之处。超级细菌、对甲醛耐药的大肠杆菌、对汞耐药的金黄色葡萄球菌等即通过这种途径产生耐药。

耐药性获得的遗传学途径研究：

有关质粒与细菌对消毒剂耐药性关系的研究有以下四个方面：1、质粒介导的葡萄球菌对消毒剂的抗性；2、质粒介导的革兰阴性菌对消毒剂的抗性；3、质粒介导的其他革兰阳性菌对消毒剂的抗性；

4、R质粒介导的流出泵（蛋白泵）。微生物消毒剂耐药机制◆

细胞外处理：产生消毒剂分解酶，分解消毒剂；◆

细胞内处理：产生消毒剂抑制酶，使敏感性降低；

(耐药性获得的酶学途径：即细菌的耐药基因可使细菌产生某些酶,

使消毒剂降解而表现出耐药性)◆

阻止消毒剂进入细胞内：降低胞膜对消毒剂的通透；(细菌可因基因突变或通过获得R质粒、转座子而产生消毒剂耐药性，即菌株之间可以通过抗药性R质粒互相传递,使敏感菌株变为抗药菌株)◆

蛋白泵泵出：将进入细胞内的消毒剂泵出胞外；

(质粒介导的蛋白泵可将胞浆内的消毒剂成分泵出细胞外，使消毒剂浓度降低至亚毒性水平)ZuzanaSvetlíkova’等（2009）通过实验验证，细菌外膜孔道蛋白表达缺陷显著增加包皮垢分支杆菌、龟分枝杆菌对戊二醛的抗性，由于外膜孔道蛋白的缺陷，又显著增加了龟分枝杆对利福平、万古霉素、环丙沙星、克拉仙美苏、红霉素、利奈唑胺、四环素的抗性。对策！消毒剂耐药风险：4008783377对策一、建立消毒剂复合溶剂体系；对策二、建立消毒剂活性成分聚合物；对策三、形成消毒剂杀菌因子络合物；对策四、建立活性成分表面活性胶团；对策五、通过活性物质优化杀菌因子传递;对策六、改造杀菌活性成分结构;对策七、建立多种消毒成分的复合处方；对策八、开发全新化学或生物消毒成分。“健之素”应对消毒耐药的创新科技对策：溶剂体系改变耐药菌的生物特性、改变消毒剂杀菌活性：◆改变微生物细胞壁与细胞膜的通透性；◆降低微生物表面张力而提高消毒剂杀灭能力；◆改变pH环境实现对消毒剂杀菌因子的增效作用；◆

能催化加快消毒剂活性成分与微生物的生化反应；◆

能降低或消除微生物耐药蛋白泵的泵出能力。建立抗消毒剂耐药的特殊溶剂体系：对策一：

戊二醛、邻苯二甲醛的消毒耐药性比较：◆传统甲醛、戊二醛的长期广泛应用，在医院临床上产生了大量耐药菌，

如：分枝杆菌(包括龟型分枝杆菌、人结核杆菌、牛结核杆菌等),铜绿假单胞菌、

绿脓杆菌，恶臭杆菌、肠杆菌属，大肠埃希、

荧光假单胞菌等，

尤其是分枝杆菌，已成为医院感染的主要致病菌。◆而HE-OPA对所有传统醛类消毒耐药菌都高度敏感，能迅速完全杀灭：0.55%HE-OPA对抗酸性的分枝杆菌具有较快的杀灭作用，特别是对耐

戊二醛的龟枝杆菌，在25℃作用5min可杀灭5log以上，而2%戊二醛则无

法将其杀灭。----《中国消毒学杂志》2007年第24卷第5期分枝杆菌对邻苯二甲醛耐药吗？

----分枝杆菌对邻苯二甲醛高度敏感！浙江大学医学院附属第一医院内镜中心关于健之素牌邻苯二甲醛消毒液对龟分枝杆菌

的杀灭试验结论：经10个内镜样本实验证明，健之素牌邻苯二甲醛消毒液作用5min,对10个内镜样本上的龟分枝杆菌（实验菌株：龟分枝杆菌脓肿亚种ATCC93326）的杀灭率>99.99%。试验序号

对照组菌落数cfu/镜培养结果（cfu/皿）细菌残留菌数（cfu/镜）杀灭率（%）1

3.88×1080<20>99.9920<20>99.9930<20>99.9940<20>99.9950<20>99.9960<20>99.9970<20>99.9980<20>99.9990<20>99.99100<20>99.99为什么健之素邻苯二甲醛能杀灭芽胞！一系列的药剂学创新：◆

复合溶剂体系的建立：增强微生物细胞通透性而增效；◆鳌合抗氧体系的建立：避免OPA自由醛基被氧化而增效；◆

表面活性体系的建立：降低微生物表面张力而增效；◆

酸碱缓冲体系的建立：稳定提高pH值至8.5而增效；建立与OPA介电常数完全相等的复合溶剂体系；◆极大的增强了OPA的溶解、分散缸稳定性能；◆催化HE-OPA与微生物蛋白质、酶及细胞壁、细胞

浆成分的生化反应，发挥高效协同增效作用。◆提高微生物细胞壁及细胞膜的通透性，强化OPA对

微生物的组织浸入能力；◆抑制醛类消毒剂耐药菌的耐药功能，发挥抗耐药功能。健之素邻苯二甲醛（HE-OPA）复合溶剂体系：建立OPA溶液的两性表面活性体系：◆增强OPA稳定性，强化HE-OPA溶液体系的稳定性；◆降低微生物表面张力，强化OPA渗透杀菌功效；◆溶解剥离细菌生物膜EPS，有效清除细菌生物膜；◆形成表面活性胶团，强化HE-OPA抗有机物干扰功能；

HE-OPA两性表面活性体系：建立HE-OPA溶液长效螯合抗氧体系◆HE-OPA选用复合抗氧化剂，建立竞争性抗氧化机制，避免OPA结构上活性基团“自由醛基”被氧化，确保OPA生物活性的稳性有效。◆HE-OPA建立了金属离子及化学药物的鳌合机制，避免消毒过程中带入的金属离子及化学药物对OPA的化学作用,增强OPA及其溶剂体系的稳定性；

HE-OPA长效螯合抗氧体系：建立HE-OPA酸碱缓冲体系：一般醛类消毒剂的消毒效果极易受到溶液pH值的影响。

pH值6.0-9.0时OPA消毒效果随pH值提高而增强；pH值8.0-9.0时OPA消毒效果最佳；pH值﹥10.0时OPA消毒效果随pH值提高而降低。一般情况下OPA的稳定性在pH值﹥7时其稳定性念急剧下降。故国外OPA溶液的pH值一般设在7.0-7.5之间而HE-OPA的酸碱缓冲体系可将其溶液pH值调整至8.5-9.0，而稳定性不受影响，因HE-OPA具有稳定的溶剂体系和抗氧化体系。pH值的提高大大增强了OPA的杀灭微生物效果。同时，HE-OPA酸碱缓冲剂同时发挥消毒过程中抗酸碱干扰作用。HE-OPA酸碱缓冲体系：HE-OPA药剂创新处方研究过程枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭试验结果不同处方不同时间杀灭效果作用不同时间的平均杀灭率及范围60min90min120min处方①70.26%75.02%87.07%处方②83.35%88.43%93.16%处方③88.49%95.56%99.95%处方④99.97%100%100%

处方①：OPA复合溶剂体系

处方②：处方①+

两性表面活性体系处方③：处方②+鳖合抗氧化体系处方④：处方③+

酸碱缓冲体系邻苯二甲醛能杀灭细菌芽胞吗？国际学术界一直认为邻苯二甲醛不能杀灭芽胞，在一般情况下邻苯二甲醛的确不能杀灭芽胞，戊二醛在杀灭细菌芽胞过程中常出现假阴性。浙江大学医学院附属第一医院内镜中心关于健之素牌邻苯二甲醛消毒液对枯草杆菌黑色变种芽孢

的杀灭试验结论：经7个内镜样本实验证明，健之素牌邻苯二甲醛消毒液作用5min,对7个内镜样本上的枯草杆菌黑色变种芽孢（枯草杆菌黑色变种芽孢ATCC9372）的杀灭率>99.9%。试验序号

对照组菌落数cfu/镜培养结果（cfu/皿）细菌残留菌数（cfu/镜）杀灭率（%）1

4.8×108397.80×104

99.9821392.78×104

99.993551.10×105

99.9741282.56×104

99.9952324.64×10399.9961102.20×104

99.9971903.80×104

99.99健之素邻苯二甲醛消毒剂实验结论

北京市疾病预防控制中心健之素邻苯二甲醛消毒剂5969mg/L(原液)作用120min对枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭率达100%健之素邻苯二甲醛消毒剂实验结论

北京市疾病预防控制中心健之素邻苯二甲醛消毒剂5969mg/L(原液)现场模拟试验结论：作用120min可完全杀灭止血钳上枯草杆菌黑色变种芽胞，达到灭率要求健之素邻苯二甲醛消毒剂复审实验结论中国疾病预防控制中心健之素邻苯二甲醛消毒剂原液(6030mg/L)现场模拟试验:作用90min可完全杀灭人工污染于止血钳齿部上的枯芽杆菌黑色变种芽胞，达到灭菌要求。建立消毒剂活性成分聚合物：

选择同性聚合物与消毒活性成分形成正电聚合物：

◆

能降低或消除微生物耐药蛋白泵的泵出能力

◆

堵塞微生物呼吸通道，使微生物窒息而死

◆

抑制微生物分裂而使其丧失繁殖能力；

对策二：

选择具有协同增效作用的络合剂与消毒活性成分形成络合物：◆

能降低或消除微生物耐药蛋白泵的泵出能力；◆使消毒活性成分不易被细菌向细胞外产生的酶类物质所分解；◆加速消毒活性成分与微生物组织发生氧化、交联等生化反应。形成消毒剂杀菌因子络合物：对策三：对策四：科学使用，更新使用,交替使用,联合使用。交替使用：物表消毒：氯类/过氧化物类/双链季铵盐类等皮肤消毒：醇类/双胍类/季铵盐类消/碘类等器械消毒：氯类/醛类/过氧化物类/烷基化物类等消毒剂的联合应用◆氧化类与非氧化类消毒剂的联合应用；◆表面活性类消毒剂与非表面活性类消毒剂联合应用；◆作用于细胞壁和作用于细胞内物质的消毒剂联合应用；◆速效消毒剂与持效消毒剂的联系应用；◆化学消毒剂与生物消毒剂的联合应；一种消毒剂很难杀灭所有致病微生物！不同微生物对不同消毒剂敏感性不同！各类微生物对消毒剂的敏感性注：++++高度敏感，+++中度敏感，++敏感，+抑制或可杀灭，-抵抗消毒剂

G+菌G-菌抗酸菌亲脂病毒亲水病毒真菌芽胞季胺盐类+++++++－+－－－氯已定+++++++－+－－－碘伏++++++++－－－－－醇类++++++++++++－－－酚类++++++++++++－+－双长链季铵盐+++++++++++++++++++++含氯类++++++++++++++++++++过氧化物++++++++++++++++++环氧乙烷+++++++++++++++++++醛类+++++++++++++++++++医院感染致病菌对消毒剂的敏感性各不相同！中低效消毒剂作用微弱大部分高水平消毒剂有效含氯消毒剂对HCV作用微弱人类免疫缺陷病毒HIV乙型肝炎病毒HBV丙型肝炎病毒HCV结核杆菌等过氧化物、氯对其有效邻苯二甲醛有效对甲醛、戊二醛耐药鲍曼不动杆菌龟型分枝杆菌人结核杆菌牛结核杆菌过氧化物、OPA、氯有效对洗必泰、双胍类、单链季铵盐等耐药耐万古霉素肠球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌NORWAIK病毒对含氯、过氧化物、醛类、碘类消毒剂敏感，其它不敏感幽门螺杆菌对氯、过氧化物、醛类消毒剂敏感，对醇、洗必泰、双胍、单链季铵盐不敏感人乳头瘤病毒大部分消毒剂不能灭活6.0-7.5%过氧化氢、1-2%过氧化氢与过氧乙酸的复合消毒剂对其有效隐孢子菌医院感染致病菌对消毒剂的敏感性各不相同！克-雅病病原体CJD有效消毒剂：＞1000mg/L含氯消毒剂、氢氧化钠、

0.9%1mol/L石碳酸、硫氰酸胍无效消毒剂：50-55%乙醇、50mg/L二氧化氯、3.7%甲醛、5%戊二醛、3%过氧化氢、2%碘酊、过氧乙酸、0.6%石碳酸、0.1%-0.8%高锰酸钾、医院感染致病菌对消毒剂的敏感性各不相同！双长链季铵盐与稳态过氧化氢的联合应用非氧化类消毒与氧化类消毒剂的联合应用双长链季铵盐消毒液◆

极强的抗有机物干扰能力和渗透消毒能力，确保消毒效果；◆

高度稳定的化学性质和较强的附着力使其具有长效消毒作用；◆

极其温和的性能使其具有无毒、无刺激、无损伤的优点。复合过氧化氢消毒液：◆

能杀灭包括芽胞及分枝杆菌在内所有医院感染致病微生物；◆

其强氧化性能使其对消毒对象仍有轻微损伤；◆氧化类消毒剂消毒效果较易受有机物干扰；用于环境与物体表面消毒（ICU、手术室、新生儿室、检验科、口腔科等）双长链季铵盐与稳态过氧化氢的联合应用用于环境与物体表面消毒（ICU、手术室、新生儿室、检验科、口腔科等）日期使用产品应用浓度使用方法星期一健之素牌双长链季铵盐消毒液0.2%-0.3%喷擦或冲刷星期二健之素牌复合过氧化氢消毒液2%-3%喷擦或冲刷星期三健之素牌双长链季铵盐消毒液0.2%-0.3%喷擦或冲刷星期四健之素牌双长链季铵盐消毒液0.2%-0.3%喷擦或冲刷星期五健之素牌复合过氧化氢消毒液2%-3%喷擦或冲刷星期六健之素牌双长链季铵盐消毒液0.2%-0.3%喷擦或冲刷星期日健之素牌双长链季铵盐消毒液0.2%-0.3%喷擦或冲刷建立双链季铵盐正电高分子聚合体系建立双链季铵盐抗消毒耐药功能◆使耐药菌形成的蛋白泵之泵出功能失效，从而消除耐药菌对季铵盐的耐药性；◆聚合物薄膜吸附于带负电的微生物表面，

抑制微生物分裂而使其丧失繁殖能力；◆聚合物薄膜堵塞微生物呼吸通道，

使微生物窒息而死。4﹢﹢﹢﹢﹢﹢﹢﹢﹢﹢﹢﹢﹢﹢﹢双链季铵盐﹢阳离子活性剂﹢正电增效剂﹢◆季铵盐对耐药性肺炎克雷伯菌的杀灭效果：枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭效果：季铵盐消毒剂单链季铵盐：十一烷基二甲基溴化苄基铵双链季铵盐：十二烷基二甲基溴化苄基铵与双癸基二甲基溴化铵1：1混合物双链季铵盐：双癸基二甲基溴化铵单一溶液双链季铵盐：双癸基二甲基溴化铵健之素正电高分子聚合物应用浓度1500mg/L1500mg/L1500mg/L1500mg/L消毒时间5分钟5分钟5分钟5分钟杀灭率%----70.25%89.32%99.99%健之素复合过氧化氢的重大科技突破：◆独特的络合技术，全面解决了过氧化氢的稳定性问题

----形成高浓度稳态过氧化氢！

（过氧化氢含量12%，年下降1.6%）HE-HPCHealthEssenceHydrogenPeroxideCompoundDisnfectant耐药菌

抗生素消毒剂医院感染最大风险消毒剂耐药问题普遍存在！ZuzanaSvetlíkova’等（2009）通过实验验证，细菌外膜孔道蛋白表达缺陷显著增加包皮垢分支杆菌、龟分枝杆菌对戊二醛的抗性，由于外膜孔道蛋白的缺陷，又显著增加了龟分枝杆对利福平、万古霉素、环丙沙星、克拉仙美苏、红霉素、利奈唑胺、四环素的抗性。消毒剂耐药与抗生素耐药相辅相成、互相传递：消毒干扰因素风险内镜消毒第三大风险：4008783377

消毒剂消毒效果影响因素：酸碱性物质、有机物、金属离子、表面活性剂、化学药物、消毒对象材质、稀释用水水质、温度、湿度、光线等。单因素影响：其它因素不变，研究单因素对消毒效果的影响；多因素影响：正交试验研究多因素间交互作用对消毒效果的影响。酸碱性干扰因素：几乎所有的消毒剂消毒效果都会受pH值影响！含氯消毒剂：HOClH++OCl-H+OH-OCl-带负电荷，不易透过细胞壁；HOCl氧化能力及消毒效果比OCl-强数十倍不同PH值时HOCl、OCl-变化比例：

PH值

OCl-(%)

HOCl(%)

6810

3.276.899.7

96.823.20.3酸性

碱性

效果效果

碘类消毒剂：适宜PH值5.5-7

酸性条件下：I-+IO-+2H+I2+H2O

游离碘增多，消毒效果↑

碱性条件下：I-+2OH-I-+IO-+H2O

游离碘减少，消毒效果↓季胺盐类消毒剂：适应PH值为9-10；

碱性条件下：消毒效果增强

PH＝10是时消毒效果比PH＝5时强10多倍洗必泰：适应PH值为5.5-8：弱碱性时活性最佳，但PH＞8时，出现游离基沉淀，

PH＜8时，消毒效果明显降低酸碱性干扰因素：几乎所有的消毒剂消毒效果都会受pH值影响！醛类消毒剂：1、PH＜7.4：酸性↑，生物活性↓，消毒效果↓

如：对某些病毒，PH＝7时的消毒效果要比PH＝5时强约10倍酸性条件下形成水合物和类似乙缩醛的聚合物2、PH＝7.4-8.5范围，生物活性稳定，不易受PH值影响戊二醛形成醛醇型不饱和聚合物3、PH＞8.5：碱性↑，生物活性↑，消毒效果↑，稳定性↓醛醇型不饱和聚合物（可与微生物蛋白质氨基发生反应）聚合度增高。北京健之素医药科技有限公司酸碱性干扰因素：几乎所有的消毒剂消毒效果都会受pH值影响！试验菌染菌量log/ml不同条件下完成杀灭99.999%所需的时间（min）不含有机物含10%牛血清含25%牛血清含50%牛血清MTB8.16251245M.terrae9.0210204575MAI9.626090150210有效氯含量1000mg/L◆对微生物形成保护膜：使消毒活性成分难以接触微生物而降低其消毒效果；◆与消毒剂有效成分发生结合反应：消耗消毒剂有效成分，使消毒活性丧失或降低。有机物干扰因素：对策！消毒干扰因素风险：4008783377强化消毒前清洗过程尽量减少各种干扰因素强化清洗：酶的活性及其影响因素

影响酶的活性的因素：

物理因素：加热、光照等

化学因素：金属离子、表面活性剂、酸及盐类化合物等生物因素：酶之间的生物降解以上因素都可能使酶变性而失去催化作用，因此保持酶活是酶制剂的关键技术，而且具有较高的技术难度！酶的活性----即酶的催化活性，即酶的催化能力和强度。是指在给定各种条件下酶催化一个反应的能力。简称“酶活”选择具有抗干扰功能的消毒剂尽量健之素邻苯二甲醛消毒剂实验结论

北京市疾病预防控制中心健之素邻苯二甲醛消毒剂5969mg/L(原液)，在25%小牛血清存在条件下，对枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭率无影响

HE-OPA

高效抗干扰！◆全面抗干扰：

抗酸碱干扰，pH值适应范围3-9

；

抗有机物干扰，25%-50%有机物不影响效果。◆原液使用：

本品一元包装，原液使用，不需活化；◆连续使用：

本品可连续使用7-14天或连续60-80次日本消化内镜技师委员会2004：内窥镜清洗消毒的标准（第二版）

消毒剂

高水平消毒时间优点

缺点

安全风险评估

戊二醛

浸泡10分钟，然后用清水洗净，再用酒精进行追加干燥处理

可靠，在有机物存在的情况下具有较好的杀菌效果

对戊二醛有耐性的脓肿分枝杆菌用2%的戊二醛进行45分钟的消毒也没有死毒性评估：为了避免接触戊二醛，尽可能的使用内窥镜自动冲洗机，并且设置专用的排气装置

邻苯二甲醛

5分钟对与皮肤和粘膜的刺激较少，臭气也较少，物质适应性很优越价格贵，容易和蛋白质发生结合虽然能使蛋白质等有机物变黑，但这是因为洗净工作不充分造成的

过氧乙酸

5分钟消毒效果即使在有机物中效果也不低

价格贵，分解之后，会生成醋酸，过氧化氢，氧气，水，所以会生成有害物质

因为金属腐蚀性很高，所以，制造商调节PH值也出售能够使用内窥镜的东西的专用的洗净机

酸性电解水盐度20～50ppm，PH值2.7，在很短的10秒钟内就能杀死微生物

廉价

0.1％以上的有机物（血清）就会使其失去杀菌能力，而且，要杀死抗氧菌需要2分钟以上，对内窥镜有腐蚀，而且，考虑到消毒效果和稳定性，盐浓度和能确定PH值的东西是很必要的消毒剂的应用选择风险内镜消毒第四大风险：◆快速消毒（5分钟之内）；◆高水平消毒（能杀灭芽胞及分枝杆菌）；◆广谱消毒（杀灭各种致病微生物）；◆全面抗消毒剂耐药（分枝杆菌等高度敏感）；◆EPS裂解功能（细菌生物膜--聚合多糖基质）；◆抗有机物干扰（抗力至少大于有机物25%）；◆抗酸碱性干扰（pH适应范围越宽越好）；◆克服微生物表面张力（高效渗透消毒能力）；◆良好的材质兼容性（无腐蚀、无损伤）；◆良好的理化稳定性（无主药分解及溶剂挥发）;◆安全无害（实际无毒、无刺激、无致癌等作用）；理想内镜消毒剂消毒剂的消毒水平等级：灭菌剂(sterilization)

能杀灭一切微生物的灭菌剂，无菌保证水平要达到10-6。高水平消毒剂（high-leveldisinfection）

能杀灭各种微生物，在合适条件下，使用足够浓度时也能杀灭细菌芽孢的消毒剂。中效消毒剂（intermediate-leveldisinfectant）

可杀灭各种细菌繁殖体、结核杆菌、亲脂病毒和某些亲水病毒、真菌孢子，但不能杀灭芽胞的消毒剂。低效消毒剂（low-leveldisinfectant）

只能杀灭除结核杆菌以外的各种细菌繁殖体，亲脂病毒和某些真菌的消毒剂。防腐（antisepsis）

杀灭或抑制活体组织上微生物的生长繁殖，以防止组织感染，称为防腐。保藏（preservation）

采用化学药物或物理的方法防止物质的生物学腐败，称为保藏（或保存）。抗菌（antibacteria）和抗菌剂(antibacterialagent)抑菌（bacteriostasis）和抑菌剂（bacteriostasisagent）灭菌剂高效消毒剂中效消毒剂低效消毒剂醛类：

甲醛、戊二醛．

邻苯二甲醛烷基化物类:

环氧乙烷、

环氧丙烷乙型丙内酯、

溴化甲烷过氧化物类:

过氧乙酸过氧戊二酸过氧化氢与过氧

乙酸的复方制剂氯类

次氯酸盐类、氯胺类．氯化异氰脲酸类氯化海因类溴类：二溴海因、溴氯海因甲氧基乙内酰脲类:

二溴二甲基乙内酰脲二氯二甲基乙内酰脲醛类：甲醛、戊二醛、OPA过氧化物类：过氧化氢、过氧乙酸、过碳酰铵、过硫酸氢钾、过氧戊二酸、二氧化氯、臭氧双长链季铵盐类双癸基二甲基溴化铵、双癸基二甲基氯化铵双季铵盐类碘类：

碘酊碘伏洗必泰碘醇类：

乙醇异丙醇丙二醇．三氯丁醇金属类：

高锰酸钾红汞．银离子异塞唑啉酮单链季铵盐：苯扎氯铵苯扎溴铵吡啶溴铵双胍类：氯己啶阿立西定酸或碱类：乳酸．醋酸.碳酸钠酚类：石炭酸（苯酚）煤酚皂（甲酚）卤化酚（六氯酚）氯羟二苯醚DP300植物类消毒成分消毒剂类别及其消毒水平等级灭菌剂高效消毒剂中效消毒剂低效消毒剂灭菌器械高度危险物品中度危险物品低度危险物品分支杆菌（结核杆菌、枯草杆菌、牛结核杆菌、梭状芽胞杆菌、龟型分枝杆菌）

细菌芽孢（炭疽杆菌芽泡、枯草杆菌芽孢、破伤风杆菌芽孢、肉毒杆菌芽孢）脂质病毒（中等大小病毒）(单纯胞疹病毒、呼吸道合胞病毒、巨细菌病毒、HBV、HIV）革兰氏阳性菌（G﹢）(葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌）革兰氏阴性菌（G﹣）(大肠杆菌、变型杆菌、绿脓杆菌、克雷白菌、脑膜球菌、淋球菌）真菌(白色念珠菌、新型隐球菌、表皮癣菌属、毛癣菌属、曲霉菌、青霉菌、芽生菌属）亲水性病毒（小病毒）(甲型肝炎、脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、鼻病毒）朊毒体(最大抵抗力等级）隐形孢子(Coccidia)

大型无包膜病毒（L-non-envenloped-V）高效消毒中效消毒灭菌剂微生物对消毒剂抵抗力大小顺序低效消毒美国英国欧盟澳大利亚日本中国邻苯二甲醛过氧乙酸戊二醛邻苯二甲醛过氧乙酸酸化水邻苯二甲醛过氧乙酸酸化水戊二醛邻苯二甲醛过氧乙酸戊二醛邻苯二甲醛过氧乙酸酸化水含氯消毒剂戊二醛戊二醛酸化水邻苯二甲醛含氯消毒剂国内外常用的内镜消毒剂美国FDA注册和推荐的内镜消毒剂

>2.4的戊二醛溶液；

0.55%的邻苯二甲醛溶液；

含1.64%石炭酸/石炭酸盐的0.95%戊二醛溶液；

含0.23%的过氧乙酸的7.35%过氧化氢溶液；

7.5%的过氧化氢溶液；

美国胃肠内镜协会（ASGE）推荐使用消毒剂：

0.55%的邻苯二甲醛溶液；不含表面活性剂的戊二醛戊二醛邻苯二甲醛复合过氧化物

替代区别邻苯二甲醛戊二醛浓度醛的浓度低

0.55%醛的浓度高2～3%浓度消毒时间

5分钟达到高效消毒水平，无耐药菌

30-45

分钟达到高效消毒水平，耐药菌高效消毒并可达灭菌水平，无耐药菌分枝杆菌、铜绿假单胞菌等对其耐药稳定性性质稳定，一元包装不需活化，不挥发、不易被氧化。性质不稳定，二元包装需活化，活化后性质不稳定，易挥发，易被氧化。连续作用可连续使用14天或60-80次连续使用时间短副作用性能温和，无腐蚀、无刺激性；轻度腐蚀，有刺激气味，刺激眼鼻抗有机物强力抗有机物干扰，清除有机生物膜抗有机物干扰力弱，不易清除生物膜抗酸碱抗酸碱性干扰，pH值适应范围3-9pH值适应范围小7.4-8.5邻苯二甲醛与戊二醛性质与功能区别健之素邻苯二甲醛消毒剂实验结论

北京市疾病预防控制中心健之素邻苯二甲醛消毒剂5969mg/L(原液)能量试验结论：最低合格浓度为邻苯二甲醛含量900mg/L常见微生物污染物的消毒剂选择：人类免疫缺陷病毒HIV、乙型肝炎病毒HBV、丙型肝炎病毒HCV、结核杆菌等：

大部分高效消毒剂有效，但含氯消毒剂对HCV作用弱，中低效消毒剂杀灭对数值小于3。隐孢子菌：大部分消毒剂不能灭活，6.0-7.5%的过氧化氢、氧化乙烯杀灭对数值大于3。幽门螺杆菌：OPA、戊二醛、双胍、PEG-I、含氯消毒剂敏感，其它不敏感;

大肠杆菌0157：H7：含氯消毒剂、双链季铵盐敏感人乳头瘤病毒：含氯消毒剂、OPA、戊二醛、

PEG-I敏感，

醇、单链季铵盐、酚类、双胍不敏感.耐万古霉素肠球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、NORWAIK病毒：

洗必泰、季铵盐、双胍类等耐药，绝大部分高效消毒剂有效克-雅病病原体（CJD）：有效消毒剂（1h杀灭对数值大于3）：＞1000mg/L含氯消毒剂、氢氧化钠、0.9%1mol/L石碳酸、硫氰酸胍无效消毒剂（1h杀灭对数值小于3）：50-55%乙醇、50mg/L二氧化氯、3.7%甲醛、5%戊二醛、3%过氧化氢、2%碘酊、过氧乙酸、0.6%石碳酸或石碳酸盐、0.1%-0.8%高锰酸钾、

消毒剂的毒理学风险内镜消毒第五大风险：北京健之素医药科技有限公司

LD100—绝对致死量LD50—半数致死量MLD（LD）—最小致死量MTD—最大耐受量MEL—最小有作用剂量MNEL—最大无作用剂量毒性作用剂量化学物质的急性毒性分级标准（WHO，1977）毒性分级ig大、小鼠LD50吸入大、小鼠LC50涂皮兔LD50

人口服可能的致死量

（mg/Kg）（mg/L）（mg/Kg）(g)极毒＜1＜10＜50.06剧毒

1-5010-1005-444中等毒

51-500101-100045-35030低毒

501-50001001-10000351-2180250实际无毒＞5000＞10000＞2180＞1200注：吸入毒性LC50指中毒栏中的浓度，一次中毒2～4h,观察24天。我国消毒剂毒性评价的毒理学试验方法◆急性经口毒性试验检测消毒剂对实验动物的急性毒性作用和强度，并为其它性毒性试验提供剂量依据。观察给药后14d动物中毒表现、死亡数量和时间，并计算LD50（半数致死量）。◆急性吸入毒性试验检测消毒剂对实验动物的急性吸入毒性作用和强度。选用小鼠或大鼠，在染毒柜内作一次性吸入暴露。暴露时间为2～4h。观察14d，计算LC50（半数致死浓度）。◆皮肤刺激试验检测消毒剂对实验动物皮肤的刺激或腐蚀作用和强度。根据不同时间动物局部皮肤的红斑（或）水肿反应程度，计算皮肤刺激指数，评定对受试功物皮肤刺激级别（无刺激性、轻刺激性、中等刺激性、强刺激性）。我国消毒剂毒性评价的毒理学试验方法◆急性眼刺激试验检测消毒剂对实验动物眼睛的急性刺激和腐蚀作用及其强度。

将受试物溶液1～2滴，滴入家兔的一侧眼结膜囊内，另一侧眼作为对照。滴受试物后，立即使眼被动闭合4s，用生理盐水冲洗5min，于滴眼后1、24、48h和4、7d，用肉眼检查家兔眼角膜、巩膜和结膜的损伤程度，计算急性眼刺激积分指数，

评定该受试物对黏膜的刺激强度（无刺激性、轻度刺激性、刺激性、中度刺激性、轻重度刺激性、重度刺激性）。◆阴道粘膜刺激试验检测消毒剂对实验动物阴道粘膜的刺激作用和强度。

选用成年雌性家兔或大鼠，分为染毒组、赋形剂对照组和空白对照组，家兔每组4只，大鼠每6只。用适当大小的灭菌的棉条浸以受试物置动物阴道内（赋形剂对照组以同样大小的棉条浸以灭菌生理盐水），与阴道黏膜接触

4h。于24h时处理动物，取出局部阴道组织，观察有无充血、水肿现象。

根据阴道黏膜的变化，判断消毒剂对黏膜刺激强度级别（无刺激性、轻刺激性、中等刺激性、强刺激性）。我国消毒剂毒性评价的毒理学试验方法◆皮肤变态反应试验检测消毒剂重复接能后，实验动物产生皮肤变态反应的可能性及其强度。根椐致敏率判断该消毒剂致敏强度（极轻、轻度、中度、强度、极强）。◆蓄积毒性试验检测消毒剂多次接触对实验动物的蓄积毒性作用。根椐出现受试动物出现死亡的剂量或未出现死亡情况判断蓄积毒性程度（极强蓄积毒性、强蓄积毒性、中等蓄积毒性、弱蓄积毒性）。◆致突变试验检测消毒剂对体处培养的动物细胞的基因突变作用。（1）体外哺乳动物细胞基因突变试验；（2）体外哺乳动物细胞染色体畸变试验；（3）小鼠骨髓细胞多染红细胞微核试验；（4）哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验；（5）程序外DNA修复合成试验；（6）小鼠精子畸形试验；（7）睾丸生殖细胞染色体畸变试验。我国消毒剂毒性评价的毒理学试验方法◆亚慢性毒性试验检测消毒剂较长期染毒对实验动物的毒性作用用及其靶器官。确定受试物最小观察到有害作用量和最大未观察到有害作用剂量及毒性作用的靶器官。◆致畸试验检测消毒剂对妊娠实验动物有无致畸胎性。确定其末观察到发育毒性的剂量，以致畸指数表示：致畸指数≤10为基本不致畸，10-100为致畸，＞100为强致畸◆慢性毒性试验

检测受试物长期染毒对实验动所产生的毒性作用。确定受试物最小观察到有害作用量和最大未观察到有害作用剂量及毒性作用的靶器官。◆致癌试验检测长期接触消毒剂后实验动物出现肿瘤的情况，评价其致癌性。计算致癌发生率。

<1>有效氯与有机物反应生成卤代烷氯胺类生成物的毒性

CCl4

(四氯化碳)

CH4(-CH3)+HClO

致癌、可引起肝小叶中心坏死

CHCl3(氯仿)

CH2Cl-CH2Cl(二氯乙烷)引起肾脏损害

CH2=CH2(-CH2-CH3)+HClOCH2Cl-CHCl2(三氯乙烷)引起神经毒性

RR’-NH+HOClRR’-NCl(氯胺类)引起肾脏损害

含氯消毒剂毒性大多为低毒级物质含氯消毒剂毒性主要来源<2>有效氯消毒剂自然分解反应中间体的毒性

ClHNNO=CC=OO=CC=O

Cl-NN-Cl

NN

CC

0(LD50=1000-1500mg/kgBW)

(异氰脲酸LD50=500-700mg/kgBW)

NaNa

NNO=CC=OO=CC=O