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文档简介

一体外培养细胞的生长增殖过程原代培养期:从体内取出组织接种培养到第次传代培养这个阶段,一般持续1-4周。这个阶段细胞比较活跃,有细胞分裂,但不旺盛。传代期:从原代培养的细胞的一经传代后便称细胞系。细胞增殖旺盛,当传代10-50次后,细胞增殖缓慢,以致完全停止衰退期:细胞增殖缓慢或不增殖。细胞轮廓增强,最后衰退凋亡。1.原代培养(PrimaryCulture)期:也称初代培养,即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,般持续1-4周。此期细胞呈活跃的移动,可见细胞分裂,但不旺盛。初代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。细胞群是异质的(Heterogeneous),也即各细胞的遗传性状互不相同,细胞相互依存性强。如把这种细胞群稀释分散成单细胞,在软琼脂培养基中进行培养时,细胞克隆形成率(CloningEfficiency)很低,即细胞独立生存性差。克隆形成率即细胞群被稀释分散成单个细胞进行培养时,形成细胞小群(克隆)的百分数。初代培养细胞多呈二倍体核型;由于原代培养细胞和体内细胞性状相似性大,是检测药物很好的实验对象2.传代期初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系(CellLine)。在全生命期中此期的持续时间最长。在培养条件较好情况下,细胞增殖旺盛,并能维持二倍体核型,呈二倍体核型的细胞称二倍体细胞系(DiploidCellLine)。为保持二倍体细胞性质,细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。当前世界上常用细胞均在不出十代内冻存。如不冻存,则需反复传代以维持细胞的适宜密度,以利于生存。但这样就有可能导致细胞失掉二倍体性质或发生转化。一般情况下当传代10~50次左右,细胞增殖逐渐缓慢,以至完全停正,细胞进入第三期。本初代培养(连续细胞系传代期1214周3,袁退期:此期细胞仍然生存,但增殖很慢或不增殖;细胞形态轮廓增强,最后衰退凋亡。在细胞生命期阶段,少数情况下,在以上三期任何一点(多发生在传代末或衰退期),由于某种因素的影响,细胞可能发生自发转化(SpontaneousTransformation)。转化的标志之一是细胞可能获得永生性(Immortality)或恶性性(Malignancy)。细胞永生性也称不死性,即细胞获持久性增殖能力,这样的细胞群体称无限细胞系(InfiniteCellLine),也称连续细胞系(ontinuouscellline)。无限细胞系的形成主要发生在第二期末,或第三期初阶段。细胞获不死性后,核型大多变成异倍体」He

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