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文档简介

、用于基因克隆的载体1载体的概念(1)携带外源DNA进入宿主细胞的工具(2)能够运载外源DNA片段(目的基因)进入受体细胞,具有自我复制能力,使外源DNA片段在受体细胞中得到扩增和表达,不被受体细胞的酶系统所破坏的一类DNA分子。(3)实质:用来携带目的基因片段进入受体细胞。第三章基因工程的就体和受体(5学时)2载体的功能(functionofvector)●运送外源基因高效转入受体细胞●为外源基因提供复制能力或整合能力●为外源基因的扩增或表达提供必要的条件第三章基因工程的就体和受体(5学时)3载体应具备的条件(characteristicsofvector)可转移性:具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性。具有与受体细胞相适应的复制位点(ori,originofreplication)或整合位点。具有较高的外源DNA的装载能力。■多克隆位点(multiplecloningsite,Mcs):具有多种限制性内切酶的单一切点。具有合适的筛选标记(selectionmarker)安全,不含对受体细胞有害的基因,不会任意转入受体细胞以外的其他生物细胞中。第三章基因工程的就体和受体(5学时)4载体的种类质粒(plasmid)·噬菌体或病毒DNA·考斯质粒(cosmid)与噬菌粒·人造染色体载体第三章基因工程的就体和受体(5学时))质粒(plasmid)1.质粒的定义质粒是生物细胞内固有的、能独立于染色体而自主复制,并被稳定遗传的一类核酸分子。■质粒常见于原核细菌和真菌中。■绝大多数的质粒是DNA型的。■绝大多数质粒具有共价、封闭、环状的分子结构,即cDNA(covalentlyclosedcircularDNA,CCcDNA)质粒DNA的分子量范围:1-300kb。■功能:进行细胞间接合,并带有一些基因,如产

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